【摘要】：奶牛子宮內(nèi)膜炎是危害性較大的繁殖性疾病,主要由病原菌感染引起。丹連花子宮灌注液由黃連、連翹、丹參和紅花等組成,具有清熱燥濕、活血化瘀的作用,對(duì)急性子宮內(nèi)膜炎具有顯著治療效果。臨床前毒理學(xué)研究是臨床用藥安全性和有效性的前提和基礎(chǔ),本試驗(yàn)對(duì)丹連花子宮灌注液進(jìn)行了急性毒理學(xué)試驗(yàn)、亞慢性毒性試驗(yàn)和靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)研究,取得以下結(jié)果:(1)丹連花子宮灌注液的急性毒理學(xué)試驗(yàn)半數(shù)致死量(LD50)的測(cè)定:采用8只小鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為2組,擬定高劑量組給藥劑量5000 mg/kg體重,分別經(jīng)口灌服和腹腔注射丹連花子宮灌注液進(jìn)行預(yù)試驗(yàn),并將每組小鼠數(shù)量增至10只,重復(fù)2次。結(jié)果表明,試驗(yàn)小鼠均未出現(xiàn)死亡,確定丹連花子宮灌注液對(duì)小鼠的經(jīng)口和腹腔注射LD50大于5000 mg/kg體重。最大耐受量試驗(yàn):小鼠40只,雌雄各半,隨機(jī)分為2組,分別以給藥容積0.4 mL/10g體重經(jīng)口1次灌服濃度2.33 g生藥/mL的丹連花子宮灌注液,及以給藥容積0.2 mL/10g體重1次腹腔注射濃度1 g生藥/mL的丹連花子宮灌注液,連續(xù)觀察10 d,記錄小鼠的精神狀態(tài)、采食及飲水、被毛色澤及糞便性狀等。在試驗(yàn)第7天時(shí),各試驗(yàn)小鼠稱重1次,并計(jì)算最大耐受倍數(shù)。結(jié)果表明,丹連花子宮灌注液經(jīng)口灌服和腹腔注射均未出現(xiàn)死亡,小鼠經(jīng)口和腹腔注射最大耐受量分別為93200 mg生藥/kg體重和20000mg生藥/kg體重,最大耐受倍數(shù)分別為466倍和100倍。皮膚刺激性試驗(yàn):家兔16只,雌雄各半,隨機(jī)分為4組,即完整皮膚組(2組,分單次和多次給藥組)和破損皮膚組(2組,分單次和多次給藥組)。采用自身對(duì)照法,分別考察丹連花子宮灌注液對(duì)完整皮膚和破損皮膚的影響。單次給藥組給藥6 h后,用溫水將殘留藥物洗掉,多次給藥組每天給藥1次,連續(xù)7 d。去除藥物后,觀察動(dòng)物脫毛皮膚紅斑、水腫程度,是否有色素沉著、出血點(diǎn)、皮膚粗糙程度等情況。結(jié)果表明,各組試驗(yàn)家兔皮膚刺激性反應(yīng)評(píng)分均為0,刺激性強(qiáng)度評(píng)價(jià)為無刺激性。陰道黏膜刺激性試驗(yàn):采用健康雌性家兔6只,隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組用注射器緩慢子宮灌注丹連花子宮灌注液2 mL/只;對(duì)照組同法灌注等量生理鹽水。給藥后24 h,采用氣栓法處死動(dòng)物,取出完整陰道,縱向切開,肉眼觀察陰道上、中、下3個(gè)部位是否有充血、水腫等表現(xiàn),并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。結(jié)果表明,眼觀充血和水腫反應(yīng)評(píng)分分別為0.78分和0.33分,眼觀刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)為無刺激性;陰道黏膜組織病理反應(yīng)評(píng)分為1.67分,刺激指數(shù)0.67分,組織病理反應(yīng)刺激強(qiáng)度屬于無刺激性。(2)丹連花子宮灌注液的亞慢性毒性試驗(yàn)SD大鼠80只,雌雄各半,隨機(jī)分為4組,其中高劑量組20 g生藥/kg體重(原藥液濃縮至2 g生藥/mL),中劑量組6.32 g/kg體重(原藥液加5%吐溫-80稀釋至0.632 g生藥/mL),低劑量組2 g/kg體重(原藥液稀釋至0.2g生藥/mL),對(duì)照組按10 mL/kg體重灌胃溶劑溶液(5%吐溫-80溶液)。給藥容積均為1 mL/100g體重,每天給藥1次,連續(xù)30 d,所有大鼠自由采食和飲水,并記錄每天的體重、采食量、飲水量及臨床癥狀。試驗(yàn)結(jié)束后,進(jìn)行病理組織學(xué)檢查、血液學(xué)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)檢測(cè),計(jì)算主要臟器指數(shù)。結(jié)果表明,試驗(yàn)大鼠給藥期間精神狀態(tài)、行為、活動(dòng)、被毛和糞便性狀,均未見異常變化;各試驗(yàn)組大鼠體重、臟器指數(shù)、血液學(xué)指標(biāo)及血液生化指標(biāo)與對(duì)照組同性別比較,差異不顯著(P0.05);高劑量組大鼠臟器組織未見明顯病理變化。說明丹連花子宮灌注液不同劑量較長(zhǎng)時(shí)間使用較安全。(3)丹連花子宮灌注液的靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)健康奶牛20頭,隨機(jī)分為4組,分別為1倍、3倍、5倍擬推薦劑量組和對(duì)照組。試驗(yàn)期7 d,藥物組第2,4,6天子宮灌注給藥,給藥劑量分別為100,300,500 mL/d,在試驗(yàn)第1天和試驗(yàn)第7天時(shí)進(jìn)行臨床檢查、血液學(xué)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)檢測(cè)及組織病理學(xué)檢查。結(jié)果表明,試驗(yàn)牛給藥期間精神狀態(tài)、行為、活動(dòng)、被毛和糞便性狀,均未見異常變化;給藥前后血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)與對(duì)照組比較,差異不顯著(P0.05),高劑量組主要臟器未見明顯病理變化。說明丹連花子宮灌注液對(duì)靶動(dòng)物臨床使用較安全。
【圖文】：

A. 完整皮膚，B. 破損皮膚A. Complete skin，B.Damaged skin圖 2-2 丹連花子宮灌注液對(duì)家兔 1 次皮膚刺激試驗(yàn)Fig.2-2 The one time complete and damaged skin irritant of rabbitsby Danlianhua uterine perfusateA. 完整皮膚，B. 破損皮膚A. Complete skin，，B. Damaged skinA B

I.Testes圖 3-1 高劑量組各臟器 HE 切片（200×）Fig. 3-1 The viscera’s HE section of high dosage group（200×）
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S853.74

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2549409