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綿羊痘病毒的檢測(cè)與遺傳進(jìn)化分析

發(fā)布時(shí)間:2019-11-18 22:29
【摘要】:羊痘是全球最嚴(yán)重的動(dòng)物傳染性痘病。近年來(lái),羊痘病毒在非洲北部和中部、中東、亞洲大部分地區(qū)廣泛流行,給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。論文對(duì)4只疑似羊痘病毒感染綿羊進(jìn)行診斷,通過(guò)臨床觀察,病理剖檢,病理組織學(xué)觀察,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),確定該病為綿羊痘,并對(duì)分離的病毒主要基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增及遺傳進(jìn)化分析,發(fā)現(xiàn)此毒株屬于亞洲系,且我國(guó)流行株基因比較穩(wěn)定,變異不大。這不僅為綿羊痘病的診斷提供了技術(shù)手段,還豐富了我國(guó)羊痘病毒感染的流行病學(xué)資料,為進(jìn)一步研究羊痘病毒的變異等提供數(shù)據(jù)支持。
【圖文】:

臨床癥狀,病理變化


A5程序以Hasegawa-Kishino-Yano和Tajima-Nei模型構(gòu)建MaximumLikelihood進(jìn)化樹(shù),進(jìn)化樹(shù)的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)以1000的Bootstrap進(jìn)行分析。2結(jié)果2.1臨床癥狀的觀察通過(guò)臨床癥狀觀察,發(fā)現(xiàn)發(fā)病綿羊具有以下的共同臨床特征:體溫升高,脈搏和呼吸加速,精神萎靡,廢食,,喜臥。眼結(jié)膜潮紅、腫脹、鼻液黏稠。部分病羊無(wú)毛或毛少的部位出現(xiàn)紅色圓形斑點(diǎn),有的已經(jīng)變成黃豆或蠶豆大的丘疹,觸感較硬,甚至結(jié)痂成黑色(圖1A),或破潰脫痂,形成紅色潰瘍(圖1B)。進(jìn)一步對(duì)病死綿羊剖檢觀察,發(fā)現(xiàn)患病綿羊的主要病變集中于胃部和肺部。具體來(lái)說(shuō),胃漿膜上出現(xiàn)了大量的黃豆粒乃至扁豆大的白色結(jié)節(jié),觸感堅(jiān)硬,突出表面(圖1C)。肺部表面亦有多量灰白色豌豆大小的痘斑,突出表面,觸感堅(jiān)硬,同時(shí)肺部局部嚴(yán)重出血(圖1D)。其余部位,如心、肝、脾、腸等部位未見(jiàn)明顯異常,以上病變均為綿羊痘的典型病理變化。2.2病理組織切片根據(jù)臨床癥狀及剖檢變化,初步懷疑并死綿羊源于羊痘病毒感染。為進(jìn)一步驗(yàn)證我們的判斷,我們?nèi)〉湫筒∽儾课徊〗〗唤缣幗M織,制作病理切片,通過(guò)HE染色,鏡檢,我們發(fā)現(xiàn)病死綿羊肺泡內(nèi)多量炎性細(xì)胞滲出,肺泡壁明顯增生,肺泡結(jié)構(gòu)消失(圖2A);肺出血、水腫(圖2B);在皮下組織出現(xiàn)多量炎性細(xì)胞滲出、聚集,此外皮膚結(jié)節(jié)典型的組織病理變化(圖2C)。A.口鼻部位結(jié)痂;B.尾部痘疹、潰瘍;C.胃部多量結(jié)節(jié);D.肺結(jié)節(jié)及出血A.Scabonmouthandnose;B.Poxontail;C.Nodulesinstomach;D.Nodulesandhemorrhageinlungs圖

羊病,組織切片


的白色結(jié)節(jié),觸感堅(jiān)硬,突出表面(圖1C)。肺部表面亦有多量灰白色豌豆大小的痘斑,突出表面,觸感堅(jiān)硬,同時(shí)肺部局部嚴(yán)重出血(圖1D)。其余部位,如心、肝、脾、腸等部位未見(jiàn)明顯異常,以上病變均為綿羊痘的典型病理變化。2.2病理組織切片根據(jù)臨床癥狀及剖檢變化,初步懷疑并死綿羊源于羊痘病毒感染。為進(jìn)一步驗(yàn)證我們的判斷,我們?nèi)〉湫筒∽儾课徊〗〗唤缣幗M織,制作病理切片,通過(guò)HE染色,鏡檢,我們發(fā)現(xiàn)病死綿羊肺泡內(nèi)多量炎性細(xì)胞滲出,肺泡壁明顯增生,肺泡結(jié)構(gòu)消失(圖2A);肺出血、水腫(圖2B);在皮下組織出現(xiàn)多量炎性細(xì)胞滲出、聚集,此外皮膚結(jié)節(jié)典型的組織病理變化(圖2C)。A.口鼻部位結(jié)痂;B.尾部痘疹、潰瘍;C.胃部多量結(jié)節(jié);D.肺結(jié)節(jié)及出血A.Scabonmouthandnose;B.Poxontail;C.Nodulesinstomach;D.Nodulesandhemorrhageinlungs圖1患病羊臨床癥狀與病理變化Fig.1TheclinicalsymptomsandpathologicallesionsofthesicksheepA.肺泡壁增生;B.肺水腫;C.皮膚結(jié)痂A.Thickenedalveolarwalls;B.Pulmonaryedema;C.Scabonskin圖2患病羊病理組織切片Fig.2Histopathologicexaminationofthesicksheep2.3羊痘病毒基因檢測(cè)根據(jù)剖檢癥狀及組織病理學(xué)觀察,初步診斷并死綿羊?yàn)檠蚨徊《靖腥尽V,采集典型病變部位病健交界處組織,提取病毒基因組DNA,進(jìn)一步驗(yàn)10動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展2017年第38卷第12

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