【摘要】：SAMHD1作為宿主的天然免疫限制性因子,參與機(jī)體的天然免疫調(diào)控,在機(jī)體抗病毒感染過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。為了建立穩(wěn)定表達(dá)豬SAMHD1的細(xì)胞系,本研究將豬SAMHD1全長(zhǎng)編碼基因克隆至慢病毒載體pWPXL,構(gòu)建重組質(zhì)粒pWPXLpSAMHD1。將重組質(zhì)粒與慢病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,獲得重組慢病毒。將該慢病毒感染MARC-145細(xì)胞,經(jīng)嘌呤霉素篩選后,獲得表達(dá)豬SAMHD1基因的MARC-pSAMHD1細(xì)胞系。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),該細(xì)胞系傳至10代,仍能穩(wěn)定表達(dá)豬SAMHD1蛋白。該細(xì)胞系的建立為豬SAMHD1抗病毒特性和豬繁殖與呼吸綜合征病毒致病機(jī)理等研究奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)項(xiàng)目(2014CB542700) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(2015BAD12B01-1) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31502072,31302098) 國(guó)家生豬現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目(CARA-36)
【分類號(hào)】：S858.28

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1 戈曼;吳星亮;尹鑫;魏萍;王曉鈞;;SAMHD1蛋白單克隆抗體的制備及SAMHD1在不同細(xì)胞中的表達(dá)鑒定[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年03期

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本文編號(hào)：2533270