【摘要】：為了研究豬多殺性巴氏桿菌IbeB重組蛋白(rIbeB)的免疫保護(hù)性,根據(jù)GenBank中登錄的多殺性巴氏桿菌ibeB基因序列設(shè)計(jì)1對(duì)引物擴(kuò)增ibeB基因,并重組至pET-28a(+)構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET-ibeB,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(D E3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)獲得rIbeB。生物信息學(xué)分析表明,豬多殺性巴氏桿菌ibeB基因長(zhǎng)1 392 bp,編碼蛋白質(zhì)含463個(gè)氨基酸。該蛋白質(zhì)的理論分子質(zhì)量為51.98 ku,具有2個(gè)外排蛋白結(jié)構(gòu)域,屬外膜外排蛋白超家族。蛋白序列比對(duì)發(fā)現(xiàn),不同血清型的多殺性巴氏桿菌IbeB的同源性達(dá)99%以上。rIbeB誘導(dǎo)小鼠的免疫保護(hù)結(jié)果表明,第3次免疫后第14天小鼠血清中IgG抗體水平顯著升高,明顯高于佐劑對(duì)照組。攻毒后,對(duì)照組小鼠第3天的存活率為20%,7 d后全部死亡;免疫組第3天的存活率達(dá)70%,第7天的存活率為40%。結(jié)果表明,rIbeB蛋白具有很好的免疫原性,可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生部分免疫保護(hù)力。
[Abstract]:In order to study the immune protection of recombinant protein (rIbeB) of Pasteurella multocida IbeB, a pair of primers were designed to amplify ibeB gene according to the sequence of ibeB gene of Pasteurella multocida registered in GenBank, and the recombinant expression plasmid pET-ibeB, was constructed and transformed into E. coli BL21 (D E3). RIbeB. was induced by IPTG. Bioinformatics analysis showed that the 1392 bp, encoded protein of Pasteurella multocida ibeB gene contained 463amino acids. The theoretical molecular weight of the protein is 51.98 ku, which has two exocrine protein domains and belongs to the outer membrane exocrine superfamily. Protein sequence alignment showed that the homology of different serotypes of Pasteurella multocida IbeB was more than 99%. The immune protection results of mice induced by rIbeB showed that the level of IgG antibody in serum of mice increased significantly on the 14th day after the third immunization, which was significantly higher than that of the adjuvant control group. After challenge, the survival rate of the control group was 20% on the 3rd day and all died on the 7th day, and the survival rate of the immunized group was 70% on the 3rd day and 40% on the 7th day. The results showed that rIbeB protein had good immunogenicity and could induce partial immune protection in mice.
【作者單位】： 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【基金】：湖南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(14JJ4077)
【分類號(hào)】：S852.612

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本文編號(hào)：2500574