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FGF20及其受體FGFR2、FGFR3在小鼠毛囊形成和發(fā)育中的定位及表達(dá)研究

發(fā)布時間:2020-05-30 18:25
【摘要】:毛囊是哺乳動物皮膚的附屬器官之一,表現(xiàn)為周期性生長,包括快速生長期(生長期)、凋亡驅(qū)動回歸期(退化期)和相對靜止期(休止期)。前人關(guān)于毛囊生長周期各階段的研究表明,胚胎期14天(E14)皮膚開始形成真皮凝集,此時毛囊正式開始發(fā)育,出生后毛囊周期各階段的大致時間為:1-11d為生長期,12-20d為退化期,21d為靜止期,21d后進(jìn)入下一個生長周期。有研究表明,成纖維細(xì)胞生長因子家族在毛囊生長發(fā)育過程中發(fā)揮作用。其中FGF20在小鼠初級真皮凝集和次級真皮凝集形成過程中發(fā)揮重要作用;FGFR2缺失可以導(dǎo)致小鼠表皮發(fā)育不良;但關(guān)于FGF20及其受體在小鼠胚胎期和第一毛囊生長周期的表達(dá)研究未見報道。本試驗選取胚胎期E13-E18和出生后1/5/8/11/15/17/21/23 d小鼠背部皮膚組織,通過免疫組織化學(xué)、Western Blot和實時熒光定量PCR對FGF20、FGFR2和FGFR3在小鼠胚胎期和第一生長周期的表達(dá)進(jìn)行研究,結(jié)果如下:在小鼠胚胎毛囊形成期,免疫組化結(jié)果顯示FGF20和FGFR3在E13陽性反應(yīng)微弱,E14-E18主要表現(xiàn)在表皮細(xì)胞、基板和毛釘。FGFR2陽性反應(yīng)同樣表現(xiàn)在表皮細(xì)胞、基板和毛釘,且表皮始終強(qiáng)陽性表達(dá)。RT-PCR、Western Blot和光密度數(shù)據(jù)分析顯示FGF20和FGFR3在E13表達(dá)量最低,E16表達(dá)量最高;FGFR2在E13表達(dá)量最低。在毛囊第一生長周期,免疫組化結(jié)果顯示FGF20、FGFR2和FGFR3在表皮、根鞘、毛乳頭和皮脂腺等結(jié)構(gòu)廣泛表達(dá);RT-PCR、Western Blot和光密度數(shù)據(jù)分析顯示,FGF20在21d表達(dá)量最高,23 d表達(dá)量最低;FGFR2在5d表達(dá)量最高,15d表達(dá)量最低;FGFR3在11d表達(dá)量最高,21 d表達(dá)量最低。實驗結(jié)果提示:(1)在毛囊形成期,FGF20和FGFR3可能在毛囊基板階段向毛釘階段轉(zhuǎn)變過程中發(fā)揮促進(jìn)作用,FGFR2可能在毛囊形成過程中發(fā)揮促進(jìn)作用。(2)在毛囊第一生長周期,FGF20可能在誘導(dǎo)毛囊進(jìn)入退化期發(fā)揮促進(jìn)作用,FGFR2和FGFR3可能在毛囊生長期發(fā)揮促進(jìn)作用。(3)在毛囊形成期,FGF20可能通過與FGFR3結(jié)合而發(fā)揮作用,在毛囊第一生長周期,FGF20與FGFR2和FGFR3的表達(dá)無一致性,提示FGF20可能不是FGFR2和FGFR3的主要配體。
【圖文】:

統(tǒng)計圖,背部皮膚,蛋白,統(tǒng)計圖


3.2邋FGF20蛋白在小鼠胚胎背部皮膚組織的定量表達(dá)分析逡逑Western邋Blot結(jié)果顯示,,在小鼠胚胎毛囊形成期存在與FGF20多克隆抗體發(fā)生陽性逡逑反應(yīng)的條帶,其大小為23KDa邋(圖1-3)。通過分析得出FGF20蛋白在E16表達(dá)量最逡逑高,E13表達(dá)量最低。同E13相比,E14無顯著差異,其余均顯著高于E13邋(P<0.05)。逡逑E14、E15、E16、E17邋和邋E18邋分別是邋E13邋的邋1.2289邋倍、1.7226邋倍、3.0828邋倍、2.2723邋倍、逡逑2.0391邋倍(圖邋1-4)。逡逑E13邐E14邐E15邐E16邐E17邋E1S逡逑FGF20邋一丨-邐 ̄邐—邐mmam邐23KDa逡逑4邋>邋K邋I邋)a逡逑圖1-3邋FGF20蛋白在小鼠胚胎背部皮膚的蛋白免疫印跡結(jié)果圖逡逑Fig.邋1-3邋Hie邋results邋of邋Western邋Blot邋of邋FGF20邋and邋P-actin邋protein邋in邋embryonic邋period邋of邋mouse邋back邋skin逡逑-18邋-逡逑

統(tǒng)計圖,背部皮膚,蛋白免疫印跡,蛋白


tg邋01。_邋_邋_邋W 邋_邋_逡逑泣’邐mm戛邐_邋1逡逑注:ns:差異不顯著;***尸<0.001。Note:ns邋means邋the邋difference邋is邋not邋significant;邋***P<0.001逡逑圖1-2邋FGF20蛋白在小鼠胚胎背部皮膚陽性反應(yīng)物平均光密度值統(tǒng)計圖逡逑Fig.邋1-2邋Optical邋density邋of邋FGF20邋protein邋positive邋reactant邋in邋embi*yonic邋period邋of邋mouse邋back邋skin逡逑3.2邋FGF20蛋白在小鼠胚胎背部皮膚組織的定量表達(dá)分析逡逑Western邋Blot結(jié)果顯示,在小鼠胚胎毛囊形成期存在與FGF20多克隆抗體發(fā)生陽性逡逑反應(yīng)的條帶,其大小為23KDa邋(圖1-3)。通過分析得出FGF20蛋白在E16表達(dá)量最逡逑高,E13表達(dá)量最低。同E13相比,E14無顯著差異,其余均顯著高于E13邋(P<0.05)。逡逑E14、E15、E16、E17邋和邋E18邋分別是邋E13邋的邋1.2289邋倍、1.7226邋倍、3.0828邋倍、2.2723邋倍、逡逑2.0391邋倍(圖邋1-4)。逡逑E13邐E14邐E15邐E16邐E17邋E1S逡逑FGF20邋一丨-邐 ̄邐—邐mmam邐23KDa逡逑4邋>邋K邋I邋)a逡逑圖1-3邋FGF20蛋白在小鼠胚胎背部皮膚的蛋白免疫印跡結(jié)果圖逡逑Fig.邋1-3邋Hie邋results邋of邋Western邋Blot邋of邋FGF20邋and邋P-actin邋protein邋in邋embryonic邋period邋of邋mouse邋back邋skin逡
【學(xué)位授予單位】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S813.1

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