【摘要】：羊大腸桿菌病是中國北方冬春舍飼期間多發(fā)的疾病之一,有發(fā)病迅速,死亡快的特點(diǎn),是畜牧生產(chǎn)中需要重點(diǎn)防控的傳染病。腐植酸鈉作為一種飼料添加劑被廣泛用于動(dòng)物生產(chǎn)中,以提高動(dòng)物生產(chǎn)性能和預(yù)防疾病。本試驗(yàn)主要研究腐植酸鈉對分離于羊腸道中的4株有毒大腸桿菌的抑制作用并探討其抑制作用機(jī)理。試驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論如下：1.通過熒光分光光度計(jì)和流式細(xì)胞儀對腐植酸鈉處理后大腸桿菌進(jìn)行PI熒光檢測。結(jié)果顯示,對不同株大腸桿菌而言,雖對腐植酸鈉耐受能力有所不同,但隨著腐植酸鈉濃度的增加(1%-5%),大腸桿菌細(xì)胞相對通透率增加,損傷細(xì)胞比率增加。當(dāng)腐植酸鈉濃度為5%時(shí),大腸桿菌死亡率可以達(dá)到40%左右。試驗(yàn)說明腐植酸鈉對大腸桿菌有抑制作用,且隨著腐植酸鈉濃度的增加抑制作用越明顯。2.借助氣相色譜儀檢測腐植酸鈉作用后大腸桿菌細(xì)胞膜脂肪酸組成和含量的變化,從細(xì)胞膜脂肪酸代謝水平探究腐植酸鈉對大腸桿菌的抑制作用機(jī)理。結(jié)果顯示,隨著腐植酸鈉濃度的增加,大腸桿菌細(xì)胞膜脂肪酸不飽和程度降低,細(xì)胞膜流動(dòng)性增加,造成大腸桿菌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變,細(xì)胞脂代謝異常,實(shí)現(xiàn)腐植酸鈉對大腸桿菌的抑制。3.采用內(nèi)源熒光分光光度法檢測腐植酸鈉作用后大腸桿菌菌體蛋白的熒光光譜變化,從細(xì)胞膜蛋白結(jié)構(gòu)水平探究腐植酸鈉對大腸桿菌的抑制作用機(jī)理。結(jié)果顯示,隨著腐植酸鈉濃度的增加,大腸桿菌細(xì)胞膜蛋白熒光猝滅現(xiàn)象越明顯,造成大腸桿菌細(xì)胞膜蛋白構(gòu)象發(fā)生改變,細(xì)胞膜物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)出現(xiàn)異常,實(shí)現(xiàn)腐植酸鈉對大腸桿菌的抑制。4.運(yùn)用透射電鏡觀察腐植酸鈉對大腸桿菌形態(tài)的影響,驗(yàn)證腐植酸鈉對大腸桿菌的抑制作用。結(jié)果顯示,隨著腐植酸鈉濃度的增加,大腸桿菌細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離,細(xì)胞內(nèi)容物泄露形成空腔,造成菌體內(nèi)部的物質(zhì)合成代謝出現(xiàn)紊亂,直觀反映了腐植酸鈉抑制大腸桿菌。
【圖文】：

圖４為流式細(xì)胞儀檢測不同濃度腐植酸鋼對大腸巧菌Ｃ２細(xì)胞損傷的影喃。如圖逡逑所示，未經(jīng)ＰＩ黃光染色的的空白組大腸桿菌Ｃ２分布的區(qū)域?yàn)榧?xì)胞損傷的陰性區(qū)域逡逑（坐標(biāo)［１０，１０］），對照組大腸桿菌Ｃ２細(xì)胞分布向右移動(dòng)，處于細(xì)胞損傷陽性區(qū)域（橫逡逑．坐標(biāo)［１５５，邋１５口］）細(xì)胞比率為１４．２４％，腐植酸鑰添加濃度從１％增加至５％，大腸桿逡逑菌Ｃ２細(xì)胞分布維續(xù)向右移動(dòng)，且細(xì)胞損傷陽性區(qū)域細(xì)胞比率不斷增加，由表２可知，逡逑分別增加至２２．８３？／0、４０．７９％、６７．２７％。添加１％腐植酸錢后，大厥桿菌Ｃ２損傷細(xì)胞逡逑比率與對照組細(xì)胞正常生長情況下衰亡細(xì)胞比率相比，僅增加０．６倍，而添加３％和５％逡逑腐植酸鋼使大腸桿菌Ｃ２細(xì)胞損傷增加了邋１邋NB６倍和３．巧倍。逡逑

腐植酸鋼添加量為１％時(shí)，大損桿茵Ａ１細(xì)胞膜表面蜜白的費(fèi)光圖譜與不經(jīng)逡逑腐植酸鋼處理的正常大腸桿菌Ａ１略微降低，在最高點(diǎn)的黃光強(qiáng)度降幅只有２３．１逡逑（２．５％）；腐植酸鋼添加量為３％時(shí)，大腸桿菌Ａ１細(xì)胞膜表面蛋白的巧光圖譜繼續(xù)逡逑下移，在最高點(diǎn)的黃光強(qiáng)度比不經(jīng)腐植酸鋼處理的正常大腸桿菌Ａ１下降１３７．４逡逑（１４．６％）；腐植酸鋼添加量為５％時(shí)，大腸桿菌Ａ１細(xì)胞膜表面蠶白的夷光圖譜是逡逑所有組中最矮的，，在最高點(diǎn)的英強(qiáng)比不經(jīng)腐植酸鋼處理的正常腸人１
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S855.12

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2551117