發(fā)布時間：2020-05-13 06:11

【摘要】：肉用動物脂肪的分布和沉積量是影響胴體品質(zhì)和肉質(zhì)風(fēng)味的關(guān)鍵因素,皮下脂肪和腹部脂肪影響胴體品質(zhì),而肌內(nèi)脂肪是形成大理石紋的物質(zhì)基礎(chǔ),直接參與肉質(zhì)嫩度、多汁性和肉品風(fēng)味的形成。目前,世界范圍內(nèi)高脂綿羊品種正逐漸被淘汰或雜交改良,一些耐粗飼、抗病性和適應(yīng)性強(qiáng)的脂尾(臀)品種已瀕臨滅絕。對高脂綿羊品種進(jìn)行定向改良和基因保護(hù),保留其優(yōu)良的抗病和適應(yīng)性能的同時定向調(diào)控體脂分布,在保證經(jīng)濟(jì)效益的前提下,有效地提高肌內(nèi)脂肪含量,降低皮下脂肪和內(nèi)臟脂肪含量,提高胴體品質(zhì)改善肉質(zhì)風(fēng)味,生產(chǎn)滿足人們生活水平要求的高品質(zhì)畜產(chǎn)品已成為綿羊育種和生產(chǎn)實(shí)踐中亟待解決的重大課題。本研究以體脂分布差異極大的西部(甘肅)特有優(yōu)良綿羊地方品種為研究對象,系統(tǒng)研究了蘭州大尾羊(Lanzhou fat-tailed sheep,LFTS)、小尾寒羊(Small-tailed han sheep,STHS)、藏羊(Tibetan sheep,TS)三種不同脂尾型綿羊品種的屠宰性能、肉用性能、體脂分布、脂肪酸組成和組織形態(tài)學(xué)分析等生物學(xué)特性;通過對LFTS和STHS不同部位脂肪組織進(jìn)行了miRNA高通量測序,篩選差異表達(dá)miRNA,進(jìn)行了靶基因預(yù)測及功能注釋分析,闡明其在調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞生長和發(fā)育中的作用;檢測了體脂分布相關(guān)基因SIRT7基因在2個蒙古國代表性的毛肉兼用品種和5個中國地方綿羊品種中的潛在Indel位點(diǎn),并探討其與綿羊生長性狀的關(guān)聯(lián)性,得到如下研究結(jié)果:1.三種脂尾型綿羊生產(chǎn)性能、屠宰性能和肉品質(zhì)的比較研究為了研究三種脂尾型綿羊生產(chǎn)性能、屠宰性能、臟器發(fā)育和肉品質(zhì)的差異,選擇相同飼養(yǎng)管理水平下8月齡LFTS、STHS、TS羯羊各6只,測定生產(chǎn)性能后進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。結(jié)果表明,(1)生產(chǎn)性能:LFTS的體長、體高顯著高于STHS和TS(P0.05),LFTS與TS的胸圍、胸深和尻寬顯著高于STHS(P0.05)。(2)屠宰性能:LFTS的宰前活重比TS和STHS高48.14%和24.27%(P0.05),胴體重與骨重:LFTSTSSTHS(P0.05),LFTS與TS的屠宰率和凈肉重顯著高于STHS(P0.05)。(3)臟器發(fā)育及體脂分別:LFTS的心臟指數(shù)顯著高于TS(P0.05),肝指數(shù):STHSTSLFTS(P0.05),STHS的小腸指數(shù),LFTS的尾脂指數(shù)以及TS的腎周脂肪和大網(wǎng)膜脂肪指數(shù)分別在三個品種間最高,且顯著高于其它兩個品種(P0.05)。(4)肉品質(zhì):STHS的剪切力為0.30±0.12kgf,顯著低于LFTS和TS(P0.05),其他肉品質(zhì)指標(biāo)在三個品種間無顯著差異。結(jié)論:在相同舍飼營養(yǎng)水平下,LFTS和TS的產(chǎn)肉力顯著高于STHS;肉質(zhì)品質(zhì)pH、肉色、失水率和熟肉指標(biāo)率差異不顯著,但LFTS和TS嫩度顯著高于STHS;LFTS脂重指數(shù)和總脂肪指數(shù)顯著高于TS和STHS,TS腹腔脂肪指數(shù)顯著高于STHS和LFTS。2.三種脂尾型綿羊脂肪組織形態(tài)學(xué)性狀和脂肪酸組成研究為研究三種脂尾型綿羊脂肪沉積差異,采集三種脂尾型綿羊(8月齡LFTS、STHS和TS羯羊各6只)腹部皮下脂肪、尾部脂肪、腎周脂肪、大網(wǎng)膜脂肪和背最長肌,通過組織學(xué)方法,研究各組織的組織學(xué)特性;應(yīng)用冷式提取法和氣相色譜技術(shù)分析樣品中脂肪酸組成及含量。