【摘要】：為了探討孕酮通過環(huán)氧合酶-2(COX-2)/前列腺素2α(PGF2α)信號通路調(diào)節(jié)家畜黃體溶解的作用機(jī)制,本研究采用孕酮受體的特異抑制劑Onapristone處理體外培養(yǎng)的綿羊子宮內(nèi)膜組織,檢測分泌到培養(yǎng)液中的PGF2α濃度以及子宮內(nèi)膜中PGF2α合成過程中關(guān)鍵酶基因COX-2的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平。結(jié)果顯示,Onapristone添加到子宮內(nèi)膜組織培養(yǎng)液中后,內(nèi)膜組織合成分泌的PGF2α濃度明顯下降,且抑制了COX-2 mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平,高劑量的Onapristone(20.0μmol/L)處理72 h后COX-2的蛋白表達(dá)水平僅為對照組的23%。表明,孕酮通過其受體介導(dǎo)的COX-2/PGF2α信號通路調(diào)節(jié)家畜的黃體溶解過程,且COX-2對于PGF2α的合成起到重要的作用。
【圖文】：

*表示相應(yīng)處理組與空白對照組差異達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。圖1Onapristone處理對綿羊子宮內(nèi)膜合成PGF2α的影響Fig．1EffectofonapristoneontheproductionofPGF2αino-vineendometriumexplants外培養(yǎng)過程中添加孕酮受體抑制劑Onapristone后，與對照組中正常培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜組織相比，，0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone處理組中COX-2的mＲNA表達(dá)量在培養(yǎng)24h、48h以及72h時均有著不同程度的下降，與對照組差異極顯著(P＜0.01)。＊＊表示相應(yīng)處理組與空白對照組差異達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)。圖2Onapristone處理對綿羊子宮內(nèi)膜COX-2mＲNA表達(dá)的影響Fig．2EffectofonapristoneonthemＲNAexpressionofCOX-2inovineendometriumexplants2．3Onapristone對綿羊子宮內(nèi)膜組織中COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響利用Westernblot檢測了添加0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone到綿羊子宮內(nèi)膜組織塊體外培養(yǎng)液中PGF2α合成過程中關(guān)鍵酶COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)水平(圖3、圖4)。COX-2蛋白表達(dá)量經(jīng)內(nèi)參蛋白Histone3表達(dá)量校正后的結(jié)果顯示，不同劑量的Onapristone對COX-2在子宮內(nèi)膜中的蛋白質(zhì)表達(dá)起到不同程度的抑制作用(圖4)。尤其是在添加Onapristone的72h后，高劑量Ona-pristone組(20.0μmol/L)子宮內(nèi)膜組織中COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)量明顯的低于對照組正常培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜組織中COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)水平，僅為對照組蛋白水平的23%。24h、48h、72h為Onapristone處理時間;0．2μmol/L、2．0μmol/L、20．0μmol/L為Onapristone處理濃度;Histone為內(nèi)參蛋白。圖3不同濃度Onapristone處理綿羊子宮內(nèi)膜組織后COX-2蛋白Westernblot結(jié)果Fig．3WesternblotanalysisofCOX-2proteininovineendo-metriumexplantsafteronapristonet

*表示相應(yīng)處理組與空白對照組差異達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。圖1Onapristone處理對綿羊子宮內(nèi)膜合成PGF2α的影響Fig．1EffectofonapristoneontheproductionofPGF2αino-vineendometriumexplants外培養(yǎng)過程中添加孕酮受體抑制劑Onapristone后，與對照組中正常培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜組織相比，0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone處理組中COX-2的mＲNA表達(dá)量在培養(yǎng)24h、48h以及72h時均有著不同程度的下降，與對照組差異極顯著(P＜0.01)。＊＊表示相應(yīng)處理組與空白對照組差異達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)。圖2Onapristone處理對綿羊子宮內(nèi)膜COX-2mＲNA表達(dá)的影響Fig．2EffectofonapristoneonthemＲNAexpressionofCOX-2inovineendometriumexplants2．3Onapristone對綿羊子宮內(nèi)膜組織中COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響利用Westernblot檢測了添加0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone到綿羊子宮內(nèi)膜組織塊體外培養(yǎng)液中PGF2α合成過程中關(guān)鍵酶COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)水平(圖3、圖4)。COX-2蛋白表達(dá)量經(jīng)內(nèi)參蛋白Histone3表達(dá)量校正后的結(jié)果顯示，不同劑量的Onapristone對COX-2在子宮內(nèi)膜中的蛋白質(zhì)表達(dá)起到不同程度的抑制作用(圖4)。尤其是在添加Onapristone的72h后，高劑量Ona-pristone組(20.0μmol/L)子宮內(nèi)膜組織中COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)量明顯的低于對照組正常培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜組織中COX-2的蛋白質(zhì)表達(dá)水平，僅為對照組蛋白水平的23%。24h、48h、72h為Onapristone處理時間;0．2μmol/L、2．0μmol/L、20．0μmol/L為Onapristone處理濃度;Histone為內(nèi)參蛋白。圖3不同濃度Onapristone處理綿羊子宮內(nèi)膜組織后COX-2蛋白Westernblot結(jié)果Fig．3WesternblotanalysisofCOX-2proteininovineendo-metriumexplantsafteronapristonet
【作者單位】： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所;諾丁漢大學(xué)生物學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31601943)
【分類號】：S826

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本文編號：2552239