【摘要】：IV人工授精技術(shù)能夠降低豬養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)成本,從而提高經(jīng)濟(jì)效益,還可以通過推廣優(yōu)秀種公豬精液,加速品種改良。而精液的保存水平則是關(guān)乎人工授精技術(shù)效果的重要環(huán)節(jié)。目前,應(yīng)用廣泛的豬精液保存方法為常溫保存法,為了更好的提高種公豬利用效率,推動(dòng)人工授精技術(shù)的發(fā)展,豬精液的稀釋保存也就成了最關(guān)鍵的技術(shù)。本實(shí)驗(yàn)主要研究藥物靚精添加至精液稀釋液中對(duì)于精子受精能力等指標(biāo)的影響,但首先需要觀察靚精對(duì)卵母細(xì)胞的影響,所以在卵母細(xì)胞成熟液M199中添加0.5%、0.75%、1%三種不同濃度的靚精,將卵母細(xì)胞成熟培養(yǎng)1h后換至正常培養(yǎng)液中,最終與空白對(duì)照組進(jìn)行成熟率比較,結(jié)果通過DAPI染色發(fā)現(xiàn),三種濃度的靚精對(duì)豬卵母細(xì)胞的成熟均無(wú)不良影響;接著對(duì)經(jīng)過含三種不同濃度靚精的成熟培養(yǎng)液培養(yǎng)成熟的卵母細(xì)胞和空白對(duì)照組的卵母細(xì)胞進(jìn)行孤雌,比較卵裂率和囊胚率,結(jié)果發(fā)現(xiàn)卵母細(xì)胞成熟期間添加不同濃度的靚精不會(huì)影響卵母細(xì)胞孤雌后的胚胎發(fā)育能力,隨后又通過囊胚TUNEL凋亡染色,發(fā)現(xiàn)囊胚總細(xì)胞數(shù)和凋亡細(xì)胞數(shù)在四組間也沒有顯著差異,進(jìn)一步說明卵母細(xì)胞成熟期間添加靚精不會(huì)影響卵母細(xì)胞的后續(xù)胚胎發(fā)育能力。之后在孤雌后的胚胎培養(yǎng)液PZM-3中加入相同的三種濃度的靚精,培養(yǎng)4h后全部換至正常胚胎培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),與空白對(duì)照組比較卵裂率、囊胚率以及染色后計(jì)算出的囊胚總細(xì)胞數(shù)和凋亡細(xì)胞數(shù),結(jié)果顯示卵裂率、囊胚率、囊胚總細(xì)胞數(shù)和凋亡細(xì)胞數(shù)在四組間都沒有顯著差異,說明胚胎在發(fā)育期間接觸這三種濃度的靚精不會(huì)影響胚胎的發(fā)育能力。添加相同的三種濃度靚精至精液稀釋液中,使用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)(CASA)檢測(cè)經(jīng)精液稀釋液稀釋后的精液的活率、A級(jí)+B級(jí)精子比例、直線運(yùn)動(dòng)精子活率、精子平均直線運(yùn)動(dòng)速度(VSL)、精子平均側(cè)擺幅度(ALH)、精子運(yùn)動(dòng)直線性(LIN)、精子運(yùn)動(dòng)擺動(dòng)性(WOB)、精子運(yùn)動(dòng)前向性(STR)等指標(biāo)。分析后發(fā)現(xiàn)在30 h時(shí)0.75%組的直線運(yùn)動(dòng)精子活率顯著高于1%組,而與其他兩組間無(wú)顯著差異。42 h時(shí)0.75%組的精子活率顯著高于對(duì)照組,而與0.5%及1%兩組間沒有顯著差異;并且0.75%組的A+B級(jí)精子比例顯著高于對(duì)照組和0.5%組;而0.75%組的直線運(yùn)動(dòng)精子活率顯著高于其他三組。同時(shí)通過多因素方差分析和精子各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)隨時(shí)間變化的折線圖發(fā)現(xiàn)隨著存儲(chǔ)時(shí)間的延長(zhǎng)靚精添加濃度為0.75%的精子指標(biāo)如精子活率、A級(jí)和B級(jí)精子的比例、直線運(yùn)動(dòng)精子活率、精子平均直線運(yùn)動(dòng)速度(VSL)、精子平均側(cè)擺幅度(ALH)、精子運(yùn)動(dòng)直線性(LIN)、精子運(yùn)動(dòng)前向性(STR)等的變化幅度都比其他三組的相對(duì)應(yīng)指標(biāo)的變化幅度小,綜合這些結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)含0.75%濃度靚精的精液稀釋液對(duì)于保存一定時(shí)間的精液的效果更佳。使用含0.5%、0.75%和1%三種濃度靚精的精液稀釋液稀釋的精液和正常稀釋液稀釋的精液進(jìn)行體外受精,發(fā)現(xiàn)無(wú)論是卵裂率、囊胚率還是囊胚總細(xì)胞數(shù)、凋亡細(xì)胞數(shù),在四組間均無(wú)顯著差異,這一結(jié)果與精子數(shù)據(jù)結(jié)合說明含0.75%靚精的精液稀釋液能夠維持保存一定時(shí)間的精液的運(yùn)動(dòng)能力和活率,但是沒有提高體外受精的效果,而對(duì)于人工授精技術(shù)的效果影響仍需進(jìn)一步研究。
【圖文】：

合和滲透透明帶的原理圖。無(wú)運(yùn)動(dòng)能力精子（a）和未發(fā)生頂體反應(yīng)的精透明帶上，只有有運(yùn)動(dòng)能力且發(fā)生頂體反應(yīng)的精子（c）和發(fā)生部分頂體反和透明帶表面的最初的受體（pZP3-α）結(jié)合，，接著完成反應(yīng)（d’），然后滲精子進(jìn)入后卵母細(xì)胞發(fā)生皮質(zhì)反應(yīng)和透明帶反應(yīng)。發(fā)生透明帶反應(yīng)的卵母子的滲透（e）[69]。

聚維酮碘的化學(xué)結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S828

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 霍秀香;豬精液稀釋液配方篩選與保存方法試驗(yàn)[J];遼寧畜牧獸醫(yī);1994年02期

2 李繼昌,叢霞,符春艷,肖印宇,金龍女;聚維酮碘消毒劑的急性毒性試驗(yàn)[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);1998年05期

本文編號(hào)：2528791