【摘要】：本研究以6~9月齡荷斯坦生長母牛為研究對(duì)象,采用部分扣除法,研究扣除日糧中部分賴氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)及蘇氨酸(Thr)對(duì)此階段母牛的生長性能、瘤胃內(nèi)環(huán)境、氮代謝及肝臟代謝組的影響,旨在探究生長母牛的氨基酸限制性順序,并建立適宜此階段母牛生長的最佳Lys、Met及Thr的比例。選取72頭5.5月齡左右,體重200kg左右的荷斯坦母牛,分為4組,每組18頭,分別為理論氨基酸平衡組(PC)、扣除30%的Lys組(PD-Lys)、扣除30%的Met組(PD-Met)及扣除30%的Thr組(PD-Thr)。試驗(yàn)期為105d,預(yù)飼15d,正試期90d�；A(chǔ)日糧均為同一玉米-豆粕-苜蓿型全混合日糧,所選用的氨基酸添加劑均為過瘤胃氨基酸。第一部分:部分扣除Lys、Met及Thr對(duì)生長母牛生長性能及血清激素水平的影響本試驗(yàn)旨在探究扣除Lys、Met及Thr對(duì)荷斯坦母牛生長性能及血清激素水平的影響。正試期內(nèi),記錄每天干物質(zhì)采食量,每30d測量一次體尺和體重,靜脈采血測定血清激素水平。結(jié)果表明:試驗(yàn)全期,各處理組的體重及干物質(zhì)采食量均無顯著差異(P0.05);8~9月齡時(shí),PD-Lys組與PD-Met組的生長母牛的平均日增重及飼料轉(zhuǎn)化效率均顯著低于PC組(P0.05)。PD-Lys組生長母牛的血清雌激素濃度較PC組顯著降低(P0.05);PD-Met組生長母牛的胰島素濃度較PC組顯著下降(P0.05)。在理論氨基酸平衡的基礎(chǔ)上,扣除30%的Lys及Met會(huì)導(dǎo)致氨基酸失衡,使8~9月齡生長母牛的平均日增重及飼料轉(zhuǎn)化效率顯著降低,雌激素和胰島素分泌失調(diào)�；谏L性能看,3種氨基酸限制性順序?yàn)長ysMetThr。第二部分:部分扣除Lys、Met及Thr對(duì)6~9月齡生長母牛瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響探究扣除Lys、Met及Thr對(duì)6~9月齡生長母牛瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響,確定扣除3種過瘤胃氨基酸是否會(huì)通過改變MCP產(chǎn)量影響小腸氨基酸的吸收。試驗(yàn)期內(nèi),每30d采集一次瘤胃液,測定相應(yīng)的瘤胃發(fā)酵參數(shù)和微生物區(qū)系。結(jié)果表明:扣除Lys和Thr對(duì)生長母牛瘤胃pH值、NH_3-N濃度及MCP含量均沒有顯著影響(P0.05),但PD-Met組MCP含量有較PC組顯著下降(P0.05)。此外,PD-Met組的丙酸摩爾比例較PC組顯著升高(P0.05),從而導(dǎo)致該組乙丙比顯著低于PC組(P0.05)。PD-Met組的瘤胃微生物Ace及Chao指數(shù)較PC組顯著下降(P0.05),Prevotella_7豐度顯著升高(P0.05),表明扣除Met影響了瘤胃微生物的生長和物種組成;扣除Lys及Thr均未對(duì)瘤胃內(nèi)環(huán)境產(chǎn)生顯著影響(P0.05)。本試驗(yàn)中扣除30%的過瘤胃Lys及Thr未影響生長母牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)和瘤胃微生物生長,到達(dá)小腸的AA水平差異主要來源于日糧過瘤胃氨基酸;但扣除Met導(dǎo)致瘤胃微生物豐富度下降,Prevotella_7豐度增加,丙酸比例升高。第三部分:部分扣除Lys、Met及Thr對(duì)6~9月齡生長母牛肝臟代謝產(chǎn)物的影響探究氨基酸水平對(duì)生長母牛肝臟代謝的影響,為生長母牛氨基酸代謝的研究提供理論支持。試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天每組選取5頭牛,采用活體肝臟取樣法取2g左右肝臟樣品,測定肝臟代謝物。結(jié)果表明:PD-Lys組相較于PC組共有13種差異代謝產(chǎn)物,其中磷脂酰膽堿(5種)和神經(jīng)酰胺(3種)顯著下調(diào)(VIP1,P0.05);花生四烯酸和類二十烷酸顯著上調(diào)(VIP1,P0.05);L-天冬氨酸、L-組氨酸和L-亮氨酸顯著上調(diào)(VIP1,P0.05)。