雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價(jià)滅活苗安全性、最適抗原含量、免疫持續(xù)期及交叉免疫保護(hù)研究
發(fā)布時(shí)間:2020-05-10 11:08
【摘要】:禽致病性大腸桿菌病(AvianColibacillosis,AC)是由禽致病性大腸桿菌(APEC)引起的禽類(lèi)傳染性疾病,是養(yǎng)禽業(yè)重要的細(xì)菌病之一。由于抗生素治療存在菌株抗藥性和藥物殘留的缺陷,有效的疫苗防治禽致病性大腸桿菌病至關(guān)重要。本研究分別以雞致病性大腸桿菌常見(jiàn)血清型O1(E516)、02(E058)、078(E522)三個(gè)菌株及由本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的脂多糖缺失E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522△lpxL△lpxM株為抗原,與MontanideTS△71 VG油佐劑制成多價(jià)滅活苗。探討脂多糖缺失滅活疫苗的安全性、最適抗原含量、免疫持續(xù)期和疫苗侯選株與流行株的交叉免疫保護(hù)。一雞大腸桿菌病親本株和脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗的安全性比較研究選取本實(shí)驗(yàn)室保存雞致病性大腸桿菌E516(01)、E058(02)、E522(078)和構(gòu)建的脂多糖缺失株 E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522AlpxL△lpxM分別制成抗原含量為2.0 × 109 CFU/mL、2.0 × 1010 CFU/mL的多價(jià)滅活疫苗,以?xún)杀墩┝棵庖哌M(jìn)行安全性試驗(yàn)。結(jié)果顯示,無(wú)論是親本株還是脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗,抗原含量為2.0 × 109 CFU/mL免疫組的安全性?xún)?yōu)于2.0 × 1010 CFU/mL免疫組;在2.0 × 109 CFU/mL免疫組中,脂多糖缺失多價(jià)疫苗的安全性?xún)?yōu)于親本株多價(jià)滅活疫苗。二雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗最適免疫抗原含量研究本研究制備抗原含量分別為2.0 × 108.5CFU/mL、2.0 × 109 CFU/mL和2.0 × 109.5 CFU/mL的01、02、078血清型親本株及脂多糖缺失株油佐劑多價(jià)滅活疫苗。免疫后對(duì)其特異性抗體水平、親本株攻毒保護(hù)率及免疫雞攻毒后內(nèi)臟組織病理變化進(jìn)行研究。研究數(shù)據(jù)顯示,抗原含量為2.0 ×108 5 CFU/mL免疫,親本株疫苗對(duì)01、02、078親本株保護(hù)率分別為50.0%、55.6%、55.6%,脂多糖缺失疫苗對(duì)01、02、078親本株保護(hù)率分別為50.0%、55.6%、66.7%;抗原含量為 2.0 ×109 CFU/mL 免疫,親本株疫苗對(duì) 01、02、078親本株保護(hù)率分別為80.0%、88.9%、88.9%;脂多糖缺失株疫苗對(duì)01、02、078親本株保護(hù)率分別為90.0%、88.9%、100.0%;抗原含量為2.0 ×109.5 CFU/mL免疫,親本株疫苗對(duì)01、02、078親本株保護(hù)率分別為70.0%、77.8%、77.8%;脂多糖缺失株疫苗對(duì)01、02、078親本株保護(hù)率分別為80.0%、88.9%。、100.0%。因此,本實(shí)驗(yàn)室制備的脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗不同抗原含量免疫組的保護(hù)率均高于相同抗原含量親本株疫苗組,該疫苗的最適抗原含量2.0 × 109 CFU/mL。三雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗免疫持續(xù)期研究本研究以雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗進(jìn)行免疫,分別在免疫后30 d、60 d、90 d和120 d進(jìn)行親本株攻毒,根據(jù)特異性抗體水平、親本株攻毒保護(hù)率及雞內(nèi)臟組織病理變化進(jìn)行研究。結(jié)果表明,在30 d攻毒,疫苗對(duì)01、02、078親本株的保護(hù)率分別為88.9%、87.5%、87.5%;在60 d攻毒,疫苗對(duì)01、02、078親本株的保護(hù)率均為66.7%;在90 d攻毒,疫苗對(duì)01、02、078親本株的保護(hù)率分別為50.0%、50.0%、66.7%;在120 d攻毒,免疫組和攻毒對(duì)照組均未出現(xiàn)病死雞。因此,免疫后30 d、60 d、90 d攻毒,雞均得到不同程度保護(hù)。但由于成年雞對(duì)致病性大腸桿菌的敏感性降低,免疫后120 d攻毒免疫組和對(duì)照組均未出現(xiàn)病死雞,所以本研究暫定該疫苗的免疫持續(xù)期為3個(gè)月。四雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗交叉免疫保護(hù)研究本研究以雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗進(jìn)行免疫,免疫后檢測(cè)特異性抗體水平,對(duì)01、02、078親本株和近年流行的菌株O1(Y12,T12)、02(E172,E899)、078(Y14,Y48)進(jìn)行攻毒和免疫雞內(nèi)臟組織的病理變化進(jìn)行研究。研究結(jié)果顯示,對(duì)01血清型E516、Y12、T12菌株的免疫保護(hù)率分別為88.9%、80.0%、87.5%;對(duì)02血清型E058、E172、E899菌株的免疫保護(hù)率分別為87.5%、88.9%、80.0%;對(duì)078血清型E522、Y14、Y48菌株的免疫保護(hù)率分別為88.9%、80.0%、80.0%。本研究得出此雞大腸桿菌病脂多糖缺失多價(jià)滅活疫苗對(duì)疫苗候選株和流行株均提供不低于80.0%的保護(hù)。
【圖文】:
B7'邐:邐圖1-2兩種疫苗2.0X109CFU/mL免疫組臟器組織病理變化逡逑今邋'茂f¥邐FiS邋1-2邋Histoathological邋lesions邋of邋tissues邋of邋birds邋vaccinated逡逑}鑎銒,
本文編號(hào):2657209
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