發(fā)布時間：2020-06-02 12:51

【摘要】：禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)是一種全世界范圍內流行的家禽和野禽常見的傳染病病原。Ⅰ亞群禽腺病毒分為A、B、C、D、E 5個種,12個血清型,其中FAdV-8b主要引起包涵體肝炎(IBH),FAdV-4主要引起心包積水-肝炎綜合征(HHS)。自2010年以來,雞Ⅰ群禽腺病毒引起的IBH病例在我國白羽肉雞中呈增長態(tài)勢,2014年我國雞只感染HHS的病例僅有零星發(fā)生,2015年已在全國全面爆發(fā),給養(yǎng)雞業(yè)造成了嚴重的經濟損失。為深入揭示FAdV的致病機理及其病理學特點,進而制定出切實有效的防控IBH和HHS的方案及措施,開展了本項研究。1、為了調查魯豫京等10省市FAdVI的流行情況,對2015～2017年在山東、河南和北京等10省市收集的455份疑似FAdVI陽性樣品進行了檢測。檢測結果表明:2015～2016年感染率逐步上升,2017年感染率有所下降;發(fā)病率比較高的省市是山東、江蘇、河南和北京;商品蛋雞感染率比較高,其次是黃羽肉雞和白羽肉雞;檢測結果還表明雞Ⅰ群禽腺病毒病的發(fā)生具有明顯的季節(jié)性,在每年6～8月份是該病的高發(fā)期,10～11月份是另一個感染高發(fā)期。測序結果表明:流行的主要血清型為FAdV-8b 和 FAdV-4。2、為了進一步研究膠東地區(qū)流行毒株的病毒生物學特點及血清學特性,2013年從本地區(qū)某肉雞養(yǎng)殖場疑似包涵體肝炎的肝組織病料中分離鑒定出FXWH-8b毒株,2015年從本地區(qū)某肉種雞養(yǎng)殖場疑似心包積水-肝炎綜合征的肝組織病料中分離鑒定出FXWH-4毒株。然后對兩個分離株采用理化特性檢驗試驗和瓊脂糖凝膠擴散試驗(AGP)進行了檢測,理化特性檢測結果表明:分離毒株分別經BUDR、氫氧化鈉(pH=10)和60℃ 1h處理后,接種雞胚,孵育24h,雞胚表現正常,經PCR檢測陰性;而經乙醚、氯仿和鹽酸(pH=3)處理后的分離毒株,接種雞胚,孵育24h,不影響病毒在雞胚中的增殖,雞胚出現明顯的病變,經PCR檢測陽性。AGP試驗結果表明:FXWH-8b株與FAdV-8b標準株AV215(FAV-8)的陽性血清呈陽性反應;FXWH-4株與FAdV-4標準株AV211(FAV-4)的陽性血清呈陽性反應。FXWH-8b株與FXWH-4株沒有血清學交叉反應。3、為了深入揭示FAdV的致病機理及其病理學特點,采用上述本研究中分離的2個毒株,通過腿部肌肉注射方式接種15d的SPF雞,結果表明:FXWH-8b株和FXWH-4株均能在24h內引起試驗雞發(fā)病,表現明顯的臨床癥狀和剖檢變化;H.E染色可見兩個分離株均可引起腦、胸腺、氣管、心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腺胃、胰臟、十二指腸、空腸、盲腸和法氏囊等器官出現明顯的病理變化,均未發(fā)現核內包涵體。PCR結果表明FXWH-8b株攻毒后72h,FXWH-4株攻毒后48h,在病雞肝臟、肺臟、腎臟、腺胃、空腸和盲腸組織中均檢測出了該病毒的核酸,而且兩個毒株在攻毒后均可較快地在多個組織器官中定植。免疫組化結果顯示:FXWH-8b株在肝臟組織存在強陽性信號,FXWH-4株在肝臟、腎臟、十二指腸和空腸組織存在陽性信號。4、為了解決目前我國沒有預防FAdV感染的商品化疫苗的問題,本研究首先對2個分離的毒株各自制成的細胞培養(yǎng)滅活疫苗進行了同源性抗體檢測和交叉攻毒保護試驗,結果表明:兩個分離病毒株的疫苗均能較好地產生抗體,并對自身毒的攻毒感染均有較好的保護效果,但沒有交叉保護作用。而后,用FAdV-4毒株對3個公司FAdVI的細胞培養(yǎng)二價滅活疫苗進行了攻毒保護試驗,結果顯示:3家公司的疫苗均能對FAdV-4病毒的感染有較好的保護作用。然后又對4種疫苗(FAdV-8b發(fā)病雞肝組織滅活疫苗、FAdV-8b雞胚組織滅活疫苗、FAdV-8b和FAdV-4發(fā)病雞肝組織二價滅活疫苗和FAdV-8b和FAdV-4細胞培養(yǎng)二價滅活疫苗)進行了 5組32批次小型田間試驗,結果表明:FAdV-8b發(fā)病雞肝組織滅活疫苗對FAdV-8b毒株的感染有較好的保護作用,但對FAdV-4毒株的感染沒有保護作用;FAdV-8b雞胚組織疫苗對FAdV-8b和FAdV-4兩個毒株的感染均無保護作用;FAdV-8b和FAdV-4發(fā)病雞肝組織二價滅活疫苗和FAdV-8b和FAdV-4細胞培養(yǎng)的二價滅活疫苗均對目前膠東地區(qū)的流行毒株的感染有較好的保護作用。根據雞Ⅰ群禽腺病毒的發(fā)病日齡結合疫苗的保護效果制定了用FAdV-8b和FAdV-4發(fā)病雞肝組織二價滅活疫苗或FAdV-8b和FAdV-4細胞培養(yǎng)二價滅活疫苗,按照3次(6W頸部皮下、18W和22W胸肌)注射,每次0.5mL/羽的免疫程序,以防控此病。通過比較黃芪多糖+VC+氟苯尼考與單獨使用干擾素對該病的治療效果,發(fā)現黃芪多糖+VC+氟苯尼考組合能緩解Ⅰ群禽腺病毒病的感染癥狀,而單獨使用干擾素沒有治療效果。最后在通過優(yōu)化生物安全體系建設的基礎上,將動物福利體系應用于種肉雞生產管理之中,能夠有效降低雞Ⅰ群禽腺病毒病的發(fā)生。上述研究結果表明,2015～2017年在魯豫京等10個省市發(fā)生的雞Ⅰ群禽腺病毒病的主要流行血清型是FAdV-8b和FAdV-4;從膠東地區(qū)養(yǎng)雞場分離的FXWH-8b毒株和FXWH-4毒株,也屬于這兩種血清型;2個分離毒株對SPF雞均有較強的致病力,可侵害雞的多個組織器官;本研究構建的細胞培養(yǎng)二價滅活疫苗和發(fā)病雞肝組織二價滅活疫苗對膠東地區(qū)雞群流行的Ⅰ群禽腺病毒病具有良好的保護效果;黃芪多糖配伍維生素C和氟苯尼考對Ⅰ群禽腺病毒病有一定的治療效果;關于雞Ⅰ群禽腺病毒病的防控問題,作者建議并經實踐證明在養(yǎng)雞生產管理中切實落實生物安全防控措施,并適當貫徹應用動物福利的理論可以有效地防控此病的發(fā)生。
【圖文】：

