發(fā)布時間：2020-05-25 02:53

【摘要】：本論文以Diquat誘導(dǎo)小尾寒羊產(chǎn)生的氧化應(yīng)激為試驗動物模型,研究了沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟中抗氧化酶、抗氧化物質(zhì)、肝臟線粒體功能以及線粒體呼吸鏈復(fù)合物相關(guān)基因表達的影響,旨在探討沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊氧化應(yīng)激的保護作用及其機制。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:試驗1,沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟抗氧化指標的影響。選擇15只體重在40±5 kg左右的小尾寒羊母羊,隨機分為三組,即對照組、沙蔥組和黃酮組,每組5只。試驗期第1Id開始,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,沙蔥組和黃酮組分別在基礎(chǔ)日糧中添加1 g/只/d沙蔥粉和120 mg/只/d黃酮進行飼喂。在試驗期的第30 d對各組試驗羊按10 mg/kg BW—次性腹腔注射Diquat溶液,繼續(xù)飼喂12 d；并在第42 d，每組隨機選取3只羊經(jīng)屠宰后采取肝臟組織,測定肝臟中SOD、CAT、GSH-Px及XOD活性,MDA、GSH含量和T-AOC等指標。結(jié)果表明:飼喂沙蔥及沙蔥黃酮可通過提高小尾寒羊肝臟中SOD、CAT及GSH-Px活性和GSH的含量、抑制XOD的活性和降低MDA的產(chǎn)生來保護Diquat對小尾寒羊產(chǎn)生的氧化損傷,且沙蔥黃酮的保護效果顯著高于沙蔥(P0.05)。試驗2,沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟線粒體功能的影響。在試驗1的基礎(chǔ)上,本試驗采用分子生物學(xué)方法,從線粒體功能的角度探討了沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟抗氧化應(yīng)激的作用機制,利用比色法定量檢測線粒體呼吸鏈復(fù)合物I、II和線粒體ATP酶活性;熒光分光光度法測定線粒體內(nèi)ROS含量；流式細胞術(shù)檢測線粒體膜電位。結(jié)果表明,飼喂沙蔥及沙蔥黃酮可通過降低Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟中線粒體內(nèi)ROS的水平,提高肝臟中線粒體ATP酶、線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性和線粒體膜電位的水平來發(fā)揮改善Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟線粒體功能的作用,且沙蔥黃酮的改善作用顯著高于沙蔥(P0.05)。試驗3,沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟線粒體呼吸鏈復(fù)合物相關(guān)基因表達的影響。本試驗利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法,探討了沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊肝臟中SDH相關(guān)基因(SDHA、SDHB、SDHC及SDHD)表達量的影響。結(jié)果表明,沙蔥組和黃酮組小尾寒羊肝臟中SDHA的表達量顯著高于對照組(P0.05),且黃酮組小尾寒羊肝臟中SDHA的表達量顯著高于沙蔥組(P0.05)。黃酮組小尾寒羊肝臟中SDHB、SDHC、SDHD基因的表達顯著高于對照組和沙蔥組(P0.05)。綜上所述,飼喂沙蔥及沙蔥黃酮均能保護Diquat對小尾寒羊引起的肝臟氧化損傷,其保護機制可能是與其通過清除體內(nèi)的自由基,維持體內(nèi)抗氧化酶與抗氧化物質(zhì)的平衡和保護線粒體功能而實現(xiàn)的,且沙蔥黃酮的保護作用優(yōu)于沙蔥。
【圖文】：

圖１技術(shù)路線圖逡逑Ｆｉｇ．邋１邋Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ邋ｒｏｕｔｅ逡逑

邐內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文邐２９逡逑３）儀器的操作逡逑完成上述步驟后，，把加好樣品的９６／３８４孔板放在ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ４８０邋ＩＩ邋（Ｒｏｃｈｅ羅逡逑氏）中進行反應(yīng)。逡逑２．邋３．邋２．邋５數(shù)據(jù)分析逡逑采用２＿ＡＡａ方法對數(shù)據(jù)進行相對定量分析，并將得出的數(shù)據(jù)同試驗２１２邋３的方逡逑法進行分析。逡逑２．３．３試驗結(jié)果逡逑２．３．３．１邋ＧＡＰＤＨ、ＳＤＨＡ、ＳＤＨＢ、ＳＤＨＣ、ＳＤＨＤ基因熒光定量擴增曲線及溶解曲逡逑線逡逑
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S826.5

【參考文獻】

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1 朱s

本文編號：2679441