【摘要】：動物食品是人類飲食中常見且是最重要的一類食物。這類食物的原料是各種動物身上可食用的肉和組織,經過不同方法不同程度的加工,成為各種各樣的肉類食品。常見的肉類包括豬肉、牛肉、魚肉等。這些肉類食品營養(yǎng)豐富,吸收率高,滋味鮮美,可提供人體所必需的氮基酸、無機鹽、脂肪酸和維生素等物質。近年來人們對于肉類食品的需求在不斷增加,價格也隨之持續(xù)增長。但是,魚類在生長過程中易受到細菌侵襲,水產養(yǎng)殖戶使用孔雀石綠治理寄生蟲、真菌或細菌感染。畜類的生長周期較長,瘦肉率不高。部分養(yǎng)殖專業(yè)戶就使用玉米赤霉醇、β-受體激動劑等藥物,以此來提高瘦肉率,減少脂肪含量,縮短出欄時間。這些藥物通常被添加在飼料中,或者是以耳根埋植的形式用到畜類身上,易造成獸藥物殘留�？兹甘G特別是其代謝產物在水產動物體內有明顯的高殘留及高毒性,可產生三致(致畸、致癌和致突變)等副作用;玉米赤霉醇殘留在體內會引起人體性激素功能紊亂及影響第二性征的正常發(fā)育,在外部因素誘導下,可能會導致癌癥的發(fā)生。玉米赤霉醇排出動物體外后,還可經飲水和食物造成二次污染及環(huán)境污染;β-受體激動劑以超過治療劑量5-10倍的用量用于家畜飼養(yǎng)時,易在動物臟器中積聚殘留,并通過食物鏈進入人體,攝入過量會導致心悸、頭疼、惡心,甚至損害肝腎。為了保護消費者的健康,中國、歐盟等國家都禁止使用這些獸藥。人們評價獸藥已經不再局限于它對肉類食品在經濟上帶來的效益,而更注重于它無損害環(huán)境和健康的社會效益。因此,肉類食品中獸藥殘留的檢測有著極其重要的意義�，F(xiàn)在用于獸藥檢測的方法有HPLC,MS/MS-HPLC,ELISA等,但是這些方法都有一定的不足(例如不能大規(guī)模篩選檢測,成本高等)。由此,多種類獸藥的檢測、低檢測限、大規(guī)模篩選檢測成了發(fā)展的需求,這不僅可以保障肉類食品的質量安全,還可以減少人力、財力、物力的大量損耗等。在本文中,建立了一種高效,快速且靈敏的篩選檢測方法,用于動物食品中獸藥的殘留檢測1。第一部分水產品中孔雀石綠Alpha LISA檢測方法的建立目的:建立孔雀石綠(Malachite green,MG)的光激化學發(fā)光納米均相時間分辨熒光免疫法(Alpha LISA)分析方法。方法:將待測物,生物素化-MG-BSA,抗體加入到孔板中,再加入供體微珠和受體微珠,用Alpha LISA儀檢測。結果:結果表明該方法特異性良好,與無色孔雀石綠,無色結晶紫無交叉反應,靈敏度為0.42 ng/m L,MG在兩種魚樣品中的回收率在81.0%~105.0%和84.0%~90.8%之間,批內RSD9.5%,批間RSD16.0%。結論:MG Alpha LISA方法可以簡單、快速的對魚類進行MG測定,具有特異性強、靈敏度高、穩(wěn)定等特點。第二部分Alpha LISA法檢測肌肉組織中玉米赤霉醇和玉米赤霉烯酮目的:采用均相光致化學發(fā)光免疫分析法(Alpha LISA)檢測肌肉組織樣品中玉米赤霉醇和玉米赤霉烯酮。方法:以豬肉和牛肉為原料,樣品經過乙酸鈉、β-葡萄糖苷酸/硫酸酯復合酶提取,HLB柱凈化,采用Alpha LISA法檢測。結果:該方法顯示出在0.01-4ng/m L范圍內有一個良好的線性關系(R20.99),靈敏度為0.066ng/m L。玉米赤霉醇的交叉反應率為100%,玉米赤霉酮交叉反應率為82.1%,和其它化合物的交叉反應率小于40%。在1-4ng/m L添加水平下,玉米赤霉醇豬肉和牛肉的平均回收率分別為96.3%?105.0%,91.7%~100.5%,RSD17.5%。結論:結果表明,該方法適用于肌肉組織中玉米赤霉醇和玉米赤霉酮的殘留檢測。第三部分豬肉中β-受體激動劑(克倫特羅,沙丁胺醇,溴布特羅,特布他林)Alpha LISA檢測方法的建立目的:建立了快速檢測豬肉中克倫特羅、沙丁胺醇、溴布特羅和特布他林4種β-受體激動劑的光激化學發(fā)光納米均相時間分辨熒光免疫(Alpha LISA)分析方法。方法:以豬肉為原料,樣品經乙酸銨和β-葡萄糖醛酸酶/硫酸酯酶酶解提取過柱,濃縮至干后,用緩沖溶液定容。樣品與生物素化抗原、抗體、供體微珠和受體微珠進行酶聯(lián)免疫,Alpha LISA進行檢測。結果:沙丁胺醇、克倫特羅、溴布特羅和特布他林在0.1~500 ng/m L范圍內呈良好線性,R2均0.98,沙丁胺醇與克倫特羅、溴布特羅和特布他林的交叉反應率分別為143.3%,179.2%和95.6%,靈敏度范圍為0.03~0.08 ng/m L。在0.5,10,20μg/kg 3個添加水平下,4種化合物的平均回收率為82.5%~115.9%,RSD12.0%。結論:該方法操作簡單,快速準確,適用于豬肉中β-受體激動劑的篩選與檢測。
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【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S859.84

【參考文獻】

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本文編號：2345210