發(fā)布時間：2020-04-29 03:46

【摘要】：瞬時受體式基因 1(Transient Receptor Potential Melastatin 1,TPRM1)在完全分化黑色素細胞表型和分化增殖調(diào)控中具有重要作用,并且只在正常的黑色素細胞中表達。已有研究表明,黑色素含量的下降與TRPM1的表達減少有關(guān)。本試驗旨在研究不同發(fā)育階段不同毛色公綿羊皮膚在中TRPM1表達特性,選取0、3、6、12月齡杜泊綿羊(♂)X蒙古羊(早)雜交黑、白公羊為試驗對象,提取綿羊皮膚組織總RNA,擴增TRPM1完整CDS區(qū),qRT-PCR檢測TRPM1mRNA,免疫組織化學技術(shù)對綿羊皮膚中TRPM1定位,Western Blotting技術(shù)對TRPM1蛋白進行分析。主要研究結(jié)果如下:(1)綿羊TRPM1基因完整CDS區(qū)長度為5017bp;由1671個氨基酸組成;TRPM1的二級結(jié)構(gòu)中存在潛在信號肽位點,含有疏水區(qū)域和6個跨膜結(jié)構(gòu),N-糖基化位點可能有9個,存在潛在的磷酸化位點。(2)在0、3、6、12月齡黑、白雜交公羊中皮膚中,TRPM1mRNA均有不同程度的表達,6月齡白色綿羊皮膚中的表達顯著高于其他月齡白色綿羊皮膚中的表達量(P0.05)。黑色綿羊皮膚中0月齡TRPM1的表達量顯著低于其他月齡(P0.05)。不同發(fā)育階段黑色綿羊皮膚中TRPM1 mRNA的表達量顯著高于相同月齡白色綿羊皮膚中的表達量(P0.05)。(3)Western Blotting結(jié)果顯示TRPM1蛋白在不同發(fā)育階段的黑、白綿羊皮膚中均有表達,但不同月齡的表達具有差異性,進一步驗證了 mRNA水平檢測的結(jié)果。(4)免疫組織化學結(jié)果顯示,在白色和黑色綿羊皮膚中,TRPM1蛋白定位于毛囊毛干、外根鞘、毛乳頭和毛發(fā)基質(zhì)。初步闡明不同發(fā)育階段不同毛色綿羊皮膚在中TRPM1表達特性,初步證實TRPM1基因在綿羊毛色形成中的重要作用,為研究綿羊TRPM1基因在黑色素形成過程中的功能奠定一定的基礎。
【圖文】：

２邋ＴＲＰＭ蛋白家族概況逡逑哺乳動物ＴＲＰＭ亞科由八個成員組成，它們在５’羥基跨膜域上與ＴＲＰＣ通道共逡逑享２０％的氨基酸叱類似于ＴＲＰＣｓ、ＴＲＰＭ蛋白質(zhì)有ｃ羥基端跨膜域（圖１－２）。這逡逑些蛋白質(zhì)的總氨基酸長度（１０００－邋２０００）和ｃ羥基末端區(qū)域的序列差異很大。基于氨基逡逑酸序列的相似性，這些蛋白質(zhì)分為ＴＲＰＭ１／３、ＴＲＰＭ４／５和ＴＲＰＭ６／７（圖１－３＼ＴＲＰＭ２逡逑和ＴＲＰＭ８不屬于任何子集，盡管它們之間的關(guān)系最為密切。ＴＲＰＭ２和ＴＲＰＭ６／７是逡逑不同尋常的，它們是通道酶，都具有ｃ端酶域問。逡逑－３－逡逑

肽預測逡逑程序?qū)Π被嵝蛄羞M行信號r婪治觶ㄍ跡玻矗＃櫻椋紓睿幔歟形恢媒性げ�。Ｃ－ｓｃｅP潁邋澹恚幔椋恚酰碇縛贍艿男藕烹鬧感藕烹淖槌剎糠值目贍芐裕唬伲螅悖錚潁邋澹恚幔椋恚酰碇剛媸抵福櫻螅悖錚潁宓鈉驕鄭綣櫻螅悖錚潁邋澹恚澹幔睿荊埃擔蛟げ庾畬螅彌滴保�，桩岓Ｙ值为１６，桩岓Ｓ值为１４，从能的切糕O壞閽冢保保抵洌�，Ｔ＿b校停蒞被嶁蛄兄校裕

本文編號：2644189