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禽腺病毒4型抗體間接ELISA檢測方法的建立

發(fā)布時間:2019-01-10 12:40
【摘要】:為建立一種快速檢測雞群中禽腺病毒4型(FAd V-4)的血清學(xué)方法,本研究利用純化的FAd V-4中國流行株作為包被抗原,并對各反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化,建立了檢測FAd V-4血清抗體的間接ELISA方法。FAd V-4抗原與抗新城疫病毒、禽流感病毒、傳染性法氏囊病病毒、傳染性支氣管炎病毒、減蛋綜合征病毒陽性血清均無交叉反應(yīng),表明該方法具有較好的特異性;批內(nèi)和批間重復(fù)試驗的最大變異系數(shù)分別為3.735%和4.373%,顯示該方法具有較好的穩(wěn)定性;利用所建立的ELISA方法對40份來自疑似FAd V-4感染病雞的血清樣品進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果與FAd V-4 PCR檢測結(jié)果符合率為100%。對我國河南、山東、安徽、山西和江蘇等不同地區(qū)的676份雞血清樣品進(jìn)行了FAd V-4流行病學(xué)調(diào)查,結(jié)果顯示上述省份均存在不同程度的FAd V-4感染,抗體陽性率在69.3%~89.1%。表明該方法為FAd V-4流行病學(xué)調(diào)查和防控提供了一種快速有效的檢測方法。
[Abstract]:In order to establish a rapid serological method for the detection of avian adenovirus type 4 (FAd V-4) in chickens, the purified FAd V-4 Chinese epidemic strain was used as the coating antigen, and the reaction conditions were optimized. An indirect ELISA method for detection of FAd V-4 antibody was established. FAd V-4 antigen and anti-Newcastle disease virus, avian influenza virus, infectious bursal disease virus, infectious bronchitis virus, No cross reaction was found in the positive sera of egg drop syndrome virus, which indicated that the method had good specificity. The maximum coefficients of variation were 3.735% and 4.3733%, respectively, which showed that the method had good stability. 40 serum samples from suspected FAd V-4 infected chickens were detected by using the established ELISA method. The coincidence rate between the detection results and the FAd V-4 PCR detection results was 100%. FAd V-4 epidemiological investigation was carried out in 676 chicken serum samples from Henan, Shandong, Anhui, Shanxi and Jiangsu provinces in China. The results showed that there were different degrees of FAd V-4 infection in these provinces. The positive rate of antibody was 69. 3% and 89. 1%. This method provides a rapid and effective method for epidemiological investigation and prevention and control of FAd V-4.
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;
【基金】:國家重點研發(fā)計劃(2016YFD0501102、2016YFD0500802) 河南省高?萍紕(chuàng)新團(tuán)隊支持計劃(14IRTSTHN015)
【分類號】:S852.65

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本文編號:2406321

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