【摘要】：玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)是少數(shù)產(chǎn)毒霉菌中的一種具有雌激素活性且能發(fā)揮類雌激素作用的代謝產(chǎn)物。近年來(lái),世界上許多溫濕地區(qū)的農(nóng)作物在貯藏、加工、運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程中均不同程度地受到ZEA的污染,甚至還通過(guò)食物鏈存在于農(nóng)副產(chǎn)品中對(duì)人及動(dòng)物的健康造成極大威脅。ZEA發(fā)揮作用的靶器官主要是雌性動(dòng)物的生殖系統(tǒng),ZEA能與雌激素受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合擾亂激素代謝,誘發(fā)母畜雌激素過(guò)多癥,進(jìn)而引起生殖器官功能和形態(tài)的變化,引發(fā)母畜繁殖障礙,給畜牧生產(chǎn)業(yè)帶來(lái)極大的損失,不利于生豬產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。為了探究不同水平ZEA污染飼糧對(duì)斷奶仔豬子宮生長(zhǎng)發(fā)育的影響,本研究主要采用HE染色法、免疫組織化學(xué)、qRT-PCR、Western Blot等試驗(yàn)方法比較斷奶仔豬子宮內(nèi)增殖凋亡相關(guān)因子及TGF-β1/Smad3信號(hào)通路關(guān)鍵基因的分布與表達(dá)差異。試驗(yàn)選取34-36日齡健康三元雜交(杜×長(zhǎng)×大)斷奶仔豬40頭,平均體重為(14.01±0.86 kg)。將所有試驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為4個(gè)處理,每個(gè)處理10頭豬,組間初始體重差異不顯著(P0.05),小母豬單籠飼養(yǎng)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,三個(gè)試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧上添加0.5、1.0及1.5 mg/kg ZEA(ZEA的測(cè)定值分別為0.52±0.07、1.04±0.03和1.51±0.13 mg/kg),預(yù)飼期10 d,正式期35 d。本試驗(yàn)結(jié)果如下:隨著飼糧中ZEA水平的升高,斷奶仔豬的子宮指數(shù)呈一次(P0.01)和二次(P0.01)線性升高;1.5 mg/kg ZEA處理組的子宮指數(shù)顯著高于1.0 mg/kg處理組(P0.05),1.0 mg/kg處理顯著高于0.5 mg/kg處理組和對(duì)照組(P0.05);并且子宮肌層和內(nèi)膜厚度隨著ZEA水平的升高呈一次(P0.01)和二次(P0.01)線性升高,子宮腺密度明顯增大。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示斷奶仔豬子宮內(nèi)生長(zhǎng)激素受體(Growth hormone receptor,GHR)、增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,BCL-2)、BCL-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2-associated x protein,BAX)免疫陽(yáng)性物質(zhì)主要分布在子宮肌層平滑肌細(xì)胞、血管壁細(xì)胞、內(nèi)膜上皮細(xì)胞、腔上皮細(xì)胞,而GHR、PCNA、BCL-2在基質(zhì)細(xì)胞也有分布,且隨著飼糧中ZEA的增加,免疫陽(yáng)性反應(yīng)明顯增強(qiáng),但免疫陽(yáng)性物質(zhì)的分布位置沒(méi)有因ZEA水平而發(fā)生明顯變化。子宮內(nèi)GHR、PCNA和BCL-2的mRNA相對(duì)表達(dá)量均呈一次(P0.01)和二次(P0.01)線性升高;BAX、Smad3的mRNA相對(duì)表達(dá)量呈一次(P0.05)線性升高;1.5 mg/kg ZEA和1.0 mg/kg處理組TGF-β1的mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于0.5 mg/kg(P0.05),且0.5 mg/kg ZEA組的顯著高于對(duì)照組(P0.05)。子宮內(nèi)GHR、PCNA、BCL-2、BAX、TGF-β1、Smad3和p-Smad3的蛋白相對(duì)表達(dá)量均呈一次(P0.05)和二次(P0.01)線性升高。以上結(jié)果表明,(1)ZEA(0.5-1.5 mg/kg)能改變斷奶仔豬子宮形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu),且子宮器官指數(shù)與ZEA水平呈劑量效應(yīng);(2)ZEA可能通過(guò)調(diào)控子宮內(nèi)PCNA和GHR的高水平表達(dá),引發(fā)性早熟、促進(jìn)細(xì)胞增殖,進(jìn)而誘導(dǎo)子宮肥大、異常發(fā)育;(3)ZEA可以激活子宮內(nèi)經(jīng)典的TGF-β1/Smad3信號(hào)通路,參與子宮生長(zhǎng)發(fā)育等生殖活動(dòng)。
【圖文】：