結(jié)果表明:從組織形態(tài)上觀察三種脂尾型綿羊品種脂肪細(xì)胞的差異,其中尾部脂肪組織脂肪細(xì)胞面密度,在TS和LFTS之間無差異顯著(P0.05),但與STHS存在顯著差異(P0.05),腎周脂肪、大網(wǎng)膜和皮下脂肪組織:STHS和LFTS之間差異不顯著(P0.05),但與TS存在顯著差異。同種綿羊不同部位之間,TS和STHS的腎周脂肪、大網(wǎng)膜脂肪和皮下脂肪無顯著差異(P0.05),LFTS皮下脂肪和腎周脂肪組織(P0.05)與大網(wǎng)膜脂肪組織和尾部脂肪組織(P0.05)存在顯著差異(P0.05)。在脂肪酸組成上,三種脂尾型綿羊肌肉組織中,主要飽和脂肪酸C14:0、C16:0和C18:0含量差異不顯著(P0.05),主要不飽和脂肪酸C18:1n9c含量差異不顯著(P0.05),C16:1含量在STHS顯著大于LFTS(P0.05),C18:2n6c含量在LFTS含量顯著高于TS(P0.05),肌肉中SFA、PUFA、MUFA、P:S差異不顯著(P0.05)。三種脂尾型綿羊SFA含量在不同品種相同部位之間差異不顯著(P0.05),LFTS大網(wǎng)膜脂肪組織中PUFA含量顯著大于TS和STHS(P0.05),肌內(nèi)脂肪PUFA含量顯著高于脂肪組織(P0.05)。同一品種不同部位之間尾部脂肪MUFA含量最高,LFTS MUFA含量:內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪差異顯著(P0.05),TS MUFA含量:皮下顯著大于腎周脂肪(P0.05);P:S在LFTS大網(wǎng)膜脂肪和尾部脂肪顯著大于其他兩種綿羊(P0.05),在腎周脂肪和皮下脂肪P:S值差異不顯著(P0.05),但LFTS的值最高。從組織學(xué)形態(tài)比較結(jié)果來看,后續(xù)研究中應(yīng)對LFTS尾部脂肪組織與腎周脂肪組織、LFTS和STHS尾部脂肪組織之間進(jìn)行各種組學(xué)分析,篩選差異表達(dá)的基因、蛋白及ncRNA等調(diào)控因子,有助于進(jìn)一步研究三種脂尾型綿羊體脂分布的調(diào)控機(jī)理。3.三種脂尾型綿羊不同部位脂肪組織差異miRNA篩選及功能研究為了篩選影響綿羊脂肪細(xì)胞分化過程和脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵miRNAs,對成年LFTS和STHS不同部位的脂肪組織進(jìn)行miRNA高通量測序,通過高通量測序和生物信息學(xué)分析,篩選出11種差異表達(dá)的miRNAs,其對脂肪組織具有一定的調(diào)控作用,其中有6種miRNAs在不同脂肪組織表達(dá)中有顯著差異(P0.05),其中上調(diào)的有miR-133,miR-218a和miR-381-3p,下調(diào)的miRNA有miR-21,miR-194和miR-200c。對LFTS和STHS不同部位的脂肪組織差異表達(dá)的6個miRNA靶基因預(yù)測,共得到35個靶基因,功能注釋表明這些靶基因參與脂肪代謝相關(guān)的多種生理和病理調(diào)控過程;生物學(xué)信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)miR-133,miR-194,miR-200c和miR-381-3p共4種miRNA在物種之間存在廣泛保守性,為了探索這四種miRNA對脂肪增殖的影響,用miR-133,miR-194,miR-200c和miR-381-3pNC和模擬物轉(zhuǎn)染3T3-L1細(xì)胞,在3T3-L1細(xì)胞增殖期間評估cyclinD1,PCNA和CDK2 mRNA水平。結(jié)果顯示,miR-133,miR-194和miR-381-3p顯著上調(diào)cyclinD1基因的mRNA表達(dá)水平,顯著下調(diào)PCNA和CDK2基因的mRNA表達(dá)水平;0h,24h和48h過表達(dá)miR-194的3T3-L1細(xì)胞中cyclinD1,PCNA和CDK2的表達(dá)顯著下調(diào)。