【摘要】：2015年春,山東滕州某規(guī)�；驁鲂律嵫虺霈F(xiàn)嚴重的腹瀉,并且部分羔羊死亡。對該羊場病死羔羊進行剖檢后,共分離到4株細菌(分別命名為PM1、PM2、PM3、PM4)。對所分離的細菌進行形態(tài)特征、生化試驗以及16S rDNA遺傳分析,判定該4株菌均為奇異變形桿菌。16SrDNA系統(tǒng)發(fā)育及同源性分析顯示:4株分離菌與其他11株奇異變形桿菌的同源性為99%以上,其中與中國Hu株、馬來西亞PPB3株以及印度BAB-199株位于同一個分支上,且與中國的Hu株的進化關系最近;4株分離菌之間的同源性為100%,判斷為同1株菌。細菌生長曲線、藥敏試驗、毒力試驗、毒素測定試驗以及游散行為分析結果表明,該分離菌于14h左右達到生長穩(wěn)定期,且對環(huán)丙沙星、左氟沙星最為敏感;對小鼠有強致病性,分離菌培養(yǎng)液的無菌濾液對小鼠無毒性作用;在含0.5%瓊脂的LB平板上遷徙速度最快,且在含瓊脂1.5%和2.0%的LB平板上呈圓環(huán)樣周期運動。該研究結果為羊奇異變形桿菌病的防控提供了基礎。
【圖文】：

圖１分離菌在不同培養(yǎng)基上菌落形態(tài)Ａ．鮮血瓊脂平板；Ｂ．ＬＢ瓊脂平板；Ｃ．麥康凱瓊脂平板；Ｄ．ＳＳ瓊脂平板圖２４株分離菌革蘭染色鏡檢形態(tài)（１０×１００）Ａ．ＰＭ１株；Ｂ．ＰＭ２株；Ｃ．ＰＭ３株；Ｄ．ＰＭ４株２．２分離菌生化鑒定結果如表２所示，４株分離菌生化試驗鑒定結果一致，其中ＴＳＩ反應陽性（三糖鐵斜面中部和上部呈現(xiàn)淡紅色，底部黑色），表明該分離菌能夠分解葡萄糖，產(chǎn)酸、產(chǎn)氣并生成Ｈ２Ｓ；明膠液化試驗、衛(wèi)矛醇、間肌醇、山梨醇、阿拉伯糖、棉籽糖、鼠李糖反應均為陰性，符合變形桿菌屬的生化特性；屬內(nèi)特異性鑒別結果顯示，吲哚試驗、ＶＰ、麥芽糖發(fā)酵產(chǎn)氣試驗、水楊苷發(fā)酵產(chǎn)酸試驗、七葉苷水解產(chǎn)酸試驗反應為陰性，鳥氨酸脫羧酶試驗、木糖發(fā)酵試驗反應為陽性，符合奇異變形桿菌屬的生化特性［１８］。綜合分離菌的培養(yǎng)特性、菌落特點、革蘭染色及生化鑒定結果，初步判斷４株分離菌為奇異變形桿菌。２．３１６ＳｒＤＮＡ基因序列測定與系統(tǒng)發(fā)育分析分別提�。粗攴蛛x菌的基因組ＤＮＡ，并擴增其１６ＳｒＤＮＡ序列�；驕y序結果顯示，，該４株分離菌的１６ＳｒＤＮＡ序列同源性為１００％，因此判斷該４株分１２７７中國獸醫(yī)學報２０１７年７月第３７卷第７期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪｕｌ．２０１７Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．７

鹽酸鹽利用＋＋＋＋鳥氨酸脫羧酶＋＋＋＋麥芽糖發(fā)酵產(chǎn)氣－－－－七葉苷水解產(chǎn)酸－－－－楊苷發(fā)酵產(chǎn)酸－－－－木糖發(fā)酵＋＋＋＋鼠李糖－－－－棉子糖－－－－阿拉伯糖－－－－衛(wèi)矛醇－－－－甘露醇＋＋＋＋山梨醇＋＋＋＋肌醇－－－－注：１．“＋”為陽性反應；２．“－”為陰性反應；３．ａ示ＴＳＩ（三糖鐵培養(yǎng)基）上反應情況Ｋ／Ａ＝斜面／底面；４．Ａ示產(chǎn)酸（黃色）；５．Ｋ示產(chǎn)堿（紅色）；６．＋；＋示產(chǎn)Ｈ２Ｓ氣體圖３分離菌株１６ＳｒＤＮＡ基因系統(tǒng)發(fā)育進化樹及同源性分析Ａ．１６ＳｒＤＮＡ基因系統(tǒng)發(fā)育進化樹結果；Ｂ．同源性分析結果圖４ＰＭ１分離株生長曲線圖１２７８中國獸醫(yī)學報２０１７年７月第３７卷第７期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪｕｌ．２０１７Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．７
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院/山東省動物生物技術與疫病防治重點實驗室;山東省動物疫病預防與控制中心;
【基金】：國家重點研發(fā)計劃子課題“牛羊重要疫病診斷與檢測新技術研究資助項目”(2016YFD0500900) 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設經(jīng)費資助項目(SDAIT-10-06)
【分類號】：S858.26

【參考文獻】

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本文編號：2527919