【摘要】：microRNA(miRNA)是一類約22m的內(nèi)源性非編碼單鏈RNA分子,它廣泛存在于病毒、動物和植物等多種生物體中,通過與靶基因3'UTR區(qū)結(jié)合,使得靶mRNA翻譯抑制或降解,從而對基因的表達(dá)起負(fù)性調(diào)節(jié)作用,是基因表達(dá)的重要調(diào)控因子。SCD1是位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的一類催化酶,是肝細(xì)胞合成單不飽和脂肪酸的限速酶,能夠?qū)④浿：陀仓］o酶A分別轉(zhuǎn)化成棕櫚油酸和油酸,這些不飽和脂肪酸是合成各種脂類包括甘油三酯、磷脂、膽固醇、蠟酯以及甘油二酯的重要底物。SCD1在肝臟的脂質(zhì)代謝中,即在脂肪合成與脂肪酸氧化中,都發(fā)揮著舉足輕重的作用,本實(shí)驗(yàn)對朗德鵝肝臟SCD1基因的表達(dá)及其調(diào)控1niRNA進(jìn)行篩選研究。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)填飼過程中,朗德鵝的肝臟重量和肝體比隨著填飼時(shí)間的延長逐漸增加,70日齡(填飼0天)時(shí)肝臟的平均重量為124.5g,89日齡(填飼19天)時(shí)肝臟平均重量上升為826.6g;70日齡時(shí)平均肝體比為3.21%,89日齡時(shí),平均肝體比達(dá)10.30%。本實(shí)驗(yàn)采用熒光定量PCR測定朗德鵝SCD1基因在填飼各階段和對照組各階段表達(dá)量變化趨勢,結(jié)果顯示填飼組各階段表達(dá)量均高于對照組,且填飼19天(89日齡)時(shí),填飼組表達(dá)量極顯著高于對照組；測定填飼組各時(shí)期棕櫚油酸、油酸、甘油三酯和膽固醇含量,并分析填飼組各階段SCD1基因與各指標(biāo)之間的相關(guān)性,SCD1基因表達(dá)量與油酸、膽固醇、VLDL極顯著正相關(guān)(P0.01),與甘油三酯含量顯著正相關(guān)(P0.05)。(2)通過軟件預(yù)測結(jié)合前期小RNA測序結(jié)果,篩選出調(diào)控鵝SCD1基因的]miRNA為miR-30b, miR-30a-5p和miR-10b,利用SYBR Green染料法熒光定量PCR測定各miRNA在填飼組各時(shí)期與對照組各時(shí)期表達(dá)量變化情況,對照組表達(dá)量均高于填飼組,與SCD1基因的表達(dá)變化情況相反。(3)從朗德鵝中擴(kuò)增出鵝miR-30b和]miR-30a-5p前體序列,經(jīng)測序,與雞的miR-30b和miR-30a-5p前體同源性都達(dá)到100%。利用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)在CHO細(xì)胞系中驗(yàn)證所篩選的3個(gè)miRNA,結(jié)果顯示miR30b與miR-30a-5p為調(diào)控鵝SCD1基因的miRNA。揭示miR-30b和miR-30a-5p可能通過對SCD1基因的調(diào)節(jié)作用影響鵝肝臟脂代謝過程。
[Abstract]:MicroRNA (miRNA) is a class of endogenous non-coding single-stranded RNA molecules of about 22m. It widely exists in many organisms, such as viruses, animals and plants. By binding to the target gene 3'UTR region, target mRNA translation is inhibited or degraded. SCD1 is a kind of catalytic enzyme located in the endoplasmic reticulum and a rate-limiting enzyme for the synthesis of monounsaturated fatty acids in hepatocytes. They are capable of converting palmitic acid and stearyl coenzyme A into palmitic acid and oleic acid, respectively. These unsaturated fatty acids synthesize a variety of lipids, including triglycerides, phospholipids, cholesterol, SCD1 plays an important role in the lipid metabolism of the liver, that is, in fat synthesis and fatty acid oxidation. The aim of this study was to screen the expression of SCD1 gene and its regulation of 1niRNA in the liver of Landau Goose. The main results were as follows: (1) the liver weight and liver body ratio of Landes geese increased gradually with the prolongation of feeding time, and the average weight of liver was 124.5 g at 70 days of age (feeding 0 days). The average weight of liver increased to 826.6g at 89 days of age (19 days of feeding). At the age of 70 days, the average body weight ratio was 3.21% and the average body weight ratio was 10.30% at the age of 89 days. In this experiment, fluorescence quantitative PCR was used to determine the change trend of SCD1 gene expression in all stages of feeding and control groups. The results showed that the expression of SCD1 gene in the feeding group was higher than that in the control group, and at the age of 19 days (89 days), the expression level of the SCD1 gene in the feeding group was higher than that in the control group. The expression level in the feeding group was significantly higher than that in the control group. The contents of palmitic oil acid, triglyceride and cholesterol in each stage of feeding group were measured, and the correlation between SCD1 gene and indexes in each stage of feeding group was analyzed. The expression of SCD1 gene was positively correlated with oleic acid, cholesterol and VLDL (P0.01). There was a significant positive correlation between triglyceride content and triglyceride content (P0.05). (2). By software prediction and sequencing results of small RNA in the early stage, the miRNA of goose SCD1 gene was selected to be miR-30b, miR-30a-5p and miR-10b,. SYBR Green dye fluorescence quantitative PCR was used to determine the changes of miRNA expression in each stage of feeding group and control group. The expression of miRNA in control group was higher than that in feeding group. Contrary to the change of SCD1 gene expression. (3) goose miR-30b and] miR-30a-5p precursor sequences were amplified from Langde geese, and the homology with miR-30b and miR-30a-5p precursors was 100%. Using the double luciferase report system to verify the three miRNA, screened in CHO cell line, the results show that miR30b and miR-30a-5p are the miRNA. to regulate the SCD1 gene of goose. It was suggested that miR-30b and miR-30a-5p might influence the lipid metabolism of goose liver by regulating the SCD1 gene.
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S835

