【摘要】：為建立一種簡(jiǎn)單、快速的豬流行性腹瀉病毒(PEDV)分子檢測(cè)方法,本研究基于PEDV病毒M基因保守序列,設(shè)計(jì)一系列擴(kuò)增引物及其熒光探針,以包含PEDV病毒M基因片段的pUC57質(zhì)粒為模板,同時(shí)以包含豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)及古典豬瘟病毒(CSFV)等病毒膜蛋白或核衣殼蛋白基因序列的質(zhì)粒作為對(duì)照,建立了一種PEDV實(shí)時(shí)熒光重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)等溫檢測(cè)方法,測(cè)定了方法的特異性與敏感性。結(jié)果表明,該實(shí)時(shí)熒光RPA方法可在39℃恒溫反應(yīng)20min特異性擴(kuò)增PEDV病毒M基因,與TGEV、PRRSV等對(duì)照病毒基因無(wú)交叉反應(yīng),其檢測(cè)限為10拷貝/μL。應(yīng)用該實(shí)時(shí)熒光RPA方法可有效檢測(cè)出血漿及血漿蛋白粉中的PEDV核酸。本研究建立的實(shí)時(shí)熒光RPA檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高,可為PEDV的檢測(cè)防控提供一種新的、可靠的技術(shù)支持。
[Abstract]:......
【作者單位】： 中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院動(dòng)物檢疫研究所;
【基金】：國(guó)家質(zhì)檢總局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015IK309) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(2013BAD12B01)
【分類(lèi)號(hào)】：S852.651

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4 李R，

本文編號(hào)：2485138