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雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價滅活苗安全性、最適抗原含量、免疫持續(xù)期及交叉免疫保護(hù)研究

發(fā)布時間:2020-05-10 11:08
【摘要】:禽致病性大腸桿菌病(AvianColibacillosis,AC)是由禽致病性大腸桿菌(APEC)引起的禽類傳染性疾病,是養(yǎng)禽業(yè)重要的細(xì)菌病之一。由于抗生素治療存在菌株抗藥性和藥物殘留的缺陷,有效的疫苗防治禽致病性大腸桿菌病至關(guān)重要。本研究分別以雞致病性大腸桿菌常見血清型O1(E516)、02(E058)、078(E522)三個菌株及由本實驗室構(gòu)建的脂多糖缺失E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522△lpxL△lpxM株為抗原,與MontanideTS△71 VG油佐劑制成多價滅活苗。探討脂多糖缺失滅活疫苗的安全性、最適抗原含量、免疫持續(xù)期和疫苗侯選株與流行株的交叉免疫保護(hù)。一雞大腸桿菌病親本株和脂多糖缺失多價滅活疫苗的安全性比較研究選取本實驗室保存雞致病性大腸桿菌E516(01)、E058(02)、E522(078)和構(gòu)建的脂多糖缺失株 E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522AlpxL△lpxM分別制成抗原含量為2.0 × 109 CFU/mL、2.0 × 1010 CFU/mL的多價滅活疫苗,以兩倍正常劑量免疫進(jìn)行安全性試驗。結(jié)果顯示,無論是親本株還是脂多糖缺失多價滅活疫苗,抗原含量為2.0 × 109 CFU/mL免疫組的安全性優(yōu)于2.0 × 1010 CFU/mL免疫組;在2.0 × 109 CFU/mL免疫組中,脂多糖缺失多價疫苗的安全性優(yōu)于親本株多價滅活疫苗。二雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價滅活疫苗最適免疫抗原含量研究本研究制備抗原含量分別為2.0 × 108.5CFU/mL、2.0 × 109 CFU/mL和2.0 × 109.5 CFU/mL的01、02、078血清型親本株及脂多糖缺失株油佐劑多價滅活疫苗。免疫后對其特異性抗體水平、親本株攻毒保護(hù)率及免疫雞攻毒后內(nèi)臟組織病理變化進(jìn)行研究。研究數(shù)據(jù)顯示,抗原含量為2.0 ×108 5 CFU/mL免疫,親本株疫苗對01、02、078親本株保護(hù)率分別為50.0%、55.6%、55.6%,脂多糖缺失疫苗對01、02、078親本株保護(hù)率分別為50.0%、55.6%、66.7%;抗原含量為 2.0 ×109 CFU/mL 免疫,親本株疫苗對 01、02、078親本株保護(hù)率分別為80.0%、88.9%、88.9%;脂多糖缺失株疫苗對01、02、078親本株保護(hù)率分別為90.0%、88.9%、100.0%;抗原含量為2.0 ×109.5 CFU/mL免疫,親本株疫苗對01、02、078親本株保護(hù)率分別為70.0%、77.8%、77.8%;脂多糖缺失株疫苗對01、02、078親本株保護(hù)率分別為80.0%、88.9%。、100.0%。因此,本實驗室制備的脂多糖缺失多價滅活疫苗不同抗原含量免疫組的保護(hù)率均高于相同抗原含量親本株疫苗組,該疫苗的最適抗原含量2.0 × 109 CFU/mL。三雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價滅活疫苗免疫持續(xù)期研究本研究以雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價滅活疫苗進(jìn)行免疫,分別在免疫后30 d、60 d、90 d和120 d進(jìn)行親本株攻毒,根據(jù)特異性抗體水平、親本株攻毒保護(hù)率及雞內(nèi)臟組織病理變化進(jìn)行研究。結(jié)果表明,在30 d攻毒,疫苗對01、02、078親本株的保護(hù)率分別為88.9%、87.5%、87.5%;在60 d攻毒,疫苗對01、02、078親本株的保護(hù)率均為66.7%;在90 d攻毒,疫苗對01、02、078親本株的保護(hù)率分別為50.0%、50.0%、66.7%;在120 d攻毒,免疫組和攻毒對照組均未出現(xiàn)病死雞。因此,免疫后30 d、60 d、90 d攻毒,雞均得到不同程度保護(hù)。但由于成年雞對致病性大腸桿菌的敏感性降低,免疫后120 d攻毒免疫組和對照組均未出現(xiàn)病死雞,所以本研究暫定該疫苗的免疫持續(xù)期為3個月。四雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價滅活疫苗交叉免疫保護(hù)研究本研究以雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價滅活疫苗進(jìn)行免疫,免疫后檢測特異性抗體水平,對01、02、078親本株和近年流行的菌株O1(Y12,T12)、02(E172,E899)、078(Y14,Y48)進(jìn)行攻毒和免疫雞內(nèi)臟組織的病理變化進(jìn)行研究。研究結(jié)果顯示,對01血清型E516、Y12、T12菌株的免疫保護(hù)率分別為88.9%、80.0%、87.5%;對02血清型E058、E172、E899菌株的免疫保護(hù)率分別為87.5%、88.9%、80.0%;對078血清型E522、Y14、Y48菌株的免疫保護(hù)率分別為88.9%、80.0%、80.0%。本研究得出此雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價滅活疫苗對疫苗候選株和流行株均提供不低于80.0%的保護(hù)。
【圖文】:

臟器組織,病理變化,疫苗,法氏囊


B7'邐:邐圖1-2兩種疫苗2.0X109CFU/mL免疫組臟器組織病理變化逡逑今邋'茂f¥邐FiS邋1-2邋Histoathological邋lesions邋of邋tissues邋of邋birds邋vaccinated逡逑}鑎銒,

本文編號:2657209

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