【摘要】：以雞巨噬細(xì)胞HD11作為研究對象,分別采用5種不同的脂質(zhì)體試劑轉(zhuǎn)染和電轉(zhuǎn)方法將含有綠色熒光蛋白(GFP)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入HD11細(xì)胞中,然后通過比較并篩選出適合雞巨噬細(xì)胞HD11的最佳轉(zhuǎn)染方法。結(jié)果顯示:Lipofectamine 2000 Reagent、Attractene Transfection Reagent和Trans IT湟-2020 Transfection Reagent幾種常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑并不適用于HD11細(xì)胞轉(zhuǎn)染。而Coming Transfection Reagent、Lip2000 Transfection Reagent脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和電轉(zhuǎn)可用于HD11細(xì)胞轉(zhuǎn)染;其中,Lip2000 Transfection Reagent轉(zhuǎn)染試劑效果最好。在此基礎(chǔ)上,通過進(jìn)一步優(yōu)化得出:當(dāng)DNA(μg)和Lip2000(μL)的比例為1∶1.5時轉(zhuǎn)染效率最高。本研究成功篩選出一種有效的雞巨噬細(xì)胞HD11轉(zhuǎn)染方法,為雞巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)染及其相關(guān)研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:Chicken macrophage HD11 was used as the research object. The plasmid containing green fluorescent protein (GFP) was transferred into HD11 cells by five different Liposome reagents and electrotransfer methods, and then the best method of HD11 transfer suitable for chicken macrophage HD11 was selected by comparison and screening. The results showed that Lipofectamine 2000 Reagent,Attractene Transfection Reagent and Trans IT Huang-2020 Transfection Reagent were not suitable for HD11 cell transfer. Coming Transfection Reagent,Lip2000 Transfection Reagent liposomes and electrotransfer can be used in HD11 cells, among which Lip2000 Transfection Reagent has the best effect. On this basis, it is concluded that when the ratio of DNA (渭 g) to Lip2000 (渭 L) is 1: 1.5, the transfer efficiency is the highest. In this study, an effective method of HD11 transfer of chicken macrophages was successfully screened, which provided an experimental basis for the transfer of chicken macrophages and its related research.
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)表觀遺傳學(xué)及表觀基因組學(xué)研究所;揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)和技術(shù)學(xué)院;揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重大研究計(jì)劃(91540117);國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81372237);國家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(31602032) 江蘇省畜牧學(xué)優(yōu)勢學(xué)科項(xiàng)目
【分類號】：S852.4

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