發(fā)布時間：2020-04-04 18:20

【摘要】：circRNA(circular RNA,circRNA)一類特殊的內源性非編碼RNA(non-coding RNA,ncRNA)分子,是近幾年RNA領域研究的熱點。本研究主要通過催乳素處理的奶牛乳腺上皮細胞的高通量測序結果分析,初步篩選出存在差異表達的circRNA,并在奶牛乳腺上皮細胞中驗證其環(huán)形結構。初步篩選后,選擇circHIPK3作為研究對象,探究circHIPK3對乳腺上皮細胞增殖分化的影響。STAT5 inhibitor實驗探究circHIPK3與催乳素誘導的STAT5通路的關系,并進一步探究STAT5inhibitor處理對circHIPK3表達量和對乳腺上皮細胞增殖的影響。最后,探究可變剪接影響因子SRPK1、SRPK2、ADAR、ILF3相關基因對circHIPK3形成的影響。本研究主要取得的結果如下:(1)成功構建了催乳素處理下奶牛乳腺上皮細胞的circRNA文庫,其中findcirc鑒定出的circRNA總共有16364條。通過分析發(fā)現(xiàn)兩個不同狀態(tài)下顯著上調的circRNA的數(shù)量為6760,存在顯著下調的circRNA的數(shù)量為5991,說明催乳素對circRNA的表達有影響。(2)成功驗證了10個奶牛乳腺上皮細胞中存在的circRNA,說明circRNA在奶牛乳腺上皮細胞中是大量存在的。(3)circHIPK3在奶牛與C57BL/6J小鼠不同組織(心、肝、脾、肺、腎、胃、腸和乳腺)中均有表達,說明了circHIPK3具有一定的保守性。(4)揭示了circHIPK3促進HC11的增殖,抑制4T1細胞的增殖,對HC11的分化沒有影響。(5)circHIPK3的表達量受到催乳素及其誘導的STAT5信號通路的影響,催乳素會顯著提高circHIPK3的表達量,而STAT5 inhibitor處理將顯著抑制circHIPK3的表達量。STAT5 inhibitor處理也會抑制乳腺上皮細胞的增殖。(6)催乳素通過STAT5信號通路改變可變剪接影響因子SRPK1、SRPK2、ADAR、ILF3等基因的表達量從而間接影響circHIPK3的形成。
【學位授予單位】：江蘇師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S823

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 夏世金;高文;胡明冬;劉露梅;邰先桃;;環(huán)狀RNA的研究現(xiàn)狀及展望[J];中華肺部疾病雜志(電子版);2014年06期

2 李培飛;陳聲燦;邵永富;蔣孝明;肖丙秀;郭俊明;;環(huán)狀RNA的生物學功能及其在疾病發(fā)生中的作用[J];生物物理學報;2014年01期

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本文編號：2613907