【摘要】：本試驗(yàn)以1日齡海蘭褐雛雞空腸和回腸組織為研究對(duì)象,利用RT-PCR的方法檢測(cè)雛雞空腸、回腸、十二指腸和盲腸組織中p Ig R m RNA的表達(dá)量;利用分子克隆技術(shù),在體外克隆兔抗雛雞p Ig R多克隆抗體;通過(guò)口服腸炎沙門氏菌(Salmonella Enteritidis,SE)的方法感染雛雞,于感染后的1d、3d、7d和14d,利用熒光定量PCR的方法檢測(cè)雛雞空腸和回腸組織中TLR4信號(hào)通路中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p IgR m RNA的表達(dá)量;Western Blot檢測(cè)雛雞空腸和回腸組織中p Ig R蛋白表達(dá)水平;旨在探討SE對(duì)TLR4信號(hào)通路調(diào)節(jié)雛雞p Ig R的影響,結(jié)果表明:(1)利用原核表達(dá)載體融合雛雞p IgR蛋白,免疫雄性新西蘭大白兔,成功制備了兔抗雛雞p Ig R多克隆抗體。(2)SE感染雛雞空腸組織,實(shí)驗(yàn)組TLR4、TRAF6、My D88、NF-κB和p Ig R mRNA表達(dá)在1d開(kāi)始上調(diào),且NF-κB m RNA表達(dá)明顯升高(P0.05);到第3d時(shí),將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組對(duì)比發(fā)現(xiàn),TLR4 m RNA表達(dá)量明顯上調(diào)(P0.05),p Ig R m RNA表達(dá)量明顯提高(P0.01);隨后基因表達(dá)開(kāi)始下調(diào),至第14d,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p Ig R mRNA表達(dá)量差異不顯著。結(jié)果表明,雛雞感染SE后,TLR4信號(hào)通路被激活,且空腸組織中p IgR mRNA的表達(dá)量升高。(3)SE感染雛雞回腸組織,實(shí)驗(yàn)組TLR4、TRAF6、My D88、NF-κB和p Ig R mRNA表達(dá)量在1d開(kāi)始上調(diào),且NF-?B m RNA表達(dá)量升高(P0.05);到第3d時(shí),將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組對(duì)比發(fā)現(xiàn),TLR4、My D88和p Ig R m RNA表達(dá)量極顯著升高(P0.01),而TRAF6 mRNA表達(dá)量明顯提高(P0.05);隨后基因表達(dá)量開(kāi)始下調(diào),至14d時(shí),實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p Ig R m RNA表達(dá)量差異不顯著。結(jié)果表明,雛雞感染SE后,TLR4信號(hào)通路被激活,且回腸組織中p Ig R m RNA的表達(dá)量升高。(4)SE感染雛雞空腸和回腸組織,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組相比p Ig R的蛋白水平明顯上升(P0.01),結(jié)果表明,雛雞感染SE后,上調(diào)空腸和回腸組織中p Ig R的蛋白水平。(5)SE激活空腸和回腸黏膜細(xì)胞表面的TLR4信號(hào)通路上調(diào)p Ig R的表達(dá),進(jìn)而增強(qiáng)雛雞的腸黏膜免疫。
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S831

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 吳一凡,張雙全,高秀玉,劉曉宇;乳糖誘導(dǎo)pET載體表達(dá)重組蛋白的研究[J];南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2002年01期

2 許國(guó)晶;繩秀珍;戰(zhàn)文斌;;牙鲆多聚免疫球蛋白受體基因的克隆、表達(dá)及鑒定[J];海洋與湖沼;2014年04期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李鵬;雞白痢沙門氏菌致病性及MyD88-依賴途徑信號(hào)分子表達(dá)的研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：2557989