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奶山羊乳房炎病原菌分離鑒定及多重PCR檢測方法建立

發(fā)布時間:2018-11-16 12:59
【摘要】:奶山羊乳房炎是奶山羊養(yǎng)殖業(yè)中較為常見且危害巨大的疾病之一,它不僅給養(yǎng)殖者造成嚴重的經(jīng)濟損失,同時也威脅著羊奶及其相關奶產(chǎn)品消費者的健康,造成食品安全隱患。奶山羊乳房炎病因復雜,與病原微生物、動物自身、飼養(yǎng)管理等都有很大的關系。病原微生物種類繁多且存在較大的地域差異,給該病的診治帶來了極大的困難。目前,我國尚沒有可以快速、準確診斷奶山羊乳房炎并且對病原微生物做出精確定位的診斷方法,本次研究主要針對陜西部分地區(qū)奶山羊乳房炎進行研究,以期能夠為奶山羊乳房炎的診斷、治療提供一定的理論依據(jù)。本次試驗從陜西省富平縣、隴縣兩個地區(qū)隨機選取的11個養(yǎng)殖場采取的55份臨床型奶山羊乳房炎乳樣進行病原菌分離鑒定,針對主要病原菌進行藥敏試驗、建立多重PCR檢測方法。研究結(jié)果如下:1.分離得到形態(tài)各異的奶山羊乳房炎病原菌8種54株,其中大腸桿菌18株、金黃色葡萄球菌14株、蠟狀芽孢桿菌7株、綠膿桿菌6株、無乳鏈球菌4株、凝固酶陰性葡萄球菌3株、真菌2株。大腸桿菌分離率最高,達33.3%,其次為金黃色葡萄球菌,分離率為25.9%。2.分離得到的主要病原菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、蠟狀芽孢桿菌、無乳鏈球菌,均對氯霉素、四環(huán)素、左氟沙星和阿米卡星等藥物表現(xiàn)出高度敏感,而對青霉素、萬古霉素、環(huán)丙沙星、氨芐西林、頭孢唑啉和慶大霉素等常用藥表現(xiàn)中度或重度耐藥。3.建立了一種直接以菌液作為模板,能夠一次性檢測蠟狀芽孢桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌4種奶山羊乳房炎主要致病菌的多重PCR檢測方法。
[Abstract]:Dairy goat mastitis is one of the most common and harmful diseases in the dairy goat breeding industry. It not only causes serious economic losses to the breeders, but also threatens the health of the consumers of goat milk and its related milk products, resulting in hidden dangers of food safety. The etiology of dairy goat mastitis is complicated, which is related to pathogenic microorganism, animal itself, feeding management and so on. There are many kinds of pathogenic microorganisms and there are great regional differences, which brings great difficulties to the diagnosis and treatment of the disease. At present, there is no diagnostic method for rapid and accurate diagnosis of dairy goat mastitis and accurate location of pathogenic microorganisms in China. This study mainly focuses on dairy goat mastitis in some parts of Shaanxi Province. In order to provide a theoretical basis for the diagnosis and treatment of mastitis in dairy goats. In this experiment, 55 milk samples of clinical dairy goat mastitis were isolated and identified from 11 farms randomly selected from Fuping County and Longxian County, Shaanxi Province, and drug sensitivity tests were carried out for the main pathogens. A multiplex PCR detection method was established. The results are as follows: 1. Among them, 18 strains of Escherichia coli, 14 strains of Staphylococcus aureus, 7 strains of Bacillus cereus, 6 strains of Pseudomonas aeruginosa and 4 strains of Streptococcus lactococcus were isolated. 3 strains of coagulase negative staphylococcus and 2 strains of fungi. The isolation rate of Escherichia coli was the highest, up to 33. 3%, followed by Staphylococcus aureus, and the isolation rate was 25. 9. 2. Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Streptococcus lactococcus were all highly sensitive to chloramphenicol, tetracycline, levofloxacin and amikacin, but highly sensitive to penicillin and vancomycin. Ciprofloxacin, ampicillin, cefazolin and gentamycin, and other commonly used drugs showed moderate or severe drug resistance. 3. A multiplex PCR method was developed for the detection of four major pathogens of mastitis in dairy goats, I. e., Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus and Escherichia coli.
【學位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S858.27

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