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豬瘟和豬偽狂犬野毒與其疫苗株多重PCR鑒別方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2019-10-08 06:05
【摘要】:為建立一步法鑒別檢測(cè)豬瘟病毒(CSFV)和豬偽狂犬病病毒(PRV)野毒株與其疫苗株感染的多重PCR方法(m PCR),本實(shí)驗(yàn)通過比對(duì)分析Gen Bank中登錄的CSFV和PRV的相關(guān)基因序列分別設(shè)計(jì)可以區(qū)分CSFV與PRV及其疫苗株的5對(duì)特異性引物,建立了其多重PCR鑒別檢測(cè)方法。結(jié)果表明,建立的多重PCR方法對(duì)CSFV和PRV擴(kuò)增為陽性,而對(duì)PCV2、PRRSV、JEV和BVDV擴(kuò)增結(jié)果均為陰性;最低核酸檢測(cè)量分別為1.7×10~3拷貝/μL(CSFV野毒株)、9.9×10~3拷貝/μL(CSFV-C疫苗株)、1.3×10~3拷貝/μL Guizhou-DY)、6.9×10~3拷貝/μL(Bartha-K61)和5.5×10~3拷貝/μL(SA215)。采用該方法對(duì)134份可疑臨床樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明CSFV和PRV疫苗株與野毒株在能繁母豬、育肥豬、保育豬和哺乳仔豬中的5重感染率分別為2.6%(1/38)、7.7%(2/26)、8.3%(3/36)和8.8%(3/34)。本研究建立的多重PCR方法為從病原學(xué)方面快速鑒別CSF和PR疫苗毒與野毒提供了新的技術(shù)支撐,為規(guī);i場(chǎng)實(shí)現(xiàn)豬瘟與豬偽狂犬的凈化提供一種新方法。
【作者單位】: 貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;貴州省貴陽市黔靈山公園動(dòng)物園;貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】:貴州省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目資助(黔科合NY字[2014]3055號(hào)) 貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目資助(黔科合J字[2013]2110號(hào)) 貴州大學(xué)研究生創(chuàng)新基金資助(農(nóng)研[2015]030號(hào))
【分類號(hào)】:S852.651

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1 張青占;童武;劉飛;鄭浩;周艷君;童光志;;豬偽狂犬病毒變異株全長(zhǎng)基因組測(cè)序及遺傳演化分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第八屆全國會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年



本文編號(hào):2546155

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