【摘要】：為了分離得到安淮山羊骨骼肌衛(wèi)星細胞,成功構(gòu)建山羊骨骼肌衛(wèi)星細胞系,為相關(guān)研究提供實驗材料。以安淮山羊背最長肌肌肉組織為材料,采取膠原酶和胰蛋白酶結(jié)合的二步消化法,結(jié)合差速貼壁法純化原代骨骼肌衛(wèi)星細胞。對骨骼肌衛(wèi)星細胞中特異性基因Pax7用免疫熒光染色法及PCR擴增加以鑒定。通過分離、純化,得到純度較高的山羊骨骼肌衛(wèi)星細胞,其形態(tài)為圓形,折光性強。培養(yǎng)一段時間后密度增大,細胞呈梭型。所得骨骼肌衛(wèi)星細胞生長狀態(tài)良好,具有較為一致的生長方式和形態(tài)特點。經(jīng)免疫熒光染色法以及PCR鑒定發(fā)現(xiàn)細胞系中有Pax7基因的表達。通過上述材料和方法,可獲得較純的山羊骨骼肌衛(wèi)星細胞,并穩(wěn)定傳代。
[Abstract]:In order to isolate and obtain Anhuai goat skeletal muscle satellite cells, a goat skeletal muscle satellite cell line was successfully constructed. Using the longissimus dorsi muscle tissue of Anhuai goat as the material, the primary skeletal muscle satellite cells were purified by the two-step digestion method combined with collagenase and trypsin, and the differential adhesion method was used to purify the primary skeletal muscle satellite cells. The specific gene Pax7 in skeletal muscle satellite cells was identified by immunofluorescence staining and PCR amplification. High purity goat skeletal muscle satellite cells were obtained by isolation and purification. After a period of culture, the density of the cells increased and the cells were fusiform. The satellite cells of skeletal muscle are in good growth state and have consistent growth pattern and morphological characteristics. The expression of Pax7 gene was identified by immunofluorescence staining and PCR. Through the above materials and methods, more pure goat skeletal muscle satellite cells can be obtained and subcultured stably.
【作者單位】： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;安徽地方畜禽遺傳資源保護與生物育種省級實驗室;安徽省羊繁育工程技術(shù)研究中心;
【基金】：安徽省自然科學(xué)基金項目(1708085MC61) 安徽省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(2016-2020)共同資助
【分類號】：S827

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本文編號：2383486