共富集出3條差異顯著通路,分別為:鞘脂代謝、組氨酸代謝、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝和甘油磷脂代謝通路�？鄢齅et及Thr對(duì)肝臟糖脂代謝沒有顯著影響,但均導(dǎo)致肝臟天冬氨酸含量顯著上調(diào)(VIP1,P0.05)。所以,扣除30%的Lys后導(dǎo)致磷脂代謝增強(qiáng),增加抑炎癥因子的分解,促炎癥因子的生成;此外增強(qiáng)蛋白分解代謝,促進(jìn)肝臟丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝中天冬氨酸的產(chǎn)生,導(dǎo)致組氨酸和亮氨酸含量上調(diào)。第四部分:6~9月齡生長母牛的Lys、Met及Thr限制性順序及適宜模式探究扣除日糧30%的Lys、Met及Thr對(duì)氮代謝的影響,旨在確立達(dá)到最優(yōu)氮沉積的氨基酸適宜模式。正試期內(nèi),每隔30d晨飼前采集血液,測定血清尿素氮含量。試驗(yàn)結(jié)束前一周,每組選取4頭牛,采用全收糞尿法進(jìn)行消化代謝試驗(yàn),其中預(yù)飼期3d,正試期4d。結(jié)果表明:PD-Lys組及PD-Met組的血清尿素氮含量、尿氮排出量均顯著高于PC組(P0.05),導(dǎo)致其氮沉積及氮代謝率顯著低于PC組(P0.05);但扣除Thr對(duì)血清尿素氮及尿氮含量無顯著影響(P0.05)。基于氮沉積確定Lys為第一限制性氨基酸,其次分別為Met和Thr,基于氮沉積計(jì)算得適宜氨基酸模式為100:32:57。總之,扣除日糧30%的Lys及Met會(huì)引起氨基酸失衡,導(dǎo)致血清尿素氮含量升高,尿氮排放量增加,氮沉積下降�；诘练e獲得氨基酸限制性順序及適宜模式分別為:LysMetThr、Lys:Met:Thr=100:32:57。綜上,扣除日糧Lys及Met導(dǎo)致AA失衡,促進(jìn)肝臟天冬氨酸的生成,增加尿素合成,導(dǎo)致血清尿素氮及尿氮排量顯著增加,氮沉積顯著下降,從而導(dǎo)致生長性能顯著下降;Lys缺乏加速肝臟磷脂代謝,促進(jìn)花生四烯酸及類二十烷酸等促炎癥因子上調(diào),磷脂酰膽堿及神經(jīng)酰胺等抑炎癥因子下調(diào);基于玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧的6~9月齡荷斯坦生長母牛的AA限制性順序?yàn)長ysMetThr,適宜比例為Lys:Met:Thr=100:32:57。
【圖文】：

技術(shù)路線

特征峰信息清單，用于進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)方法 SIMCA14.1（Umetrics）對(duì)采集到的特征峰信息進(jìn)行主成分分析（PCA）, 偏析（PLS-DA）和正交偏最小二乘法判別分析（OPLS-DA），最后對(duì) OPLS-DVariable importance in the projection）VIP 值大于 1 的數(shù)據(jù)進(jìn)行 t 檢驗(yàn)，查找標(biāo)P<0.05）。果與分析向色譜正離子模式下各組 OPLS-DA 得分圖與標(biāo)志性差異代謝物-1 為根據(jù)反向色譜正離子模式下測得的肝臟代謝產(chǎn)物，得到的 PD-Lys 組與A 得分圖，表示組間和組內(nèi)數(shù)據(jù)的差異性和相似性，可以看出 2 組組內(nèi)數(shù)間明顯分開，，說明扣除 Lys 后肝臟內(nèi)的某些代謝產(chǎn)物較 PC 組存在顯著差D-Met 組、PD-Thr 組與 PC 組的 OPLS-DA 圖，表明扣除 2 種 AA 對(duì)生長母模式下測得的肝臟代謝產(chǎn)物沒有顯著影響。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S823.5

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本文編號(hào)：2651076