【摘要】：目的：為深入研究動物紅細(xì)胞免疫粘附功能的分子基礎(chǔ),本試驗(yàn)以豬紅細(xì)胞為研究對象設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),對豬紅細(xì)胞免疫粘附受體進(jìn)行鑒定分析,以期為課題組后期試驗(yàn)提供理論數(shù)據(jù)。方法：運(yùn)用熒光細(xì)胞化學(xué)法檢測豬CR1-like分子；運(yùn)用豬細(xì)胞免疫粘附新鮮血清或EDTA血清致敏的GFP-E.coli和乳膠顆粒復(fù)合物,及抗豬CR1-like單抗阻斷免疫粘附的方法驗(yàn)證豬紅細(xì)胞免疫粘附分子CR1-Like的存在；采用免疫共沉淀的方法純化豬CR1-like抗原,利用還原和非還原SDS-PAGE電泳及WB實(shí)驗(yàn),得出豬紅細(xì)胞CR1-Like的分子大小及二硫鍵數(shù)量。結(jié)果：熒光細(xì)胞化學(xué)法檢測豬CR1-like分子實(shí)驗(yàn)可觀察到豬紅細(xì)胞與抗豬CR1-like McAb及Goat anti-mouse IgG-FITC發(fā)生免疫反應(yīng)；在熒光顯微鏡下觀察到,豬紅細(xì)胞可以粘附新鮮血清致敏的GFP-E.coli;豬紅細(xì)胞不粘附EDTA血清致敏和未致敏的GFP-E.coli;抗豬CR1-like單抗預(yù)孵育豬紅細(xì)胞不粘附致敏的GFP-E. coli;同型抗體預(yù)孵育豬紅細(xì)胞粘附致敏的GFP-E.coli。豬紅細(xì)胞免疫粘附致敏乳膠顆粒及單抗阻斷免疫粘附結(jié)果同GFP-E.coli實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。免疫共沉淀洗脫目的蛋白SDS-PAGE電泳及WB實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,豬紅細(xì)胞CR1-like以135KD和200KD兩種形式存在,CR1-like分子內(nèi)部含有2或3個二硫鍵,二硫鍵斷裂后裂解為70KD、50KD、15KD三種支鏈蛋白,其中以50KD和15KD的支鏈蛋白發(fā)揮免疫反應(yīng)。結(jié)論：豬紅細(xì)胞表面存在起免疫粘附作用的CR1-like分子；豬紅細(xì)胞表面CR1-like以135KD和200KD兩種形式存在,在還原條件下,CR1-like裂解為70KD、50KD、15KD三種小分子蛋白,CRl-like分子內(nèi)部含有2或3個二硫鍵,在免疫反應(yīng)中主要以50KD和15KD兩個支鏈蛋白發(fā)揮作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2493650