發(fā)布時間：2018-12-24 07:05

【摘要】：為構建豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV2)的感染性克隆及其ORF3缺失的感染性克隆,本研究通過比較分析Gen Bank中8種亞型的PCV2基因組序列(各3株),設計了PCV2基因全長克隆引物,以從江西省萍鄉(xiāng)市某豬場疑似感染斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征病死豬的病料中提取的DNA為模板,利用PCR方法擴增PCV2全長基因序列并進行測序。利用分子生物學軟件對測序結果分析,結果表明所獲得的克隆為PCV2a-2A基因型。采用重疊延伸PCR(SOE-PCR)方法擴增病毒全長基因組DNA,克隆于p SP72載體中構建野生型PCV2a病毒株感染性克隆。此外,采用SOE-PCR方法,缺失野生型PCV2a感染性克隆中的閱讀框3(ORF3),并將這兩種重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染PK15細胞,盲傳6代后經(jīng)PCR和間接免疫熒光方法檢測顯示,構建的PCV2a病毒株與PCV2a-ORF3突變株克隆均具有感染性。本研究為進一步探究ORF3基因?qū)CV2致病機理和免疫原性的影響奠定了基礎。
[Abstract]:In order to construct the infectious clone of porcine circovirus type 鈪，

本文編號：2390309