【摘要】：持久性環(huán)境污染物全氟辛酸(Perfluorooctane acid,PFOA)廣泛應(yīng)用于與人類生活息息相關(guān)的各個領(lǐng)域,其對人和動物的肝臟毒性與生殖毒性已經(jīng)引起了高度重視。番茄紅素(Lycopene)作為一種天然類胡蘿卜素,擁有超強的抗氧化能力,有保護肝腎損傷、抑制腫瘤、提高免疫力等諸多功效。本試驗旨在研究PFOA對妊娠期小鼠肝臟、子宮和胚胎的毒性作用以及番茄紅素的緩解作用。通過3部分試驗探討了PFOA對小鼠妊娠早期和后期的毒性作用及番茄紅素的保護作用和相關(guān)機制。PFOA對妊娠早期小鼠的肝臟、子宮和胚胎的毒性研究。將妊娠0 d小鼠隨機分至A、B、C、D、E、F 6個組中,每組10只。A組為對照組,孕1 d開始每日按10 mg/kg體重灌服蒸餾水,B、C、D、E、F組分別按體重1,5,10,20,40 mg/kg每日經(jīng)口灌服PFOA(蒸餾水為溶劑)。監(jiān)測各組小鼠體重的變化。每組小鼠孕1-7 d灌服PFOA,孕9 d稱重處死,采集待測樣品。計算肝臟指數(shù)和子宮指數(shù);統(tǒng)計平均子宮重、平均胚胎著床數(shù);采集肝臟和子宮組織制備石蠟切片,HE染色觀察其病理學(xué)變化;制備小鼠肝勻漿并檢測其SOD、GSH-Px、MDA水平。結(jié)果顯示,20、40 mg/kg PFOA導(dǎo)致孕鼠體重下降;各PFOA染毒組肝指數(shù)均極顯著增加,呈劑量依賴性;肝臟病理變化顯著;10、20、40 mg/kg PFOA導(dǎo)致肝臟中SOD和GSH-Px酶活力顯著下降、MDA含量明顯提高,并呈劑量依賴性;40 mg/kg組孕鼠發(fā)生流產(chǎn)或胚胎吸收,病理學(xué)變化明顯,子宮指數(shù)、平均子宮重和平均胚胎著床數(shù)均極顯著低于對照組。提示誘導(dǎo)肝臟內(nèi)脂質(zhì)過氧化,可能是PFOA肝臟毒性的機理之一,妊娠早期高劑量PFOA染毒可能導(dǎo)致子宮淤血或胚胎丟失。PFOA對妊娠后期小鼠子宮、胎兒的毒性作用研究。將所有妊娠0 d孕鼠隨機分至6個小組中,每個組10只。A組為對照組,孕1 d開始每日按10 mg/kg體重灌服蒸餾水,B、C、D、E、F組分別按1,5,10,20,40 mg/kg體重每日灌服PFOA溶液。監(jiān)測各組小鼠體重的變化。每組小鼠孕1~17 d灌服PFOA,孕18 d稱重處死,完整取出肝臟和子宮,胚胎計數(shù),稱量肝重、子宮總重和每只胚胎重,采集子宮組織固定,制備石蠟切片,免疫組化檢測子宮細胞中Fas、Fas L、Bax、Bcl-2、Caspase-3的分布和含量。TUNEL法檢測子宮中細胞的凋亡情況。結(jié)果表明,對照組、1、5 mg/kg組孕鼠體重持續(xù)增加,10,20 mg/kg組孕鼠體重呈緩慢上升趨勢,40 mg/kg小鼠全部流產(chǎn),體重呈下降趨勢;除1mg/kg組外,其余PFOA染毒組肝指數(shù)極顯著增加,子宮指數(shù)、平均子宮重、平均胚胎重和平均胚胎成活率均明顯降低;不同劑量的PFOA可以不同程度的增加Fas、Fas L、Bax和Caspase-3的表達,降低Bcl-2的表達,降低Bcl-2/Bax比值;PFOA使子宮細胞凋亡數(shù)增加,且呈劑量依賴性。提示PFOA可通過調(diào)節(jié)子宮細胞中Fas、Fas L、Bax、Bcl-2、Caspase-3凋亡蛋白的表達,促進子宮細胞過度凋亡,導(dǎo)致流產(chǎn)和胚胎發(fā)育緩慢。