【摘要】：本研究在測定略陽烏雞體重、脾臟重量等生長性狀及雞脾臟發(fā)育狀況的基礎(chǔ)上,運用轉(zhuǎn)錄組測序和生物信息學(xué)分析技術(shù)鑒定差異表達基因和影響脾臟發(fā)育的關(guān)鍵基因,旨在進一步發(fā)掘略陽烏雞生長脾臟發(fā)育與免疫相關(guān)基因及相關(guān)通路,探索其內(nèi)在分子機制。選取7日齡、30日齡和120日齡且飼養(yǎng)條件相同的略陽烏雞各3只。測量體重和脾臟重量,收集脾臟組織,利用石蠟切片對脾臟發(fā)育進行組織學(xué)分析,利用RNA-seq技術(shù)對略陽烏雞脾臟組織進行轉(zhuǎn)錄組測序,分析基因表達模式。主要結(jié)果如下:1.脾臟組織學(xué)觀察:7日齡略陽烏雞脾臟T、B淋巴細胞和淋巴鞘開始產(chǎn)生,30日齡略陽烏雞脾臟T、B淋巴細胞數(shù)量和淋巴鞘數(shù)量更多,形態(tài)趨于穩(wěn)定,120日齡略陽烏雞脾臟與30日齡相比無顯著差異。2.轉(zhuǎn)錄組測序篩選差異表達基因:通過轉(zhuǎn)錄組測序發(fā)現(xiàn)7日齡與30日齡相比差異表達基因340個;30日齡與120日齡相比差異表達基因174個;7日齡與120日齡相比差異表達基因1100個。三組對比共同差異表達基因17個。3.差異表達基因GO、KEGG分析:7日齡與30日齡差異表達基因主要富集在外部刺激反應(yīng)、白細胞遷移、細胞趨化性、粒細胞遷移和防御反應(yīng)等與免疫相關(guān)的條目。30日齡與120日齡差異表達基因主要富集在細胞趨化作用、白介素-1的調(diào)節(jié)、外部刺激反應(yīng)、細菌防御反應(yīng)和趨化因子受體結(jié)合等與免疫相關(guān)的條目。7日齡與120日齡差異表達基因主要富集在細胞周期、有絲分裂核分裂、染色體的濃縮、著絲粒和紡錘體微管等與細胞分裂相關(guān)的條目。此外,三組間對比的差異基因均富集到了造血細胞譜系信號通路、神經(jīng)活性配體受體相互作用信號通路和細胞因子-細胞因子受體相互作用信號通路。4.權(quán)重基因共表達網(wǎng)絡(luò)分析:構(gòu)建了與性狀相關(guān)聯(lián)的權(quán)重基因共表達網(wǎng)絡(luò),篩選出與雞生長發(fā)育相關(guān)的關(guān)鍵基因有:EVL、FGD3、TNIK、QRICH1、ZYX、TBL1X、IFT80、SF3B1、CEPT1、MYH9、POLH和MICAL1;影響略陽烏雞免疫功能的關(guān)鍵基因有:EVL、VAV3、TNIK、NLRC3、IL2RB、RPS25、WBP1L、DDX17、ABHD10、PON2、FANCD2和CD3E。
【圖文】：

-10-圖 2-2 不同日齡略陽烏雞脾臟重量變化規(guī)律ig. 2-2 Changes in spleen weight of Lueyang black-bone chicken at different day-不同日齡略陽烏雞脾臟組織學(xué)分析同發(fā)育階段的雞脾臟組織結(jié)構(gòu)進行研究，可以將脾臟免疫細胞的發(fā)育聯(lián)系起來，從而揭示其所蘊含的生物學(xué)意義。略陽烏雞脾臟石蠟切片圖可知，7 d 雞脾臟有零星淋巴細胞（藍色部位），中央動脈周圍包裹織。30 d 雞脾臟生發(fā)中心變多變大，，白髓和紅髓的界線更加明顯，橢著大量淋巴細胞。120 d 雞脾臟動脈明顯且數(shù)量變多，生發(fā)中心顯著量也顯著增多。

從而揭示其所蘊含的生物學(xué)意義。略陽烏雞脾臟石蠟切片結(jié)果見圖2-3，由圖可知，7 d 雞脾臟有零星淋巴細胞（藍色部位），中央動脈周圍包裹著一些彌散淋巴組織。30 d 雞脾臟生發(fā)中心變多變大，白髓和紅髓的界線更加明顯，橢球淋巴鞘周圍充斥著大量淋巴細胞。120 d 雞脾臟動脈明顯且數(shù)量變多，生發(fā)中心顯著增大，淋巴細胞數(shù)量也顯著增多。
【學(xué)位授予單位】：陜西理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S831

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本文編號：2618263