【摘要】：豬精子因其結構的特殊性,對冷凍過程中的氧化應激反應異常敏感。能夠在豬精子冷凍-解凍過程中穩(wěn)定發(fā)揮作用,保護豬精子免受氧化損傷的高效抗氧化劑仍在尋找過程中。精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸都是天然、高效的抗氧化劑,且都尚未在精子冷凍領域得到過研究與應用。本試驗的主要目的就是檢測精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸在冷凍-解凍過程中是否對豬精子具有保護作用。來自5頭長白種公豬的精液樣品被用于本試驗研究,將每次采得的5頭公豬的精液進行混合并分成若干個組,向每組中單獨或配伍添加不同濃度的精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸,然后分別檢測冷凍-解凍后豬精子的活力、活率、質膜完整性、線粒體活性、頂體完整性、超氧化物歧化酶(SOD)活力、過氧化氫酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)濃度,最后將解凍后精子質量較高的實驗組精子與體外培養(yǎng)成熟的卵母細胞進行體外受精試驗。獲得如下結果:1.在豬冷凍稀釋液中添加一定濃度的精胺,可以顯著提高解凍后精子的活力、活率、質膜完整性、線粒體活性、頂體完整性和內源抗氧化酶活力(SOD和CAT),并顯著降低MDA濃度(P0.05),當精胺濃度為3mM時,提升效果最明顯,但精胺對解凍后精子活力的提升效果維持時間較短。2.在豬冷凍稀釋液中添加一定濃度的香菇多糖,對解凍后精子的活力、活率、質膜完整性和頂體完整性提升效果較明顯(P0.05),最適的添加濃度為0.6-0.9mg/mL。香菇多糖缺乏針對精子細胞內部的抗氧化作用,無法顯著提高解凍后精子的線粒體活性和抗氧化酶(SOD和CAT)活力。3.在豬冷凍稀釋液中分別添加一定濃度的芹菜素和阿魏酸,都可以顯著提高解凍后精子的活力、活率、質膜完整性、線粒體活性、頂體完整性和抗氧化酶(SOD和CAT)活力,并顯著降低細胞內MDA濃度(P0.05),芹菜素的最適添加濃度為0.2mM,阿魏酸的最適添加濃度為0.25mM。4.芹菜素和阿魏酸在冷凍過程中對豬精子具有協(xié)同的保護作用,配伍添加后可以進一步提升解凍后豬精子的各項質量參數(P0.05),最適添加濃度為0.1mM芹菜素加0.15mM阿魏酸,且在此濃度下,解凍后精子活力和活率在2h內不會顯著下降(P0.05)。5.香菇多糖、芹菜素和阿魏酸在各自的最適濃度下都可以幫助提高冷凍-解凍后豬精子的受精能力,進而提升體外受精試驗后受精卵的卵裂率。在冷凍稀釋液中配伍添加0.6mg/mL的香菇多糖、0.1mM的芹菜素和0.15mM的阿魏酸,以解凍后的精子進行體外受精試驗,受精卵的卵裂率可被進一步提高(P0.05)。
【圖文】：

精胺結構式Fig.2-1.Structuralformulaofspermine

圖 4-1 芹菜素結構式Fig. 4-1. Structural formula of apigenin氧基-4-羥基肉桂酸，是一種天然的酚酸類物草藥中的有效活性成分。動物實驗證明阿魏酸
【學位授予單位】：西北農林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S828

【參考文獻】

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1 呂國英;范雷法;張作法;潘慧娟;;香菇多糖研究進展[J];浙江農業(yè)學報;2009年02期

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本文編號：2667268