發(fā)布時間：2019-11-21 18:39

【摘要】：用PCV2感染5周齡昆明系小鼠,分別在感染后7,14,21,28,35,42d處死小鼠,取脾臟、腹股溝淋巴結(jié)、Peyer鎦s結(jié)做PCR鑒定PCV2感染情況,提取腸道中蛋白檢測SIgA及腸道相關(guān)細胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ含量的變化。結(jié)果顯示:隨著感染時間的延長,試驗組小鼠腸道SIgA、IL-2和IFN-γ水平均呈先升高后降低的趨勢,IL-4和IL-10呈持續(xù)升高的趨勢。結(jié)果表明:小鼠腸道SIgA及相關(guān)細胞因子的含量在PCV2的刺激下發(fā)生了不同程度的改變。
【圖文】：

Ｌ避光顯色２０ｍｉｎ，加終止液５０μＬ后上機，利用酶標儀測定Ｄ４５０ｎｍ值并計算出樣品濃度。１．１１統(tǒng)計學(xué)分析所有數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標準誤表示，統(tǒng)計分析采用ＳＰＳＳ１７．０軟件，２組間比較采用ｔ檢驗。２結(jié)果２．１小鼠臟器中ＰＣＶ２核酸檢測病毒感染后１４，２１，２８，３５，４２ｄ，，在脾臟、腹股溝淋巴結(jié)、Ｐｅｙｅｒ鎦ｓ結(jié)中可以檢測到ＰＣＶ２核酸，而對照組均未檢測到病毒（表１），表明小鼠已經(jīng)成功感染ＰＣＶ２。圖１為病毒感染后１４ｄ對照組、試驗組小鼠Ｐｅｙｅｒ鎦ｓ結(jié)的ＰＣＶ２核酸檢測結(jié)果。２．２病毒的分離鑒定盲傳５代后以抗ＰＣＶ２衣殼蛋白Ｃａｐ的單克隆抗體檢測細胞培養(yǎng)物的ＰＣＶ２病毒。ＩＦＡ可見細胞核和細胞質(zhì)中特異性的綠色熒光（圖２），表明ＰＫ１５細胞已被感染，結(jié)果表明成功從受感染的小鼠體內(nèi)分離出病毒，測序結(jié)果表明此病毒基因組序列與接種病毒序列一致。表１感染試驗組小鼠臟器中ＰＣＶ２核酸檢測結(jié)果臟器７ｄ１４ｄ２１ｄ２８ｄ３５ｄ４２ｄ脾臟０／３＊３／３２／３３／３３／３３／３腹股溝淋巴結(jié)０／３３／３３／３３／３３／３３／３Ｐｅｙｅｒ鎦ｓ結(jié)０／３３／３３／３３／３３／３３／３注：＊示陽性樣品／檢測樣品圖１感染后１４ｄ小鼠Ｐｅｙｅｒ鎦ｓ結(jié)ＰＣＶ２核酸檢測Ｍ．ＤＬ２０００ＤＮＡＭａｒｋｅｒ；１．ＰＣＶ２陰性對照；２．ＰＣＶ２陽性對照；３～５．對照組小鼠Ｐｅｙｅｒ鎦ｓ結(jié)果；６～８

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本文編號：2564120