發(fā)布時間：2019-09-04 18:40

【摘要】：【目的】近年來,羊呼吸系統(tǒng)疾病日益頻發(fā),由腸外致病性大腸桿菌感染引起的呼吸道疾病也日漸增多,給養(yǎng)羊業(yè)帶來了一定經(jīng)濟(jì)損失。本文旨在確定新疆石河子地區(qū)某羊場表現(xiàn)為呼吸道感染癥狀的病死羔羊的細(xì)菌性病原及其特性�！痉椒ā坎捎眉�(xì)菌常規(guī)分離鑒定結(jié)合16S rRNA基因序列分析的方法從發(fā)病羔羊的肺臟中分離鑒定細(xì)菌,并對分離株進(jìn)行藥敏試驗、特異基因PCR檢測、小鼠致病性試驗及肺臟組織的病理學(xué)觀察�！窘Y(jié)果】從病死羔羊肺臟組織分離得到一株致病性大腸桿菌,該分離株呈多重耐藥現(xiàn)象,檢測到iutA、fyuA和ireA三種毒力基因;病變肺臟肺泡壁毛細(xì)血管充血,界限不清,支氣管管腔充血,周圍淋巴細(xì)胞浸潤、增生�！窘Y(jié)論】從病死羔羊肺中分離的細(xì)菌性病原是腸外致病性大腸桿菌(ExPEC)。
【圖文】：

2808微生物學(xué)通報Microbiol.China2017,Vol.44,No.12Tel:010-64807511;E-mail:tongbao@im.ac.cn;http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn圖1發(fā)病羔羊病變肺臟組織和分離菌株革蘭氏染色結(jié)果Figure1PathologicallesionsoflamblungtissueandbacterialGramstainingresults注：A：箭頭所指為發(fā)生肉變的肺臟組織；B：分離菌株革蘭氏染色鏡檢結(jié)果(1000×).Note:A:Pathologicallesionsoflamblungtissue;B:ResultsofGramstainingundermicroscopy(1000×).表2分離菌株生化鑒定結(jié)果Table2Biochemicalidentificationresultsofisolatedstrain生化鑒定項目Biochemicalidentificationitems結(jié)果Results生化鑒定項目Biochemicalidentificationitems結(jié)果Results生化鑒定項目Biochemicalidentificationitems結(jié)果Results丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳胺酶APPA側(cè)金盞花醇ADO吡咯烷基芳胺酶PyrAL-阿拉伯醇IARLD-纖維二糖dCELβ-半乳糖苷酶BGAL+H2S產(chǎn)生β-N-乙酰葡萄糖苷酶BNAG谷氨酰芳胺酶AGLTpD-葡萄糖dGLUγ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶GGT葡萄糖發(fā)酵OFF+β-葡萄糖苷酶BGLUD-麥芽糖dMAL+D-甘露醇dMAN+D-甘露糖dMNE+β-木糖苷酶BXYLβ-丙氨酸芳酶BAlapL-脯氨酸芳胺酶ProA酯酶LIP古老糖PLE酪氨酸芳胺酶TyrA+尿素酶URED-山梨醇dSOR+蔗糖SAC+D-塔格糖dTAGD-海藻糖dTRE+檸檬酸鹽(鹽)CIT丙二酸鹽MNT5-酮-葡萄糖苷5KG+乳酸鹽產(chǎn)堿ILATk+α-葡萄糖AGLU琥珀酸鹽產(chǎn)堿SUCT+N-乙酰-β-半乳糖氨酶NAGAα-半乳糖苷酶AGAL+磷酸酶PHOS氨基乙酸芳酶GlyA鳥氨酸脫羧酶ODC賴氨酸脫羧酶LDC+組氨酸同化IHISaCOURMARATE+β-葡萄糖苷酸酶BGUR+

郭強強等:綿羊肺源性致病性大腸桿菌的分離與鑒定2809Tel:010-64807511;E-mail:tongbao@im.ac.cn;http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn圖2分離株16SrRNA基因的PCR結(jié)果Figure2Determinationofisolatestrain16SrRNAgenebyPCR注：M：DL2000分子量標(biāo)準(zhǔn)；110：分離株；11：陰性對照.Note:M:DL2000marker;110:Isolatestrain;11:Negativecontrol.2.4分離株致病性試驗結(jié)果試驗組小鼠感染后雙目緊閉，被毛潮濕雜亂，呈腹式呼吸，瀕死小鼠表現(xiàn)為全身顫抖，6h內(nèi)全部死亡(100%)，而對照組小鼠無死亡。剖檢發(fā)現(xiàn)死亡小鼠肝臟腫大，邊緣有出血點，脾臟腫大變黑，肺臟充血及出血，局部出現(xiàn)壞死。無菌采集小鼠肺臟、肝臟、脾臟，均分離到與注射菌一致的大腸桿菌。2.5藥物敏感性試驗結(jié)果按CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷分離菌株對青霉素、阿莫西林、頭孢拉定、鏈霉素、慶大霉素、多西環(huán)素、麥迪霉素、氟苯尼考、諾氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、阿奇霉素和克林霉素等14種抗生素耐藥；對頭孢唑啉、丁胺卡那和多粘菌素B中度耐藥；對頭孢他啶、頭孢哌酮、氧氟沙星和米諾環(huán)素敏感。2.6ExPEC毒力因子擴(kuò)增結(jié)果以細(xì)菌DNA為模板，對9種ExPEC毒力因子進(jìn)行PCR檢測，擴(kuò)增到iutA(314bp)、fyuA(787bp)和ireA(254bp)(圖3)，且擴(kuò)增片段序列與GenBank參考序列的相似性大于99%。未檢測到papA、sfaS、focG、hlyD、afa和vaT等基因。2.7病理組織學(xué)觀察結(jié)果病死羔羊肺臟支氣管管腔充血，淋巴管擴(kuò)張，周圍淋巴細(xì)胞浸潤、增生(圖4A)，肺臟肺泡壁毛細(xì)血管充血，肺泡腔內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤(圖4B)；人工感染小鼠肺臟肺泡腔內(nèi)充滿滲出物，出現(xiàn)肺泡性肺氣腫(圖4C)，肺臟血管管腔充血，淋巴細(xì)胞增生，肺泡周圍炎性細(xì)胞浸潤(圖4D)。3結(jié)論與討論牛羊呼吸道感染疾病日漸普遍，，僅在美
【作者單位】： 石河子大學(xué)動物科技學(xué)院;新疆農(nóng)墾科學(xué)院省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國家重點實驗室;
【基金】：省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國家重點實驗室優(yōu)秀中青年人才培養(yǎng)引導(dǎo)計劃專項項目(No.SKLGIH2016A02) 兵團(tuán)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技攻關(guān)與成果轉(zhuǎn)化計劃項目(No.2016AC018)~~
【分類號】：S858.26

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本文編號：2531927