【摘要】：實驗猴在動物實驗中具有其他實驗動物所無法替代的重要地位。當(dāng)前西方國家因為動物資源稀缺,動物保護主義者反對,應(yīng)用成本過高等多種原因而大幅縮減實驗猴的研究與應(yīng)用。而此時,我國實驗猴的養(yǎng)殖和應(yīng)用卻隨著生物醫(yī)學(xué)、藥品、臨床實驗等學(xué)科水平的進步得到迅猛發(fā)展,已成為世界第一大實驗猴出口國,目前實驗猴存欄量約30萬(只)。2017年11月27日,世界上首只體細(xì)胞克隆猴“中中”在上海中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所的誕生標(biāo)志著中國率先開啟了以遺傳背景相同的克隆猴作為實驗動物模型的時代。結(jié)核病主要是由結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群引起的一類以呼吸系統(tǒng)感染為主,同時可侵襲身體多種組織器官的人獸共患的感染性疾病。舍室集中飼養(yǎng)為結(jié)核病在實驗猴群中流行提供了條件,結(jié)核病不僅危及實驗猴生命,同時對接觸到患病實驗猴的人員健康產(chǎn)生威脅。目前對實驗猴結(jié)核病的流行狀況尚不清楚,給實驗猴的結(jié)核病控制帶來困難。對于靈長動物目前法定的結(jié)核檢疫方法是結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗,結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗具有勞動強度大、操作復(fù)雜、費時、容易出現(xiàn)誤判等特點,除此以外還會與卡介苗和非結(jié)核分枝桿菌等具有交叉反應(yīng),接受了皮試的靈長動物也會產(chǎn)生強烈的不適。對于結(jié)核病的檢測需要探索更加靈敏快速的檢測方法。血清免疫學(xué)檢測方法簡單、快速、易于自動化、相對廉價,曾經(jīng)是我國對人臨床檢驗診斷結(jié)核病的重要輔助診斷方法。血清免疫學(xué)檢查還可能發(fā)現(xiàn)痰涂片鏡檢法無法檢測出的菌陰結(jié)核病例。我國專家共識認(rèn)為血清免疫學(xué)檢測方法隨著技術(shù)不斷的發(fā)展,具有診斷價值的抗原被不斷發(fā)現(xiàn),該方法具有很大潛力。本研究使用免疫學(xué)、細(xì)菌學(xué)、分子生物學(xué)對廣西某三家猴場飼養(yǎng)的1248只實驗猴進行了結(jié)核流行病學(xué)調(diào)查。調(diào)查結(jié)果顯示在廣西部分地區(qū)實驗猴中結(jié)核發(fā)病率為1.8%(22/1248),在不同年齡段的實驗猴中,老年組實驗猴發(fā)病率最高,發(fā)病率為6.42%,其次為幼年組,發(fā)病率為4.12%,中年組發(fā)病率為0.87%,青年組發(fā)病率為0.40%,并在結(jié)核感染實驗猴病灶組織標(biāo)本中分離培養(yǎng)出對異煙肼耐藥結(jié)核分枝桿菌菌株,為相關(guān)方面研究積累了數(shù)據(jù)。本研究對實驗猴結(jié)核分枝桿菌抗體檢測方法進行探索性研究,利用斑點免疫膠體金滲濾法原理建立實驗猴結(jié)核抗體斑點免疫膠體金檢測方法。對60例實驗猴血清樣本進行檢測,與結(jié)核菌培養(yǎng)結(jié)果作為參照,實驗結(jié)果顯示該方法靈敏、特異、準(zhǔn)確,陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值較高。本研究通過對廣西部分地區(qū)實驗猴開展結(jié)核病的流行病學(xué)調(diào)查,對逐步建立、完善規(guī)范化管理提供依據(jù),并提示防治實驗猴結(jié)核病的重點,以提高實驗猴飼養(yǎng)工作者、管理者對結(jié)核病的認(rèn)知。同時對實驗猴結(jié)核分枝桿菌血清免疫學(xué)檢測方法進行研究,評估實驗猴結(jié)核血清免疫學(xué)檢測效果,為進一步開發(fā)實驗猴結(jié)核分枝桿菌血清學(xué)檢測方法提供了依據(jù)。
【圖文】：

第一篇 文獻綜述 第一章 結(jié)核病的流行以及危害居世界前三[9]。耐多藥結(jié)核病是指從患結(jié)核病病人的痰或其它標(biāo)本中分核分枝桿菌菌株至少對異煙肼（Isonicotinic acid hydrazide，IHN）、利mpicin，RFP)兩種一線抗結(jié)核藥物耐藥（如圖 1-1）[10]。異煙肼和利福平常見的一線抗結(jié)核藥物，，它們的廣泛應(yīng)用曾一度遏制了結(jié)核病在全球范行，但是他們的濫用也產(chǎn)生了結(jié)核菌耐藥危機[11,12]，在 2017 年全球有核病患者(48 萬至 64 萬之間)對利福平耐藥，其中 82%的人患有耐多藥

圖 1-2 結(jié)核耐藥基因芯片探針排布示意圖[9]Fig. 1-2 Schematic diagram of drug-resistant tuberculosis gene microarray probearrangementA：結(jié)核分枝桿菌 rpoB 位點為野生型基因芯片圖譜；B：結(jié)核分枝桿菌 katG315 和inh-15 位點為野生型基因芯片圖譜。途中右側(cè)表格中的內(nèi)容與右側(cè)芯片雜交點陣對應(yīng)，每五個點位對應(yīng)右側(cè)一個單元格。圖中的代號含義如下 QC：表面化學(xué)質(zhì)控探針； EC：雜交陽性外對照探針； BC：空白對照； NC：陰性對照探針； IC：內(nèi)對照探針； WT：野生型。2.4 免疫學(xué)診斷2.4.1 皮內(nèi)結(jié)核菌素皮膚試驗(TST)對非人靈長動物來說，目前法定的結(jié)核檢疫方法是皮內(nèi)結(jié)核菌素皮膚試驗(Tuberculinskintest,TST)，也稱結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)或結(jié)核菌素皮試，由結(jié)核
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S858.91

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本文編號：2689627