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過表達和干擾表達miR-370對牛OLR1基因表達的影響

發(fā)布時間:2020-05-09 05:47
【摘要】:mi RNAs是一種內(nèi)源性的具有調(diào)控作用的非編碼RNA,其大小為20~25 nt,本身不具有開放閱讀框。miRNA與靶基因3’UTR通過堿基互補配對的方式,降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯,從而調(diào)控靶基因的表達。研究表明,miRNA參與生物體內(nèi)各種各樣的調(diào)節(jié)途徑,如發(fā)育、細胞增殖和凋亡以及脂肪代謝等。氧化低密度脂蛋白受體1(OLR1)基因與脂肪沉積過程密切相關,已有的研究表明,OLR1基因影響奶牛的乳脂率及肉牛的肉品質(zhì)性狀,并且OLR1基因3’UTR存在bta-miR-370的靶序列互補區(qū),當OLR1基因的3’UTR發(fā)生堿基突變時,該miRNA的結合位點消失。為了進一步驗證該miRNA是否對牛OLR1基因具有直接的調(diào)控作用。本研究通過向牛脂肪細胞中轉染miRNA的類似物及阻抑物,分別對牛脂肪細胞中的miR-370進行過表達和干擾表達,24 h后提取細胞總RNA并反轉錄為cDNA,利用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)技術,檢測OLR1基因的表達量,結果表明:轉染miR-370 mimics實驗組OLR1基因的表達量比轉染mi R-370 mimics control的對照組顯著降低(p0.01);而且轉染miR-370 inhibitor實驗組OLR1基因的表達量比轉染miR-370 inhibitor control對照組顯著升高(p0.01)。該研究結果提示miR-370對牛OLR1基因表達具有顯著的負向調(diào)控作用,為進一步闡述OLR1基因?qū)π誀畹挠绊憴C理研究方面提供了理論依據(jù)。
【學位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:S823

【相似文獻】

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1 李紅飛;過表達和干擾表達miR-370對牛OLR1基因表達的影響[D];西北農(nóng)林科技大學;2015年

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本文編號:2655684

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