發(fā)布時(shí)間：2020-03-21 08:38

【摘要】：背景:鹿茸是唯一可以完全再生的哺乳動(dòng)物附屬器官,其每年基于角柄骨膜(PP)細(xì)胞的增殖與分化周期性再生。PP由生茸區(qū)骨膜(AP)發(fā)育而來(lái)的,AP主要存在于仔公鹿額外脊處,移植AP到鹿體上的其他部位時(shí)可以誘導(dǎo)異位鹿茸形成。PP根據(jù)其與皮膚接觸的緊密程度,分為致敏區(qū)和休眠區(qū),致敏區(qū)與緊覆于其上的皮膚相互作用,使鹿茸干細(xì)胞發(fā)育成完整的鹿茸。因此,致敏區(qū)與休眠區(qū)差異蛋白質(zhì)組必定于再生過(guò)程中起重要作用。鹿茸為研究哺乳動(dòng)物的器官再生提供了絕佳的模型。先前的研究表明,PP細(xì)胞開(kāi)始鹿茸的再生是由睪酮(T)的減少引發(fā)的。睪酮水平對(duì)角柄的生長(zhǎng)有積極作用,但對(duì)鹿茸的生長(zhǎng)有負(fù)面影響。方法:兩只公鹿,每隔兩周定時(shí)采集血樣。在第一次采血后進(jìn)行閹割,然后比較鹿茸再生前后的睪酮水平。給一只鹿施用外源睪酮,另外一只則作為對(duì)照。在鹿茸發(fā)起再生前收集致敏區(qū)PP和休眠區(qū)PP組織,使用放射免疫測(cè)定法分析雄激素水平,然后用Label-free方法檢測(cè)差異蛋白質(zhì)點(diǎn),進(jìn)行質(zhì)譜分析以獲得肽質(zhì)量指紋印跡。通過(guò)Kobas.3等軟件探索蛋白質(zhì)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。最后用qRTPCR法驗(yàn)證一些關(guān)鍵的差異表達(dá)蛋白(DEPs)。結(jié)果:在再生與非再生組共檢測(cè)到2956個(gè)差異表達(dá)蛋白。在再生組中,有243種顯著上調(diào),98種顯著下調(diào);有2615種在兩組中并未達(dá)到顯著水平。我們通過(guò)KEGG(P0.05)鑒定了與雄激素相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,例如雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)加工和焦點(diǎn)粘連等。DEPs的Gene Ontology(GO)注釋分為生物過(guò)程、細(xì)胞成分和分子功能。在所有這些GO-term注釋中,我們根據(jù)差異顯著性排名選擇顯示前十位(P0.05)。討論:睪酮可能在鹿茸再生中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。發(fā)現(xiàn)一些鑒定的DEP和信號(hào)傳導(dǎo)途徑與雄激素有關(guān),雄激素可能參與鹿茸再生。鹿茸作為生物醫(yī)學(xué)研究模型,對(duì)其再生過(guò)程進(jìn)行各個(gè)層面(發(fā)育、細(xì)胞更新和修復(fù)機(jī)制)的探索,會(huì)對(duì)人類組織和器官的疾病或損傷有很大的益處。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S825

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本文編號(hào)：2593073