圖 2 玉米赤霉烯酮代謝物的分子結(jié)構(gòu)（Yang et al.，2018）Fig. 2 Chemical structure of zearalenone’s metabolites (Yang et al., 2018)1.1.4 玉米赤霉烯酮的生殖毒性ZEA的代謝產(chǎn)物α-ZOL、β-ZOL均具有類雌激素作用，它們和ZEA與ERs結(jié)依次為：α-ZOL > ZEA> β-ZOL（Mukherjee et al.，2014），它們都能競(jìng)爭(zhēng)性擾亂生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)，引發(fā)一系列雌激素過(guò)多癥，進(jìn)而誘發(fā)生殖障礙（Jiang eEtienne and Jemmali，1982），限制了畜牧產(chǎn)業(yè)的優(yōu)化，給畜牧生產(chǎn)業(yè)帶來(lái)極損失。ZEA誘發(fā)的生殖毒性，與動(dòng)物種類、飼喂方式、給藥劑量及時(shí)間密切有關(guān)稱，豬是所有動(dòng)物中對(duì)ZEA最敏感的一類，而其中青春期未性成熟的豬表現(xiàn)（Young and King，1986），此外，ZEA對(duì)大鼠、小鼠、兔子和家畜都能造成（董雙等，2016；徐明龍等，2016；None，2004）。處于青春期的小母豬飼6、9 mg/kg），假孕的比率顯著升高，繁殖率大大下降（Young and King，19

圖 3 TGF-β/Smad 信號(hào)通路（Liu et al.，2016）Fig.3 TGF-β/Smad signaling pathway（Liu et al.，2016）1.5.1TGF-β1/Smad3 信號(hào)通路對(duì)子宮發(fā)育的影響子宮作為雌性哺乳動(dòng)物的主要性器官，是胎兒生長(zhǎng)發(fā)育最主要的場(chǎng)所。報(bào)道表明TGF-β1 作為 TGF 超家族成員中最重要的因子（Eva et al.，2012），其不僅在卵泡發(fā)育卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞之間的信號(hào)傳導(dǎo)中扮演著重要的角色（郭永紅等，2005；徐夢(mèng)思2015b；Shull and Doetschman，1994），在子宮的生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程中也發(fā)揮了重要的用（金莉萍，2003；于月新等，2016；Halis et al.，2010；Omwandho et al.，2010）。外，Shooner 等研究發(fā)現(xiàn)，正常妊娠的各個(gè)階段，TGF-β1 在大鼠子宮和胎盤中都有表達(dá)妊娠早期主要存在于子宮蛻膜，，中晚期主要分布在滋養(yǎng)層、植入位點(diǎn)旁邊的腺上皮和上皮（Shooner et al.，2005），在胚胎著床、胎兒發(fā)育、胎兒生長(zhǎng)等很多方面都有重的作用。TGF-β1 還可刺激基質(zhì)細(xì)胞合成基質(zhì)蛋白促進(jìn)子宮內(nèi)膜的蛻膜形成、促進(jìn)子內(nèi)膜容受性，為胚胎的著床提供了強(qiáng)有利的條件（Schilling and Yeh，1999）。趙昕等
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S858.28

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳寧波;張崇玉;姜淑貞;黃麗波;陳祥興;孫建立;楊維仁;;鐮刀菌毒素對(duì)斷奶仔豬血清酶、肝臟抗氧化功能及組織病理學(xué)的影響[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2015年09期

2 徐夢(mèng)思;黃濤;劉麗娟;楊飛;魯慧文;翟騰蛟;陳亞楠;;豬SKP1基因的克隆及其在梅山豬與杜洛克豬卵泡中的表達(dá)研究[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2015年07期

3 陳祥興;楊維仁;張崇玉;黃麗波;張磊;牛群升;陳寧波;劉寧;姜淑貞;;鐮刀菌毒素對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、小腸二糖酶活性和抗氧化能力的影響[J];動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2015年06期

4 劉寧;楊在賓;楊維仁;姜淑貞;張桂國(guó);楊玲;牛群升;;自然霉變玉米和玉米蛋白粉對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分表觀消化率及血清酶水平的影響[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2015年03期

5 姜淑貞;孫華;黃麗波;楊在賓;王淑靜;劉法孝;F.Chi;;不同水平玉米赤霉烯酮對(duì)斷奶仔豬血清代謝產(chǎn)物和肝腎組織病理學(xué)影響[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年18期

6 王青;周丹朝;趙煜;周宏超;劉曉強(qiáng);李引乾;楊鳴琦;;玉米赤霉烯酮的生殖毒性研究進(jìn)展[J];畜牧獸醫(yī)雜志;2014年04期

7 同海妮;白淑;王樹迎;黃麗波;石運(yùn)芝;侯衍猛;;GHR和IGF-IR在濟(jì)寧青山羊子宮內(nèi)分布和表達(dá)的發(fā)育性變化[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年09期

8 薛歆;董進(jìn);;雌激素對(duì)成骨細(xì)胞增殖及TGF-β_1、IGF-1 mRNA表達(dá)的影響[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2013年14期

9 姜淑貞;楊維仁;楊在賓;王淑靜;劉法孝;Chi F;;玉米赤霉烯酮污染日糧添加改性蒙脫石對(duì)斷奶仔豬免疫指標(biāo)的影響[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年16期

10 劉琳琳;劉玉環(huán);蔣東橋;夏恩蘭;趙玉婷;宋冬梅;鄭杰;彭雪冰;;CTGF和TGF-β_1的表達(dá)與宮腔粘連形成的相關(guān)性[J];山東醫(yī)藥;2012年12期

本文編號(hào)：2608223