【摘要】：新城疫又名亞洲雞瘟是一種高發(fā)病率和死亡率的高度接觸性禽類傳染病。新城疫的病原為新城疫病毒,又名禽Ⅰ型副粘病毒,屬于副粘病毒科、禽腮腺炎病毒屬。新城疫病毒基因組為負(fù)鏈單股RNA,其基因結(jié)構(gòu)為3'-NP-P-M-F-HN-L-5',遵循六堿基原則,分別編碼6種結(jié)構(gòu)蛋白和2種非結(jié)構(gòu)蛋白。根據(jù)對于禽的致病性差異可以將新城疫病毒株分為3種類型,強毒力毒株、中等毒力毒株和低毒力毒株。根據(jù)病毒基因組大小和序列分析,可把新城疫病毒分為兩大類,ClassⅠ和ClassⅡ。ClassⅡ分支包括大多數(shù)有毒力新城疫病毒株,其至少包括18個基因亞型。ClassⅠ分支病毒由基因1~9型組成,病毒基因組全長為15198 bp,大多數(shù)ClassⅠ新城疫病毒毒株從水禽和活禽市場中分離到。新城疫病毒的宿主范圍較廣,感染約250種野生鳥類,分布于大多數(shù)種屬的鳥。野鳥作為新城疫病毒的一個自然儲宿主,在新城疫病毒遺傳進化及毒力演變過程中發(fā)揮著非常重要的作用。本論文主要研究結(jié)果如下:1.在2014年11月份,從我國青海省湟源縣健康的散養(yǎng)家鴿中采集咽拭子和泄殖腔拭子樣品共計34份,通過接種10日齡雞胚分離法,利用血凝試驗、血凝抑制試驗和RT-PCR等方法對新城疫病毒的分離鑒定,共有2份試子樣品呈現(xiàn)陽性(5.88%)。2.Pigeon/QH-01/Ch/14毒株的MDT大于148h,ICPI為0.00,分離毒株的F蛋白裂解位點氨基酸序列為112E-R-Q-E-R-L117。根據(jù)OIE規(guī)定的新城疫病毒的毒力致病性評估結(jié)果表明本分離毒株為弱毒力新城疫毒株。3.利用RT-PCR擴增測定Pigeon/QH-01/Ch/14毒株相互重疊的10個病毒基因片段,然后用DNASTAR軟件將10個片段拼接。分離毒株的全基因序列為15198 bp,其基因結(jié)構(gòu)為3'-NP-P-M-F-HN-L-5'。利用MEGA(6.02)軟件,根據(jù)ML方法,將Pigeon/QH-01/Ch/14分離株的F全基因進行遺傳進化分析,結(jié)果表明該新城疫病毒分離株為ClassⅠ類1b基因亞型NDV毒株。Pigeon/QH-01/14分離株與ClassⅠ類中Duck/LH/LHu B/085/2013弱毒力分離株(登錄號:KM885161)的親緣關(guān)系最近,核苷酸同源性為97.6%,遺傳進化距離為0.01。本研究表明,散養(yǎng)家鴿不但感染基因Ⅵ型的新城疫病毒,而且也是ClassⅠ類基因1b亞型新城疫病毒的自然易感宿主之一。4.對Pigeon/QH-01/14分離株的F和HN基因的核苷酸與推導(dǎo)的氨基酸序列分析。結(jié)果表明:相比于大多數(shù)的ClassⅠ類與ClassⅡ類的新城疫病毒分離毒株,Pigeon/QH-01/14分離毒株的F蛋白功能域有7個氨基酸殘基發(fā)生了突變,在HN蛋白功能域有13個氨基酸殘基發(fā)生了氨基酸的突變替換。相比于大多數(shù)的ClassⅠ類的新城疫病毒株,在F蛋白的中和表位有3個中和表位發(fā)生了突變,在HN蛋白的中和表位有10個氨基酸殘基發(fā)生了氨基酸替換。結(jié)果表明,分支ClassⅠ類基因1型新城疫病毒的遺傳變異進化在不斷的進行中。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S852.65

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本文編號：2566954