【摘要】：本研究通過建立犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)感染BALB/c小鼠模型,探索新發(fā)現(xiàn)的甲流重組CIVs對小鼠的致病性。我們采用9株H1N1和1株H3N2甲流重組CIVs,以106 TCID_(50)/mL的劑量滴鼻攻毒10組小鼠。結(jié)果表明:感染后4 d小鼠體重均有一定程度的下降,其中A/Canine/Guangxi/LZ56/2015(H1N1)(簡稱LZ56)組的小鼠體重下降最為明顯(P0.5),其存活率為77.78%;通過TCID_(50)測定發(fā)現(xiàn)10株甲流重組CIVs均能在小鼠的鼻竇和肺臟復制,以LZ56組的復制滴度最高,分別達到107.3 TCID_(50)/mL和10~(5.3) TCID_(50)/mL;肺臟病理切片觀察發(fā)現(xiàn)LZ36、LZ45、LZ56和QZ5組出現(xiàn)不同程度病變,以支氣管上皮細胞壞死脫落,肺泡壁增厚,肺泡腔以及支氣管內(nèi)有大量的彌漫性浸潤的單核細胞為主要特征。結(jié)果表明,新型重組CIVs均能感染BALB/c小鼠,并能在小鼠體內(nèi)較好復制,甚至致死,一旦這些新型CIVs以犬為中間宿主傳播給人,勢必對人類健康構(gòu)成重大威脅。因此,加強對CIVs的監(jiān)測將為防控人流感大暴發(fā)提供提前預警。
【圖文】：

·34·中國動物傳染病學報2017年12月LZ36LZ20LZ52LZ45LZ56QZ5WZ1WZ2LZ317NNTW15Control01234567891011121314重體%)(時間(d)1201101009080圖1小鼠體重變化圖Fig.1BodyweightofthemiceinfectedwithdifferentCIVs2.2攻毒后小鼠存活率通過14d的體重監(jiān)測，結(jié)果只有LZ56組的重組H1N1亞型毒株均在攻毒后6d和攻毒后7d致死小鼠，其存活率為77.78%，其他組的毒株均未能致死小鼠，其存活率為100%（圖2）。2.3小鼠攻毒后病毒在呼吸道的復制情況采用TCID50方法，對10組小鼠各個臟器中病毒進行滴定，我們發(fā)現(xiàn)這些重組病毒均能在肺臟和上鼻竇復制，平均病毒滴度≥103.7TCID50/mL，其中LZ56組在肺臟的復制能力較好，感染后3d和5d分別達到106.0TCID50/mL和106.1TCID50/mL。此外LZ45組相比其他組的肺臟復制較差，感染后5d的病毒滴度僅有103.7TCID50/mL。相對應的是，上鼻竇病毒滴度分別為104.5TCID50/mL和104.9TCID50/mL。結(jié)果表明這些重組H1N1和H3N2亞型CIVs能較好地適應在哺乳動物體內(nèi)的復制，甚至具有潛在的傳播能力（圖3）。2.4小鼠肺臟病理變化我們采用HE染色觀察小鼠肺臟損傷程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有CIVs重組病毒都可以造成肺臟不同程度的病變，其中以LZ36、LZ45、QZ5和LZ56組小鼠肺臟損傷較為嚴重，主要以支氣管壞死脫落、肺泡壁增厚、肺泡腔以及支氣管內(nèi)有大量的彌漫性浸潤的單核細胞為主。對照組肺泡均勻，無萎縮或擴張，無充血或炎細胞浸潤（HE染色-藍紫色，圖中黑色箭頭所指）、巨噬細胞（HE染色-紅色，圖中藍色箭頭所指），見圖4。毒株Strains簡稱Abbreviation基因片段GenesegmentsPB2PB1PAHANPNAMNSA/Canine/Guangxi/LZ317/2013(

·34·中國動物傳染病學報2017年12月LZ36LZ20LZ52LZ45LZ56QZ5WZ1WZ2LZ317NNTW15Control01234567891011121314重體%)(時間(d)1201101009080圖1小鼠體重變化圖Fig.1BodyweightofthemiceinfectedwithdifferentCIVs2.2攻毒后小鼠存活率通過14d的體重監(jiān)測，結(jié)果只有LZ56組的重組H1N1亞型毒株均在攻毒后6d和攻毒后7d致死小鼠，其存活率為77.78%，其他組的毒株均未能致死小鼠，其存活率為100%（圖2）。2.3小鼠攻毒后病毒在呼吸道的復制情況采用TCID50方法，對10組小鼠各個臟器中病毒進行滴定，我們發(fā)現(xiàn)這些重組病毒均能在肺臟和上鼻竇復制，平均病毒滴度≥103.7TCID50/mL，其中LZ56組在肺臟的復制能力較好，感染后3d和5d分別達到106.0TCID50/mL和106.1TCID50/mL。此外LZ45組相比其他組的肺臟復制較差，感染后5d的病毒滴度僅有103.7TCID50/mL。相對應的是，，上鼻竇病毒滴度分別為104.5TCID50/mL和104.9TCID50/mL。結(jié)果表明這些重組H1N1和H3N2亞型CIVs能較好地適應在哺乳動物體內(nèi)的復制，甚至具有潛在的傳播能力（圖3）。2.4小鼠肺臟病理變化我們采用HE染色觀察小鼠肺臟損傷程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有CIVs重組病毒都可以造成肺臟不同程度的病變，其中以LZ36、LZ45、QZ5和LZ56組小鼠肺臟損傷較為嚴重，主要以支氣管壞死脫落、肺泡壁增厚、肺泡腔以及支氣管內(nèi)有大量的彌漫性浸潤的單核細胞為主。對照組肺泡均勻，無萎縮或擴張，無充血或炎細胞浸潤（HE染色-藍紫色，圖中黑色箭頭所指）、巨噬細胞（HE染色-紅色，圖中藍色箭頭所指），見圖4。毒株Strains簡稱Abbreviation基因片段GenesegmentsPB2PB1PAHANPNAMNSA/Canine/Guangxi/LZ317/2013(
【作者單位】： 廣西大學動物科學技術學院;南寧市華波寵物醫(yī)院;山東省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所;
【基金】：廣西自然科學基金回國項目(2015GXNSFCA139002);廣西自然科學基金青年基金項目(2016GXNSFBA380219) 廣西大學博士啟動項目(XBZ160123) 山東省博士基金(BS2013SW022)
【分類號】：S855.3

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本文編號：2530761