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穩(wěn)定表達豬SAMHD1蛋白的MARC-145細胞系構建與鑒定

發(fā)布時間:2019-09-07 21:45
【摘要】:SAMHD1作為宿主的天然免疫限制性因子,參與機體的天然免疫調(diào)控,在機體抗病毒感染過程中發(fā)揮重要的作用。為了建立穩(wěn)定表達豬SAMHD1的細胞系,本研究將豬SAMHD1全長編碼基因克隆至慢病毒載體pWPXL,構建重組質(zhì)粒pWPXLpSAMHD1。將重組質(zhì)粒與慢病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細胞,獲得重組慢病毒。將該慢病毒感染MARC-145細胞,經(jīng)嘌呤霉素篩選后,獲得表達豬SAMHD1基因的MARC-pSAMHD1細胞系。經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn),該細胞系傳至10代,仍能穩(wěn)定表達豬SAMHD1蛋白。該細胞系的建立為豬SAMHD1抗病毒特性和豬繁殖與呼吸綜合征病毒致病機理等研究奠定了堅實的基礎。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學院上海獸醫(yī)研究所;
【基金】:國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973計劃)項目(2014CB542700) 國家科技支撐計劃課題(2015BAD12B01-1) 國家自然科學基金項目(31502072,31302098) 國家生豬現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術體系建設項目(CARA-36)
【分類號】:S858.28

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1 戈曼;吳星亮;尹鑫;魏萍;王曉鈞;;SAMHD1蛋白單克隆抗體的制備及SAMHD1在不同細胞中的表達鑒定[J];中國預防獸醫(yī)學報;2013年03期



本文編號:2533270

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