【摘要】：2010年,曹貞貞、張大丙首次在我國報(bào)道了坦布蘇病毒感染,該病最初被命名為鴨出血性卵巢炎(DHO),隨著對(duì)該病研究的深入,通過試驗(yàn)證明該病是由一種新型黃病毒引起的,即坦布蘇病毒(Tembusu virus,TMUV)。坦布蘇病毒感染自爆發(fā)以來,迅速波及福建、上海、江蘇、浙江、山東等地區(qū),該病的發(fā)生嚴(yán)重威脅著我國水禽業(yè)的發(fā)展,對(duì)我國養(yǎng)鴨業(yè)產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,已經(jīng)建立的坦布蘇病毒的檢測方法有很多,包括套式RT-PCR、LAMP、ELISA、地高辛、熒光定量RT-PCR等,其中熒光定量RT-PCR方法具有快捷、精確、敏感性高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),在多個(gè)領(lǐng)域都有較廣泛的應(yīng)用。本研究利用熒光定量RT-PCR方法,旨在探索坦布蘇病毒在櫻桃谷雛鴨體內(nèi)的排毒規(guī)律,明確病毒在血液及組織中含量的高峰期和變化趨勢,同時(shí)記錄病鴨發(fā)病情況,確定櫻桃谷雛鴨感染坦布蘇病毒后的潛伏期。為坦布蘇病毒的預(yù)防和控制提供了理論依據(jù)。本試驗(yàn)從疑似感染坦布蘇病毒的病鴨體內(nèi)分離到一株坦布蘇病毒。將110只10日齡健康櫻桃谷雛鴨分為3組,其中,靜脈接種組70只,點(diǎn)眼滴鼻組及自然感染組各20只。經(jīng)靜脈、點(diǎn)眼滴鼻分別接種坦布蘇病毒(TMUV)AHQY株,每只3.5 mL病毒尿囊液(3.11×10-3EID50/只),自然感染組不接種病毒,與靜脈接種組混養(yǎng)。接種后,每隔2 d采集泄殖腔棉拭子和血液,并隨機(jī)剖殺3只,應(yīng)用建立的熒光定量RT-PCR方法檢測病毒的排毒規(guī)律及血液、組織中病毒載量的變化。結(jié)果顯示,分離的病毒經(jīng)RT-PCR檢測及克隆測序證明為坦布蘇病毒。3個(gè)組的櫻桃谷雛鴨感染坦布蘇病毒的潛伏期均一致,平均為24 h,試驗(yàn)鴨在感染24 h后出現(xiàn)精神沉郁,采食量減少,排白綠色及棕色稀便的癥狀。櫻桃谷雛鴨在接種病毒后的1~25 d均可排毒,靜脈組及點(diǎn)眼滴鼻組在感染后5 d出現(xiàn)排毒高峰,其次為11 d和17 d出現(xiàn)兩個(gè)小排毒高峰,自然感染組出現(xiàn)高峰的時(shí)間比靜脈及點(diǎn)眼滴鼻組晚2 d。靜脈接種組病毒在血液內(nèi)的載量較其他兩組明顯低,高峰出現(xiàn)在感染后7 d及19 d,點(diǎn)眼滴鼻組高峰同靜脈接種組一致,出現(xiàn)在感染后7 d及19 d,自然感染組血液中的病毒載量高峰出現(xiàn)在感染后9 d及21 d。組織中坦布蘇病毒載量較高的器官主要有腦、胸腺、法氏囊、胰腺、心臟,其次是脾臟、肝臟、腎臟,腺胃、氣管、肺臟和腸道,病毒的相對(duì)表達(dá)量較少。接種病毒后的1-5 d,胸腺、腦、心臟中坦布蘇病毒的載量自感染后持續(xù)升高至5 d,之后降低,降低至第7 d,然后又升高,并于感染后13 d達(dá)到高峰。法氏囊、胰腺、腸道中病毒載量升高至感染后5 d達(dá)到高峰而后逐漸降低。肝臟、腎臟、脾臟中病毒載量自感染后隨天數(shù)的增加而逐漸升高,并于第13 d達(dá)到高峰后降低。腺胃、氣管、肺臟中的病毒載量自感染后隨天數(shù)的增加而降低,持續(xù)至7 d后升高,于第13 d達(dá)到高峰后降低。研究表明,坦布蘇病毒對(duì)櫻桃谷雛鴨的感染能力較強(qiáng),潛伏期短,病毒可通過泄殖腔向外界排毒,排毒時(shí)間較長,病毒隨血液循環(huán)迅速侵入各組織器官。
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【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S858.32

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2405994