【摘要】：豬精液的常溫保存技術(shù)能夠使精子在體外保存一定時(shí)間,極大地促進(jìn)了人工授精技術(shù)的推廣與利用。在豬精子的體外保存過程中,由于各種理化因素,精子質(zhì)膜與頂體的完整性會受到一定的破壞,造成精子細(xì)胞的能量代謝系統(tǒng)受損,精子的品質(zhì)逐漸降低。因此需要優(yōu)化常溫保存稀釋液配方,以維持精子的結(jié)構(gòu)與功能,延長精子在體外的成活時(shí)間。二甲雙胍是一種二型糖尿病臨床治療藥物,能夠促進(jìn)機(jī)體對葡萄糖的攝取與利用,并改善機(jī)體代謝狀況。目前,精子體外保存過程中二甲雙胍是否對豬精子具有保護(hù)作用尚不清楚。本文擬以公豬精子為試驗(yàn)對象,探究二甲雙胍對精子常溫保存效果的影響,并且探究二甲雙胍是否通過AMPK的介導(dǎo)而影響精子的能量代謝。通過檢測精子活率、質(zhì)膜完整性、頂體完整性、線粒體膜電位、ATP含量、葡萄糖攝取能力、乳酸生成量與乳酸脫氫酶活性,探究二甲雙胍對豬精子體外保存效果的影響及其機(jī)理。主要結(jié)果如下:1.二甲雙胍能夠改善常溫保存豬精子的品質(zhì)。在稀釋液中添加不同濃度的二甲雙胍,檢測常溫保存期間精子的活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率、線粒體膜電位與ATP含量。發(fā)現(xiàn)200μmol/L二甲雙胍添加組精子活率、質(zhì)膜完整率、線粒體膜電位與ATP含量顯著優(yōu)于對照組(P0.05);2.二甲雙胍通過激活A(yù)MPK改善豬精子品質(zhì)與精子能量代謝。發(fā)現(xiàn)精子中活化的AMPK主要定位于精子尾部與赤道環(huán),二甲雙胍能夠促進(jìn)AMPK的活化,有利于常溫保存過程中精子AMPK活化狀態(tài)的維持(P0.05),且二甲雙胍能夠促進(jìn)精子對葡萄糖的攝取與代謝(糖酵解)(P0.05)。此外,在使用AMPK特異性抑制劑后,發(fā)現(xiàn)二甲雙胍沒有顯著改善精子的活率、質(zhì)膜完整與線粒體膜電位,同時(shí)也沒有顯著提高精子ATP的含量、葡萄糖的攝取能力、乳酸的生成量與乳酸脫氫酶的活性(P0.05)。綜上:在常溫保存過程中,添加二甲雙胍能夠激活A(yù)MPK,促進(jìn)豬精子對葡萄糖的攝取與糖酵解,進(jìn)而改善精子的能量代謝,維持精子活率與精子結(jié)構(gòu)的完整性。因此,在豬精子常溫保存稀釋液中添加二甲雙胍有助于延長豬精子在體外的有效保存時(shí)間。
【圖文】：

圖 3-1 二甲雙胍對常溫保存豬精子質(zhì)膜完整率的影響Figure 3-1 Effect of metformin on boar spermatozoa membrane integrity in 17胍對常溫保存豬精子頂體完整率的影響溫保存豬精子頂體完整率，本試驗(yàn)使用熒光素標(biāo)記的花生凝集素 1、5、9、13d 豬精子的頂體進(jìn)行染色觀察并對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分行檢測并統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)二甲雙胍對常溫保存精子的頂體完整性無

圖 3-1 二甲雙胍對常溫保存豬精子質(zhì)膜完整率的影響igure 3-1 Effect of metformin on boar spermatozoa membrane integrity in 17胍對常溫保存豬精子頂體完整率的影響溫保存豬精子頂體完整率，本試驗(yàn)使用熒光素標(biāo)記的花生凝集素 1、5、9、13d 豬精子的頂體進(jìn)行染色觀察并對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分行檢測并統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)二甲雙胍對常溫保存精子的頂體完整性無
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S828

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 高建明;虞桂平;邵世義;張志剛;潘永杰;;不同稀釋液對豬精液常溫保存效果的影響[J];中國畜牧雜志;2007年13期

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本文編號：2608767