油酰甘氨酸對C2C12細胞蛋白質沉積的影響
本文關鍵詞:油酰甘氨酸對C2C12細胞蛋白質沉積的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:瘦肉率對生豬生產來說是一個尤其重要的經濟指標,而這一指標主要取決于豬骨骼肌的生長發(fā)育。因此,豬骨骼肌生長發(fā)育的研究成為近年來研究的一個熱點。研究豬骨骼肌的生長發(fā)育,不僅對提高豬的生長速率至關重要,而且對改善豬肉品質具有重要的理論意義和應用價值。脂酰氨基酸廣泛分布于腦組織和其他外周組織中。已有大量研究表明,脂酰氨基酸在鎮(zhèn)痛抗炎、細胞增殖、細胞凋亡和3T3-L1細胞聚酯等方面具有重要的調控作用。為了研究脂酰氨基酸對骨骼肌生長發(fā)育的影響,本試驗以C2C12細胞為研究對象,采用不同種類和不同劑量的脂酰氨基酸處理C2C12細胞,研究其對細胞增殖、分化和蛋白質沉積的影響,篩選出本試驗所需的脂酰氨基酸。同時探討其對C2C12細胞增殖、分化、蛋白質沉積和肌纖維類型的影響,以及對C2C12細胞蛋白質沉積相關信號通路的影響。研究結果表明:(1)脂酰氨基酸對C2C12細胞的增殖和分化均無顯著影響;但一定劑量的脂酰氨基酸能夠促進C2C12細胞蛋白質的合成。其中,OLGly發(fā)揮作用的有效劑量最小。(2)OLGly對C2C12細胞的增殖和分化均無顯著影響;2和20μM的OLGly能夠促進C2C12細胞蛋白質的合成,且呈劑量依賴性(P0.05)。OLGly是以復合體發(fā)揮促進蛋白質合成的作用。(3)OLGly顯著提高處理30 min和60 min后細胞的ERK和S6蛋白的磷酸化水平(P0.05),但對mTOR蛋白的表達水平卻無顯著影響(P0.05),同時對蛋白質降解通路的FoxO1、MAFBx和MuRF1的蛋白和mRNA表達水平無顯著影響(P0.05)。(4)OLGly能夠顯著降低C2C12 MyHC IIx和MyHC IIb基因的蛋白和mRNA的表達水平(P0.05),而對MyHC I和MyHC IIa基因的蛋白和mRNA的表達水平無明顯影響(P0.05)。上述試驗結果提示:OLGly顯著促進C2C12細胞蛋白質的合成是通過提高MAPK信號通路中的ERK蛋白和mTOR信號通路中的S6蛋白的磷酸化水平,而不是通過減少分解途經實現(xiàn)的。本研究結果旨在闡明脂酰氨基酸對豬骨骼肌生長發(fā)育的營養(yǎng)調控,為進一步研制調控肌肉發(fā)育的新型功能性調控物提供試驗依據(jù)。
【關鍵詞】:油酰甘氨酸 增殖和分化 蛋白質沉積 肌纖維類型
【學位授予單位】:華南農業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S828
【目錄】:
- 摘要3-5
- Abstract5-11
- 1 前言11-18
- 1.1 骨骼肌生長發(fā)育的過程11-12
- 1.2 調控骨骼肌生長發(fā)育的相關因素12-15
- 1.2.1 調控骨骼肌細胞增殖的相關因素12-13
- 1.2.2 調控骨骼肌細胞分化的相關因素13-14
- 1.2.3 調控骨骼肌細胞蛋白質沉積的相關因素14-15
- 1.3 脂酰氨基酸的研究進展15-17
- 1.3.1 脂酰氨基酸的結構15-16
- 1.3.2 脂酰氨基酸的來源16
- 1.3.3 脂酰氨基酸的功能16-17
- 1.4 本研究的目的和意義17-18
- 2 材料和方法18-34
- 2.1 材料18-21
- 2.1.1 主要儀器設備18
- 2.1.2 試驗細胞及動物18
- 2.1.3 試驗用品及耗材18-19
- 2.1.4 試驗用品的清洗及消毒19-20
- 2.1.5 主要試劑的配制20-21
- 2.2 脂酰氨基酸對C2C12細胞增殖、分化和蛋白質沉積的影響21-25
- 2.2.1 C2C12細胞的復蘇及傳代培養(yǎng)21-22
- 2.2.2 脂酰氨基酸對C2C12細胞增殖的影響22
- 2.2.3 脂酰氨基酸對C2C12細胞分化的影響22-23
- 2.2.4 脂酰氨基酸對C2C12細胞蛋白質沉積的影響23-25
- 2.3 OLGly對C2C12細胞增殖、分化、蛋白質沉積和肌纖維類型相關基因表達水平的影響25-33
- 2.3.1 OLGly對C2C12細胞增殖以及相關基因mRNA表達水平的影響25-29
- 2.3.2 OLGly對C2C12細胞分化以及相關基因mRNA表達水平的影響29
- 2.3.3 OLGly對C2C12細胞蛋白質沉積的影響29-32
- 2.3.4 OLGly對C2C12細胞蛋白質沉積相關信號通路分子的影響32-33
- 2.3.5 OLGly對C2C12細胞肌纖維類型相關基因表達水平的影響33
- 2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析33-34
- 3 結果與分析34-42
- 3.1 脂酰氨基酸對C2C12細胞增殖、分化和蛋白質沉積的影響34-35
- 3.1.1 脂酰氨基酸對C2C12細胞增殖的影響34
- 3.1.2 脂酰氨基酸對C2C12細胞分化的影響34-35
- 3.1.3 脂酰氨基酸對C2C12細胞蛋白質沉積的影響35
- 3.2 OLGly對C2C12細胞增殖、分化、蛋白質沉積和肌纖維類型的影響35-42
- 3.2.1 OLGly對C2C12細胞增殖的影響35-36
- 3.2.2 OLGly對C2C12細胞分化的影響36-37
- 3.2.3 OLGly對C2C12細胞蛋白質沉積的影響37-40
- 3.2.4 OLGly對C2C12細胞肌纖維類型相關基因表達水平的影響40-42
- 4 討論與結論42-45
- 4.1 OLGly對C2C12細胞增殖的影響42
- 4.2 OLGly對C2C12細胞分化的影響42-43
- 4.3 OLGly對C2C12細胞蛋白質沉積的影響43-44
- 4.4 OLGly對C2C12細胞肌纖維類型轉化的影響44
- 4.5 結論44-45
- 致謝45-46
- 參考文獻46-50
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本文關鍵詞:油酰甘氨酸對C2C12細胞蛋白質沉積的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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