發(fā)布時(shí)間：2020-04-11 04:59

【摘要】：西門塔爾牛在世界各國(guó)都有飼養(yǎng),其品種分為乳用、肉用、乳肉兼用等類型。中國(guó)的西門塔爾牛是我國(guó)從瑞士引進(jìn)后經(jīng)過(guò)幾代的雜交改良,現(xiàn)己成為我國(guó)一種大型的乳肉兼用牛的優(yōu)良品種。中國(guó)荷斯坦奶牛(1997年以前稱中國(guó)黑白花奶牛)是19世紀(jì)末期,由中國(guó)的黃牛與當(dāng)時(shí)引進(jìn)我國(guó)的荷斯坦牛雜交,經(jīng)過(guò)1970到1980年的不斷選育,而逐漸形成的。在本研究中,先采用PCR-RFLP的方法對(duì)ABCA1基因遺傳多態(tài)性進(jìn)行了檢測(cè),進(jìn)一步分析ABCA1基因SNP位點(diǎn)與中國(guó)荷斯坦奶牛產(chǎn)奶性狀的相關(guān)性。最近,QSOX1被發(fā)現(xiàn)參與了各種生物過(guò)程,包括病毒復(fù)制、胚胎發(fā)育、炎癥和癌癥�？扇苄远鄣鞍椎慕Y(jié)構(gòu)完整性已被證實(shí)與QSOX1有顯著相關(guān)性,可在細(xì)菌中通過(guò)人類的QSOX1基因聯(lián)合表達(dá),在細(xì)菌中獲得適當(dāng)?shù)目扇苄远鄣鞍椎鞍踪|(zhì)。為了進(jìn)一步驗(yàn)證ATP腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A 1(ABCA1)基因和牛胎兒成纖維細(xì)胞與中國(guó)荷斯坦奶牛的乳脂代謝之間的關(guān)系,提高牛奶的質(zhì)量以滿足不同的人群,本研究通過(guò)RNAi技術(shù)檢測(cè)了ABCA1的作用。據(jù)我們所知,ABCA1的作用尚未被RNA干擾(RNAi)水平證實(shí)。因此,我們利用Fu GENE HD轉(zhuǎn)染試劑介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)降低中國(guó)荷斯坦奶牛乳腺上皮細(xì)胞(BMECs)及成纖維細(xì)胞(BFF)內(nèi)源基因表達(dá)水平,特異性沉默兩種基因,分析細(xì)胞生物學(xué)功能的變化。在m RNA和蛋白質(zhì)水平,分別用RNAi處理前后的熒光定量PCR技術(shù),蛋白質(zhì)印跡和TG-kit分析細(xì)胞內(nèi)甘油三酯(TG)含量~([1-3])。結(jié)果顯示,通過(guò)熒光定量PCR技術(shù),RNA干擾后,ABCA1基因和QSOX1基因m RNA表達(dá)量顯著降低,通過(guò)western技術(shù),蛋白水平顯著降低。通過(guò)TG-kit試劑盒,檢測(cè)結(jié)果顯示RNA干擾后,基因在細(xì)胞中的TG含量表達(dá)顯著降低。研究結(jié)果表明,ABCA1基因和QSOX1基因是中國(guó)荷斯坦奶牛乳腺組織和成纖維細(xì)胞中甘油三酯合成的重要基因,可能與奶牛乳脂率的合成有關(guān)。本研究為建設(shè)低脂奶牛提供理論依據(jù)。
【圖文】：

圖 1.1 牛的血液基因組 DNA 電泳結(jié)果g l.1 The results of blood genomic DNA electrophM 為 DL 2000 Marker，，泳道 1-5 為 DNA 電泳檢測(cè)

ABCA1基因混池測(cè)序結(jié)果
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S823

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2623184