表明miR-194能抑制脂肪細(xì)胞增殖。4.綿羊體脂分布相關(guān)基因SIRT7的遺傳變異及其遺傳效應(yīng)研究選擇了薩圖爾羊和蒙古羊2個蒙古國代表性的毛肉兼用品種和LFTS、STHS、同羊、灘羊以及湖羊5個我國具有代表性的地方綿羊品種共709個個體,檢測綿羊SIRT7基因在不同綿羊品種中的潛在Indel位點(diǎn),并探討其與綿羊生長性狀的關(guān)聯(lián)性,結(jié)果表明首次在綿羊中檢測到綿羊SIRT7基因中兩個新的的indels位點(diǎn),即5?UTR-insertion-7bp和3?UTR-insertion-17bp。在所有綿羊品種中,5?啟動子區(qū)-7bp的突變頻率很低,然而在同羊和LFTS中,3?UTR-17bp突變頻率很高。而且,關(guān)聯(lián)性分析結(jié)果表明,這些新的indels多態(tài)性與綿羊生長性狀顯著相關(guān)(P0.05)。例如,3?UTR-17bp多態(tài)性與STHS的尻寬高度相關(guān)(P0:01),ID基因型的個體比II基因型的個體具有更好的胸深值,表明這些新的indels位點(diǎn)可作為綿羊育種中篩選優(yōu)質(zhì)個體的有潛力的DNA標(biāo)記。
【圖文】：

A B C圖 1-2 三種脂尾型綿羊及其胴體性狀差異注：A: 長脂尾型-蘭州大尾羊 B: 瘦脂尾型-藏羊 C: 短脂尾型-小尾寒羊Fig1-2 Differences in carcass traits of different fat-tailed sheepNote：A: Long fat tail type- Lanzhou fat-tailed sheep, LFTS，B: Thin fat tail type -Small-tailed hansheep, STHS, C: Short fat tail type -Tibetan sheep, TS飼料轉(zhuǎn)化率，同時高脂肪含量的羊肉也無法適應(yīng)市場需求。目前，世界范圍內(nèi)高脂綿羊品種正逐漸被淘汰或雜交改良，一些具有優(yōu)良的耐粗飼、抗病性和適應(yīng)性的脂尾（臀）品種已瀕臨滅絕[10]。對這些高脂綿羊品種進(jìn)行定向的改良和基因保護(hù)，以保留其優(yōu)良的抗病和適應(yīng)性能的同時定向調(diào)控體脂分布，在保證經(jīng)濟(jì)效益的前提下，有效地提高肌內(nèi)脂肪含量，降低皮下脂肪和內(nèi)臟脂肪，提高胴體品質(zhì)和改善肉質(zhì)風(fēng)味，，生產(chǎn)滿足人們生活水平要求的高品質(zhì)肉已成為綿羊育種和生產(chǎn)實(shí)踐中亟待解決的重大課題。

圖 3-1 脂肪酸甲酯氣象色譜檢測圖譜Fig 3-1 Meteorological chromatogram of fatty acid methyl esters3.1.2.2.4 檢測指標(biāo)飽和脂肪酸（saturated fatty acid, SFA）：C4:0、C5:0、C8:0、C10:0、C11:0C12:0、C13:0、C14:0、C15:0、C16:0、C17:0、C18:0、C20:0、C21:0、C22:0、C23:0、C24:0；不飽和脂肪酸（unsaturated fatty acid,UFA）：單不飽和脂肪酸（monounsaturated fatty acid,MUFA）：C14:1n5、C15:1、C16:1、C17:1、、C18:1n9t、C18:1n9c、C20:1、C22:1n9、C24:1多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，PUFA）：C18:2n6t、C18:2n6c、C18:3n6、C18:3n3、C20:2、C20:3n6、C20:3n3、C20:4n6、C22:2、C20:g5n3、C22:6n3n-6 系 PUFAs:C18:2、C20:4
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S826

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2661526