【摘要】：副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis)是一種定植于豬上呼吸道的革蘭氏陰性條件致病菌,豬在免疫力低下或者應激狀態(tài)下時,該菌可引起格拉瑟氏病(Gl?sser’s disease)。盡管副豬嗜血桿菌毒力因子及致病機理仍不清楚,但病原菌表面唾液酸化是其逃避和抵抗宿主免疫系統(tǒng)重要的機制,而且已有體外實驗表明副豬嗜血桿菌的唾液酸酶和唾液酸轉(zhuǎn)移酶與細菌毒力密切相關,所以本論文對副豬嗜血桿菌唾液酸基因缺失株JS0135△nanH和唾液酸轉(zhuǎn)移酶基因缺失株SH0165△lsgB對仔豬的免疫保護效果和致病能力進行了研究,所取的主要研究結(jié)果如下。1.JS0135△nanH和SH0165△lsgB對仔豬的免疫保護將JS0135△nanH和SH0165△lsgB通過肌肉途徑和腹腔途徑免疫仔豬,商業(yè)滅活疫苗免疫和PBS免疫作為陽性對照和陰性對照,然后用強毒株SH0165攻毒。實驗中檢測仔豬血清中副豬嗜血桿菌抗體水平上升的速度,發(fā)現(xiàn)JS0135△nanH免疫組仔豬抗體水平上升速度快于SH0165△lsgB免疫組仔豬,SH0165△lsgB免疫組仔豬快于商業(yè)滅活疫苗免疫組仔豬;JS0135△nanH免疫組通過腹腔途徑免疫的仔豬顯著快于通過肌肉途徑免疫的仔豬,SH0165△lsgB免疫組仔豬兩種免疫途徑?jīng)]有明顯差異。仔豬攻毒后綜合評價不同免疫組的免疫保護效果,JS0135△nanH優(yōu)于SH0165△lsgB,SH0165△lsgB優(yōu)于商業(yè)滅活苗。2.野生株和缺失株感染細胞刺激細胞炎性因子將JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分別感染3D4/2細胞,4h后檢測細胞炎性因子的mRNA表達水平,發(fā)現(xiàn)IL-1α、IL-8和TNF-α差異性表達。然后在2h、4h和8h時,檢測IL-1α、IL-8和TNF-α的表達情況,結(jié)果顯示缺失株較野生株刺激細胞產(chǎn)生更高的細胞炎性因子(P≤0.01)。3.野生株和缺失株對仔豬攻毒將JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分別對仔豬進行攻毒,通過記錄仔豬臨床癥狀、大體病理變化和組織器官分菌,結(jié)果表明SH0165△lsgB相對野生株SH0165對仔豬致病力明顯下降,JS0135△nanH相對野生株JS0135對仔豬致病力沒有明顯改變;JS0135△nanH在存活下來的仔豬體內(nèi)全部被清除。
【圖文】：

3.2.1.5 仔豬免疫攻毒前后體溫測量圖 3-1 仔豬免疫保護實驗示意圖Fig. 3-1 Schematic diagram of piglets immune protection experiment

.6 仔豬免疫攻毒后臨床癥狀及評分標準圖 3-2 仔豬測量體溫時間點示意圖Fig. 3-2 Schematic diagram of piglts measuring rectal temperature time
【學位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S852.61

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本文編號：2648045