【摘要】：肌肉生長抑制素(Myostatin,MSTN)是近幾年來發(fā)現(xiàn)的骨骼肌生長的負調(diào)控因子,其活性的喪失,會引起動物肌肉的過度發(fā)育,肌纖維直徑變大或肌纖維數(shù)增加,表現(xiàn)為動物的“雙肌”性狀。在小鼠、狗、牛和人類中MSTN突變的個體均表現(xiàn)出骨骼肌過度發(fā)育的表型。本研究對基因組定點編輯技術(shù)與體細胞克隆技術(shù)結(jié)合獲得的MSTN基因單側(cè)突變(MSTN+/-)和雙側(cè)突變(MSTN-/-)的豬進行生理生化指標等檢測,為基因改良瘦肉型品種豬的培育提供基礎性數(shù)據(jù)。研究內(nèi)容及結(jié)果主要包括以下幾個方面:為了鑒定在基因敲除豬中MSTN基因表達及觀察其表達水平的變化,采用逆轉(zhuǎn)錄(ReverseTranscriptionPCR,RT-PCR)的方法,檢測 MSTN,卵泡抑素(Follistatin),核心蛋白多糖(Decorin),以及可溶性受體ActRIIB在背最長肌與股二頭肌中的表達情況。MSTN基因缺失后,Follistatin、Decorin與ActRⅡB在MSTN+/-豬與MSTN-/-豬背最長肌中均有不同程度表達;在MSTN+/-豬的股二頭肌中除Follistatin只有少量表達以外,Decorin與ActR IIB均無表達,Follistatin、Decorin與ActRIIB在MSTN-/-豬股二頭肌中均無表達。經(jīng)過對三種豬即野生型WT、MSTN+/-和MSTN--豬的血液檢測及分析,發(fā)現(xiàn)野生型豬(18.4±0.55)與MSTN+/-豬(12.25±0.32)、MSTN-/-豬白細胞總數(shù)(12±0.15)比較各有顯著性差異(P0.05);但是MSTN基因敲除豬之間比較白細胞總數(shù)無顯著性差異(P0.05);野生型豬(22±1.95)、MSTN+/-豬(15.9±0.92)與MSTN--豬中性粒細胞百分比(18.7±1.72)比較結(jié)果表明三者互相均有顯著性差異(P0.05)。采取三種豬的尿液進行檢測后發(fā)現(xiàn)三組豬的尿膽原含量、潛血含量、蛋白質(zhì)含量與白細胞含量均顯示為可忽略的疑似陽性反應(“±”號);其余膽紅素、酮體、亞硝酸鹽、葡萄糖含量均顯示為陰性反應,表明數(shù)值完全正常,并且尿液pH值均在正常范圍內(nèi)(pH=7.0)。綜上所述,雖然在上述指標中部分血液指標在MSTN基因敲除豬與野生型豬之間存在顯著的差異,但是所有指標均在健康豬正常范圍內(nèi)。因此初步判定MSTN基因敲除豬與該同種野生型豬的指標均為正常。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S828

【參考文獻】

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本文編號：2607273