【摘要】：野生食肉類動物,如野狼、野狗、赤狐、浣熊等是狂犬病病毒的自然攜帶者或傳播者。防止野生食肉類動物的狂犬病在人和家養(yǎng)動物之間的擴散是防制狂犬病的重要環(huán)節(jié)。與家養(yǎng)動物注射用疫苗不同,野生食肉類動物口服疫苗由抗原、佐劑、誘餌三個部分組成。本研究的目的是(1)用細(xì)菌脂多糖、氫氧化鋅、枸杞多糖、甘露低聚糖篩選適合口服疫苗用的免疫佐劑,并驗證其增強免疫反應(yīng)的效果;(2)用牛肉粉、雞肉粉、魚肉粉、奶粉、血粉為主料制備口服疫苗用誘餌,并檢測誘餌的采食性以及包埋效應(yīng)。研究方法:采用同步接毒法在BHK-21細(xì)胞上增殖狂犬病病毒SRV9弱毒疫苗株,通過半數(shù)熒光灶形成量(FFD50)試驗對培養(yǎng)病毒滴度進行檢測。通過正交試驗方法對細(xì)菌脂多糖、氫氧化鋅、枸杞多糖、甘露低聚糖進行配方篩選,用昆明小鼠做佐劑的免疫效力實驗。篩選出的最佳復(fù)合佐劑與狂犬病病毒SRV9弱毒疫苗混勻后灌喂實驗組小鼠,人用狂犬病疫苗腹腔3次注射、單一病毒2次口服以及單一病毒3次口服的小鼠分別作為對照組。于免疫后14天(DAI 14)、DAI 21、DAI 28以及DAI 35分別采集實驗組和對照組小鼠血液,檢測血清IgG。用熒光抗體病毒中和試驗(FAVN)對DAI 35的實驗組小鼠血清抗體進行中和試驗。用正交試驗的方法優(yōu)選誘餌配方,用理化方法檢測其采食性和包埋效應(yīng)。研究結(jié)果:(1)增殖、獲得的狂犬病SRV9弱毒滴度(FFD50)為10-5.42/0.1 mL;(2)優(yōu)選的復(fù)合佐劑組方是細(xì)菌脂多糖100μg、氫氧化鋅0.8 mg、枸杞多糖50 mg以及甘露低聚糖10mg。在DAI 28,實驗組小鼠的血清IgG和腸道SIgA水平均值分別為3239μg/m L和1.56 ng/mL;(3)在DAI 35,復(fù)合佐劑+狂犬病病毒組誘導(dǎo)的體液免疫效果優(yōu)于單一病毒2次口服實驗組和單一病毒3次口服實驗組,血清抗體平均效價為0.63 IU/mL,已達到保護水平;(4)制備出五種誘餌組方,即魚肉味、血粉味、牛肉味、雞肉味、奶粉味誘餌組方;(5)在誘餌的采食試驗中,貓、犬、狼、狐貍對魚肉味誘餌的采食率最高,其次是血粉味和奶味誘餌;(6)誘餌在-80℃、-20℃可長期保存,在4℃、7 d條件下保存完好,即誘餌質(zhì)地適中,不變形、無著染包埋疫苗滲漏。在37℃、12 h條件下,魚肉味和血粉味誘餌保持相對穩(wěn)定,即質(zhì)地適中、無包埋物滲漏,而牛肉粉、雞肉粉、奶粉型誘餌出現(xiàn)變形、滲漏。小結(jié):本文篩選出野生食肉類動物口服疫苗所必需的復(fù)合免疫佐劑。免疫佐劑+狂犬病病毒可增加狂犬病病毒的免疫效應(yīng)。本文制備了牛肉味、雞肉味、魚肉味、血粉味和奶油味五種口服疫苗用誘餌,并確定了誘餌的采食性及包埋效應(yīng)。本文所研究的復(fù)合免疫佐劑和誘餌為進一步研發(fā)重組減毒狂犬病口服疫苗提供了必要的技術(shù)支撐。
【學(xué)位授予單位】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S859.797

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9 蔣正軍;轉(zhuǎn)基因植物口服疫苗[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2000年S1期

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3 郭曉雅;史皆然;邵成;胡琳潔;侯美娜;吳昌歸;;沙門菌Omp D介導(dǎo)的rBCG口服疫苗的制備與鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2011（第十二次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

4 李文珠;陸惠民;張惠琴;夏超明;黃偉達;;弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗誘導(dǎo)小鼠的細(xì)胞免疫反應(yīng)及抗體生成的動態(tài)過程[A];浙江省免疫學(xué)會第五次學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2004年

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6 熊學(xué)莉;口服疫苗即可防胃病[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

7 香港麥迪信出版有限公司供稿;口服疫苗，抵抗結(jié)核的保護傘[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

8 ;治療乙肝口服疫苗初見效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

9 戎文慧；文儀;口服疫苗Dukoral可預(yù)防腹瀉[N];中國醫(yī)藥報;2004年

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10 孫雙春;NR1抗原與TfR融合蛋白真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2010年

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本文編號：2532971