番茄紅素對PFOA致小鼠肝臟及子宮損傷的緩解作用。將孕0 d的小鼠隨機分至5個組中,每組10只。A組為對照組,孕1-8 d每日上午灌服大豆油,0.1 m L/只,孕1-7 d按10 mg/kg體重每日下午灌服蒸餾水;B組為模型組,孕1-8 d每日上午灌服大豆油,0.1 m L/只,孕1-7 d每日下午灌服20 mg/kg的PFOA溶液;C、D、E組分別為番茄紅素低、中、高劑量組,劑量分別為10 mg/kg,20 mg/kg,40 mg/kg,C、D、E組孕1-8 d每日上午灌服不同濃度番茄紅素,0.1m L/只,孕1-7 d每日下午灌服20 mg/kg的PFOA溶液。記錄各組小鼠體重的變化,孕9 d稱重處死,采集肝臟,稱重,計算肝臟指數(shù),采集0.2 g肝組織制備肝勻漿,檢測SOD、GSH-Px、MDA含量;完整取出子宮,稱重,統(tǒng)計子宮指數(shù)、子宮重。結(jié)果顯示,孕鼠灌服番茄紅素后,體重下降趨勢有所好轉(zhuǎn);番茄紅素高劑量組肝指數(shù)明顯低于模型組;番茄紅素中、高劑量組子宮指數(shù)、平均子宮重均與模型組差異極顯著;番茄紅素高劑量組SOD和GSH-Px酶活性均比模型組有極顯著性提高,三個番茄紅素組均能降低MDA水平,與對照組無顯著性差異。提示提高肝臟的抗氧化能力可能是番茄紅素保肝作用的機制之一。結(jié)果表明,妊娠早期PFOA連續(xù)染毒小鼠可致明顯的肝臟毒性,并呈劑量依賴性,表現(xiàn)為肝指數(shù)明顯升高,肝臟出現(xiàn)明顯的病理變化,肝臟中SOD、GSH-Px酶活力降低,MDA含量增加。妊娠早期高劑量PFOA連續(xù)染毒可致孕鼠流產(chǎn),后期染毒可致胚胎丟失或胎兒生長緩慢。PFOA可上調(diào)Fas、Fas L、Bax和Caspase-3在子宮組織中的表達,下調(diào)Bcl-2的表達,Bcl-2/Bax比值下降,導(dǎo)致子宮細胞凋亡程度明顯增加,呈劑量依賴性。番茄紅素可緩解PFOA對孕鼠肝臟和子宮的毒性作用,其保肝作用可能與提高肝臟中SOD、GSH-Px酶活力,降低MDA水平有關(guān)。
【圖文】：

圖 1. 各組孕鼠體重 1-9 d 增長情況Figure 1. Body weight of the maternal in each group.數(shù)的影響PFOA 處理組肝指數(shù)與對照組相比均有極顯著性增加(P<0增加而增大，1 mg/kg 和 5 mg/kg PFOA 兩組肝臟指數(shù)20 mg/kg 和 40 mg/kg 組則與其他各組均有極顯著性差異(P

Figure 1. Body weight of the maternal in each group.的影響OA 處理組肝指數(shù)與對照組相比均有極顯著性增加加而增大，1 mg/kg 和 5 mg/kg PFOA 兩組肝臟mg/kg 和 40 mg/kg 組則與其他各組均有極顯著性差的毒性作用，，且具有劑量依賴性，如圖 2 所示。
【學(xué)位授予單位】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S853.7

【參考文獻】

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本文編號：2583072