認為是最大和最復雜的無囊膜ＤＮＡ病毒。每個病毒粒子都是由衣殼、核酸芯髓（Ｃｏｒｅ），逡逑暴露在衣殼外的纖突及其相關蛋白組成。其中衣殼是由六鄰體、五鄰體、纖突三種蛋逡逑白以及少量蛋白通過非共價鍵結合形成的正二十面體結構，如圖１－１所示，ＦＡｄＶ的逡逑病毒衣殼共有２５２個殼粒，其中有２４０個殼粒分布于每個面上，構成了邋６個六鄰體逡逑（Ｈｅｘｏｎ），剩下的１２個殼粒分布于頂角構成五鄰體（Ｐｅｎｔｏｎ）。五鄰體可以伸出１－１逡逑（ＩＩ群、ＩＩＩ群腺病毒）或２邋（Ｉ群腺病毒）根長度在９？７７．５ｎｍ的纖突（Ｆｉｂｅｒ）邋［５２＿５４］。逡逑纖突將五鄰體作為基底，從衣殼的表面開始向外延伸，，中間為桿區(qū)，頂端為頭節(jié)區(qū)。逡逑頭節(jié)區(qū)與五鄰體可以與病毒侵入的細胞的表面受體特異性結合，促進病毒進一步地對逡逑細胞進行感染［５５，５６］。六鄰體由２４０個二十面體構成。ＦＡｄＶ病毒包含了邋１４條多肽，逡逑多肽２是六鄰體，多肽３是五鄰體周邊蛋白，多肽４是纖維蛋白６２Ｋ，多肽５是核心逡逑蛋白，多肽６是六鄰體相關蛋白，多肽７是核心蛋白，多肽８是五鄰體相關蛋白，多逡逑肽９是９個六鄰體所構成的特異性蛋白。在感染細胞核內的病毒粒子常常是晶格狀排逡逑列。該病毒ＤＮＡ的末端蛋白為ＴＰ

只胰腺萎縮；肺淤血水腫壞死；腎臟出血、腫大，較多呈現花斑腎；有的雞只腺胃乳逡逑頭出血；肌胃角質膜下出血；脾臟出血水腫；腸道出血，腸黏膜脫落。蛋雞肝臟破裂，逡逑腹腔內有血水。見圖２－１。逡逑瞻逡逑圖２－１包涵體肝炎引起的肝臟、腎臟腫大和出血逡逑Ｆｉｇ２－１邋Ｓｗｅｌｌｉｎｇ邋ａｎｄ邋ｈｙｄｒｏｐｅｒｉｃａｒｄｉｕｍ邋ｏｆ邋ｌｉｖｅｒ邋ａｎｄ邋ｋｉｄｎｅｙ邋ｃａｕｓｅｄ邋ｂｙ邋Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ邋ｂｏｄｙ邋ｈｅｐａｔｉｔｉｓ逡逑２．２．２．２心包積水－肝炎綜合征逡逑胸肌和腿肌出血；皮下及腹腔脂肪黃染；肝臟都呈現不同程度的褪色至淡褐色和逡逑黃色，腫大質脆，出現充血腫脹，伴有局灶性壞死點和出血點；心臟出現不同程度的逡逑局灶性壞死，心包腔中有淡黃色水樣或膠凍樣的積液，且心臟松弛柔軟；肺淤血水腫逡逑壞死？，胰腺呈點狀壞死，部分雞只胰腺萎縮邊緣出血？，腎臟腫大、出血；法氏囊皺褶逡逑處有出血點并見有黏液滲出；脾臟出血腫大；腸道出血、腸黏膜脫落。見圖２－２。逡逑２３逡逑
【學位授予單位】：中國農業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S858.31

【參考文獻】

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本文編號：2693183