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 崔大同 ,趙素娥;新型填飼機(jī)的研制與填飼效果[J];中國畜牧雜志;1983年06期

2 陳澤;;用人工填飼法育肥鵝[J];農(nóng)業(yè)知識;2002年01期

3 張仲華;許靜初;陳耀王;;9DJ—82A型鴨鵝填飼機(jī)[J];農(nóng)業(yè)科技通訊;1983年05期

4 周磊;曾秋鳳;張克英;呂剛;;填飼能量相同時(shí)不同油脂對肉鴨肥肝質(zhì)量的影響[J];動物營養(yǎng)學(xué)報(bào);2010年06期

5 許立;;肥肝鴨或鵝的預(yù)填飼[J];當(dāng)代畜牧;1984年03期

6 鄧惠宗;雛鵝育肥新方法[J];四川畜禽;1996年07期

7 卓金亮;秋冬季節(jié)鴨填飼育肥技術(shù)[J];中國禽業(yè)導(dǎo)刊;2002年22期

8 王乃富;陳開洋;陳耀王;;中國肥肝鵝填飼機(jī)械和填飼技術(shù)進(jìn)展[J];中國禽業(yè)導(dǎo)刊;2007年09期

9 王繼文;韓春春;李亮;許恒勇;葉建強(qiáng);蔣立;卓偉華;;填飼對鵝肝脂質(zhì)沉積及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J];中國家禽;2008年20期

10 蔣立;;添加動植物性油脂填飼對鴨肥肝性能的差異影響[J];家禽科學(xué);2008年01期

相關(guān)會議論文 前3條

1 陳開洋;王乃富;陳耀王;;鵝鴨強(qiáng)制填飼機(jī)械和填飼技術(shù)的進(jìn)展[A];首屆中國水禽發(fā)展大會會刊——中國水禽業(yè)進(jìn)展[C];2005年

2 王來娣;邵丹;張宜輝;張蕊;洪勝輝;張軍;龔道清;;朗德鵝填飼期肝重及肝臟營養(yǎng)成分的變化規(guī)律研究[A];安全優(yōu)質(zhì)的家禽生產(chǎn)——第十五次全國家禽學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2011年

3 高正根;張志國;李國臣;胡勝強(qiáng);王嶺;閆磊;郝金平;;北京鴨填鴨階段管理要點(diǎn)[A];首屆中國水禽發(fā)展大會會刊——中國水禽業(yè)進(jìn)展[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 中國農(nóng)科院畜牧研究所 劉五岳;朗德鵝填飼期管理技術(shù)[N];河北科技報(bào);2004年

2 滿紅;科學(xué)填鴨需注意[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2014年

3 鄭延平;快速育肥鴨的方法—填飼法[N];云南科技報(bào);2006年

4 鄭延平;迅速育肥鴨的方法—填飼法[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2006年

5 鄭延平;迅速育肥鴨的方法——填飼法[N];陜西科技報(bào);2006年

6 湖北省陽新縣洋港鎮(zhèn)農(nóng)辦 赫裴;鵝的育肥方法[N];陜西科技報(bào);2000年

7 李鐵為;鵝的幾種肥育方法[N];廣東科技報(bào);2003年

8 張安;秋季肉鴨填肥辦法張安[N];河北農(nóng)民報(bào);2009年

9 陳貴善;野鴨的飼養(yǎng)管理技術(shù)[N];云南科技報(bào);2006年

10 鐘魯;秋鴨填喂快速增肥[N];廣東科技報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 劉振春;填飼對鵝肥肝脂肪酸合成酶的表達(dá)及脂肪沉積規(guī)律的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 蔣立;填飼誘導(dǎo)鵝肥肝形成差異及調(diào)控肝極低密度脂蛋白—甘油三酯組裝與分泌相關(guān)基因的表達(dá)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

3 韓春春;不同因素誘導(dǎo)鵝肝細(xì)胞脂肪變性的機(jī)理研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 周磊;油脂種類及其填飼時(shí)間對櫻桃谷肉鴨肥肝生產(chǎn)和品質(zhì)的影響研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 許靜;填飼對鵝肝膽固醇合成相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 朱振鵬;黑羽番鴨的產(chǎn)肝性能及填飼對脂代謝基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)影響的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2014年

4 聞治國;填飼對北京鴨脂肪沉積和營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

5 許恒勇;脂蛋白脂酶（LPL）在填飼鵝脂肪組織中的表達(dá)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 原霞;益生素和酶制劑對肥肝鵝的填飼效應(yīng)[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

7 付曉英;鵝SCD1基因全長cDNA的克隆、組織表達(dá)及填飼對其表達(dá)的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

8 鄺智祥;不同脂肪酸對朗德鵝填飼的效果及脂肪酸合成酶RFLP多態(tài)性與生產(chǎn)性能的相關(guān)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

9 黃曉宇;鵝LXRα基因的序列變異、表達(dá)特性及其在脂質(zhì)代謝中的作用研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

10 孫曉先;鵝肥肝形成過程中調(diào)控SCD1基因的miRNA研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

，

本文編號：2391791