【摘要】：目的:本試驗對比95%乙醇、酸水、水三種溶劑的提取法對鉤吻總生物堿提取率的影響。從中尋找出簡便、高效、科學的粗提方法。由于大孔樹脂法可以有效的控制生產(chǎn)成本,同時生產(chǎn)周期短等特點,在提取生物堿時可以避免使用一、二類有機溶劑,這是其它方法不具有的,所以進行探究大孔樹脂法對鉤吻生物堿的純化條件優(yōu)化,從而為運用大孔樹脂法進行鉤吻工業(yè)化純化提供理論依據(jù)。方法:本研究以90%乙醇和0.5%硫酸為溶劑和水進行鉤吻生物堿的提取,比較不同溶劑提取的鉤吻粗提物得率不同。對比為以后對鉤吻進行工業(yè)生產(chǎn)提供參考依據(jù)。為了進一步提高鉤吻的利用率。對鉤吻的粗提物的純化是關(guān)鍵的一步,所以本試驗通過索大孔樹脂法對鉤吻生物堿純化的最優(yōu)條件,進行了大孔樹脂法鉤吻生物堿洗脫液預試驗,選定四因子如下:樣品pH值(A)、30%乙醇沖洗液(B)、100%乙醇洗脫液(C)和提取液階段(D),進行四因子三水平的正交試驗設計L9~((3^4))。同時本試驗選用肖灑(2016)碩士學位論文“鉤吻粗提物的含量測定與主要生物堿的體外代謝研究”中對鉤吻粗提物進行鉤吻素子、鉤吻素甲含量測定獲得的檢測方法,對大孔樹脂法純化獲得的鉤吻生物堿樣品進行鉤吻素子、鉤吻素甲含量測定。結(jié)果:從本對比試驗可知鉤吻粗提取后其中生物堿含量醇提物酸水提物水提物,三種溶劑提取法的生物堿含量百分比分別為2.15、6.44、0.57。從正交試驗的極差分析與方差分析的結(jié)果可以得出,鉤吻生物堿純化受沖洗液乙醇濃度、洗脫液乙醇濃度和pH值的影響。根據(jù)吸光度值與標準的鉤吻素甲量的線性回歸方程:y=0.0055x+0.2236(R2=0.98565)計算得出,鉤吻生物堿大孔樹脂法純化后的純度為92%。同時試驗通過高效液相色譜法檢測大孔樹脂法純化樣品中的鉤吻素甲含量為24.65%、鉤吻素子含量為16.39.%,鉤吻素甲的含量鉤吻素子的含量。結(jié)論:對比試驗可知鉤吻粗提取后其中生物堿含量醇提物酸水提物水提物。比較不同溶劑提取的鉤吻粗提物得率不同。從正交試驗的極差分析與方差分析的結(jié)果可以得出,其中大孔樹脂法對鉤吻生物堿純化的最優(yōu)組合為A1、B2、C3和D2,即樣品調(diào)節(jié)pH8、沖洗液為30%乙醇、洗脫液為100%乙醇和第二階段提取溶液為最優(yōu)組合。最優(yōu)組合得出的樣品鉤吻生物堿純化分離純度可以達到92%。分析檢測本實驗大孔樹脂生物堿最優(yōu)純化條件所得樣品中,鉤吻素甲所占含量為24.65%,鉤吻素子所占含量為16.39%,其中本試驗中鉤吻生物堿的鉤吻素甲含量高于鉤吻素子。這結(jié)果與俞昌喜等(2012)測得的國產(chǎn)鉤吻生物堿中鉤吻素子含量最高的觀點不一致。
【學位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S853.7

【參考文獻】

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