【摘要】：為了探討蛋雞脂肪肝出血綜合征(FLHS)的脂肪代謝變化和尋找血液中生物標(biāo)志物,本試驗(yàn)選用120日齡海蘭褐蛋雞100羽,隨機(jī)分成對(duì)照組和試驗(yàn)組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10羽,其中對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧(2678.99 kcal/kg,粗蛋白15.86%),試驗(yàn)組飼喂高能低蛋白日糧(代謝能3100.00 kcal/kg,粗蛋白12.00%),試驗(yàn)期為100d,分別于第40d和80d采集肝臟樣本制作病理組織切片和測(cè)定AMPK信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白的表達(dá)量,采集血液樣本進(jìn)行GC-TOF-MS代謝組學(xué)分析。結(jié)果如下:1、與對(duì)照組相比,解剖發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組蛋雞皮下腹部脂肪增多,肝臟邊緣鈍圓、質(zhì)脆且有黃色脂肪沉積;病理組織切片觀察試驗(yàn)組肝細(xì)胞內(nèi)存在大小不一的脂肪空泡,細(xì)胞核被擠在一側(cè)。2、與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組肝臟P-AMPKα蛋白表達(dá)量顯著下降(P0.05或P0.01)。與對(duì)照組相比,在40d時(shí)ACC和P-ACC蛋白表達(dá)量顯著上升(P0.05或P0.01),而在80d時(shí)P-ACC和P-ACC/ACC蛋白表達(dá)量顯著下降(P0.05)。3、與對(duì)照組相比,血清代謝組學(xué)分析表明,試驗(yàn)組40d時(shí)差異代謝物中3-羥基丁酸、油酸、異亮氨酸、亞油酸、酮基異己酸、甘露糖、苯乙酸、3-氨基異丁酸、月桂酸、胡椒堿、琥珀酸半醛、十八碳醇和苯鄰二酚含量顯著下降(P0.05或P0.01),而鄰苯二甲酸二辛酯含量顯著上升(P0.05);80d時(shí)差異代謝物中蘇氨酸、檸檬酸、磷酸鹽、棕櫚油酸、蘇糖酸、肉豆蔻酸、尿酸、蔗糖、草酸、馬來(lái)酰亞胺、衣康酸、丙醇二酸、肌氨酸、雄烯二醇、間苯二酚、丙二酸、二氫香芹醇、2-丁炔-1,4-二醇和茚滿(mǎn)醇含量顯著下降(P0.05或P0.01),而絲氨酸、谷氨酸和苯基β-D-吡喃葡萄糖苷含量顯著上升(P0.05)。結(jié)果表明在FLHS的影響下,蛋雞肝臟中AMPK調(diào)控脂肪酸合成的信號(hào)通路傳導(dǎo)紊亂,造成脂肪酸合成增多,加劇了脂肪的沉積。此外,代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)機(jī)體整體脂肪酸代謝和氨基酸代謝紊亂,能量代謝合成增加分解減少,3-羥基丁酸與作為監(jiān)測(cè)脂肪酸代謝重要生物標(biāo)志物的3-羥基丁酸酯有著密切聯(lián)系,該物質(zhì)在FLHS的影響下變化顯著,或許也是FLHS潛在的生物標(biāo)志物。
【圖文】：

圖1 AMP調(diào)節(jié)AMPK的作用模式Fig. 1 Regulation mode of AMP and AMPK可知，AMP結(jié)合去磷酸化的AMPK，使其成為AMPKK更佳活，形成R構(gòu)象的磷酸化AMPK，所以一定程度上R構(gòu)象的號(hào)通路中AMPK被激活后的產(chǎn)物。AMP的作用同時(shí)受到高濃P共同調(diào)節(jié)AMPK的活性。酶（如AMPKK等）激活A(yù)MPK主要是以磷酸化的方式進(jìn)行，均有磷酸化位點(diǎn)，磷酸化位點(diǎn)的不同表明AMPK被激活的途α亞基中Thr-172是上游激酶磷酸化AMPK的主要激活位點(diǎn)[30]制因子LKB1作為AMPK的上游激酶，在AMPK激活循環(huán)中，對(duì)α亞基進(jìn)行磷酸化后直接激活A(yù)MPK，從而影響腫瘤細(xì)胞的助蛋白STRAD和MO25形成異源三聚體，也通過(guò)磷酸化的方r172位點(diǎn)激活[32, 33]，與AMPK結(jié)合的AMP還通過(guò)蛋白質(zhì)磷酸，Thr172的磷酸化是調(diào)節(jié)AMPKα激酶活性的主要位點(diǎn)[34, 3信號(hào)通路在蛋雞脂肪肝出血綜合征中的作用，選定AMPKα為P-AMPKα（thr172）蛋白表達(dá)水平能有效地說(shuō)明信號(hào)通路中

圖2 AMPK調(diào)節(jié)ACC的作用模式Fig. 2 Regulation mode of AMPK and ACC謝組學(xué)的概述統(tǒng)的基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)在基因和蛋白方面闡述了生命活動(dòng)，但隨著有研究表明兩者并不全面[48, 49]，很多生理活動(dòng)發(fā)生于代謝物層面，而代來(lái)調(diào)控生命活動(dòng)[50][51]，因此研究代謝物差異是具有重大意義的。代謝、組織、器官和有機(jī)體的集合，是細(xì)胞過(guò)程的終產(chǎn)物。代謝組學(xué)的定生命系統(tǒng)對(duì)病理生理刺激或基因修飾的動(dòng)態(tài)多參數(shù)代謝反應(yīng)”[52]。代謝代謝物、小分子中間體和代謝物化學(xué)過(guò)程進(jìn)行分析，具體來(lái)說(shuō)，是對(duì)特留下來(lái)的小分子代謝產(chǎn)物特征的系統(tǒng)研究[53]。代謝組學(xué)在疾病診斷、營(yíng)毒理學(xué)等多種領(lǐng)域有著重要的作用。謝組學(xué)是一個(gè)集組群指標(biāo)分析、高通量檢測(cè)和數(shù)據(jù)處理為一體的系統(tǒng)生旨在實(shí)現(xiàn)信息建模與系統(tǒng)整合的目標(biāo)[54]。其主要的研究對(duì)象是小分子<1000），它們?cè)诟鞣N代謝路徑中起著尤為重要的作用[55]。在食品安全有著新的用處，被用作在動(dòng)植物的細(xì)胞和組織的提取液中檢測(cè)有毒物質(zhì)
【學(xué)位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S831.5

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本文編號(hào)：2661523