【摘要】：本研究旨在建立一種同時(shí)檢測(cè)豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)和豬圓環(huán)病毒3型(PCV3)的雙重納米PCR(nanodPCR)方法,同時(shí)應(yīng)用該方法對(duì)PCV2和PCV3進(jìn)行檢測(cè)。參考GenBank中登錄的PCV2和PCV3型基因序列分別設(shè)計(jì)特異性引物,對(duì)nano-dPCR的反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化;同時(shí)考察所建立的nano-dPCR檢測(cè)方法的特異性和敏感性。結(jié)果顯示,所建方法的特異性和敏感性良好,對(duì)PCV2和PCV3兩種病毒的最低核酸檢測(cè)量分別為93.2和91.6拷貝/μL,其敏感性比普通PCR高100倍。應(yīng)用該方法對(duì)送檢的265份臨床樣本進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,PCV2和PCV3在豬群中存在普遍感染,PCV3和PCV2的陽(yáng)性率分別為16.6%和14.7%,混合感染陽(yáng)性率為6.8%。臨床樣品的檢測(cè)結(jié)果表明,本試驗(yàn)建立的nano-dPCR方法為PCV2和PCV3早期感染進(jìn)行快速、敏感鑒別診斷提供了新方法。
[Abstract]:The purpose of this study was to establish a double nano PCR (nanodPCR) method for simultaneous detection of porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine circovirus type 3 (PCV3), and to detect PCV2 and PCV3 simultaneously. Specific primers were designed to optimize the reaction conditions of nano-dPCR with reference to the PCV2 and PCV3 gene sequences recorded in GenBank, and the specificity and sensitivity of the established nano-dPCR detection method were investigated. The results showed that the specificity and sensitivity of the proposed method were 93.2 and 91.6 copies / 渭 L for PCV2 and PCV3, respectively. The sensitivity of the method was 100 times higher than that of normal PCR. This method was used to detect 265 clinical samples. The results showed that PCV2 and PCV3 were commonly infected in pigs. The positive rates of PCV3 and PCV2 were 16.6% and 14.70.The positive rate of mixed infection was 6.8%. The detection results of clinical samples show that the nano-dPCR method established in this study provides a new method for the rapid and sensitive differential diagnosis of early infection of PCV2 and PCV3.
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所;農(nóng)業(yè)部獸用藥物與診斷技術(shù)北京科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站;青島機(jī)場(chǎng)出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【基金】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(2016ywf-yb-12);中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新工程(ASTIP-IAS15)
【分類(lèi)號(hào)】：S852.651

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本文編號(hào)：2407485