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三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合對(duì)雄性小鼠體液免疫的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2018-11-12 08:25
【摘要】:三聚氰胺(Melamine, MA)作為重要的有機(jī)化工原料被廣泛應(yīng)用于人們的生產(chǎn)、生活中,三聚氰胺在遇到強(qiáng)酸、強(qiáng)堿胺基被羥基取代發(fā)生水解,生成三聚氰酸。三聚氰胺和三聚氰酸聯(lián)合作用對(duì)動(dòng)物機(jī)體毒性增加,主要導(dǎo)致動(dòng)物腎臟毒性增強(qiáng)。目前,關(guān)于該類化合物對(duì)免疫系統(tǒng)影響的研究報(bào)道很少,Lazarova在2004年報(bào)道了由于接觸乙烯脲三聚氰胺甲醛和三聚氰胺甲醛發(fā)生過(guò)敏而感染紡織性皮炎的事件,引起作者關(guān)于該類化合物對(duì)動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)危害的思考,本論文旨在研究三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合對(duì)雄性小鼠體液免疫的影響,為完善三聚氰胺與三聚氰酸的免疫毒理學(xué)評(píng)價(jià)資料提供理論依據(jù)。試驗(yàn)一三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合對(duì)攻毒大腸桿菌小鼠抵抗力影響研究方法:將144只雄性KM小鼠隨機(jī)分為8組,空白對(duì)照組、大腸桿菌陽(yáng)性對(duì)照組,三聚氰胺高、中、低劑量組(50mg/kg、10 mg/kg、2mg/kg)、三聚氰胺與三聚氰酸聯(lián)合高、中、低(25+25 mg/kg、5+5 mg/kg、1+1 mg/kg)劑量組,試驗(yàn)組隔天灌胃15d后,大腸桿菌陽(yáng)性對(duì)照組和試驗(yàn)組腹腔注射大腸桿菌,48 h后檢測(cè)小鼠脾臟T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、血清溶血素光密度值、小鼠遲發(fā)性變態(tài)免疫反應(yīng)等指標(biāo)。結(jié)果表明:①三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合對(duì)小鼠脾臟指數(shù)無(wú)顯著性變化(P0.05)。②三聚氰胺組和聯(lián)合攻毒組會(huì)使B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率降低,混合高劑量組轉(zhuǎn)化率最低(P0.05)。③二者聯(lián)合攻毒時(shí)會(huì)使小鼠血清溶血素光密度值降低(P0.01)。④三聚氰胺和與三聚氰酸聯(lián)合都是隨著攻毒劑量的升高T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率呈現(xiàn)出下降趨勢(shì),但未出現(xiàn)顯著性變化(P0.05)。⑤遲發(fā)型變態(tài)免疫反應(yīng)發(fā)現(xiàn)三聚氰胺高劑量組、聯(lián)合中、高劑量組會(huì)使小鼠足趾部增厚度下降,差異極顯著(P0.01)。說(shuō)明,三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合能夠降低小鼠對(duì)大腸桿菌的抵抗力。試驗(yàn)二 三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合對(duì)雄性小鼠脾臟漿細(xì)胞及其相關(guān)免疫球蛋白、補(bǔ)體的影響研究研究方法:將42只體重為18-22g的雄性小鼠隨機(jī)分為7組,空白對(duì)照組,三聚氰胺低、中、高劑量組,三聚氰胺與三聚氰酸聯(lián)合低、中、高劑量組,劑量同試驗(yàn)一,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟漿細(xì)胞細(xì)胞表面MarkerCD138+含量變化,western blot檢測(cè)小鼠脾臟Blimp-1蛋白表達(dá)量,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)小鼠血清抗體IgG、sIgA和補(bǔ)體C3。結(jié)果表明:①三聚氰胺單獨(dú)和聯(lián)合攻毒均可以導(dǎo)致Blimp-1蛋白表達(dá)下降,而且隨著攻毒濃度的升高呈遞減趨勢(shì),聯(lián)合攻毒組漿細(xì)胞MarkerCD138+含量極顯著降低(P0.01),說(shuō)明該類化合物劑能夠使能夠通過(guò)降低小鼠脾臟Blimp-1調(diào)控蛋白來(lái)降低脾臟漿細(xì)胞表面Marker CD138+蛋白,在一定程度上干擾漿細(xì)胞的活性。②低劑量的三聚氰胺會(huì)使IgG得含量降低(P0.05),三聚氰胺與三聚氰酸聯(lián)合中劑量也會(huì)使sIgA含量降低(P0.05)。③聯(lián)合攻毒作用下,小鼠血清補(bǔ)體C3含量降低,其中,中劑量組差異顯著(P0.05),高劑量組差異極顯著(P0.01)。說(shuō)明該類化合物能夠影響機(jī)體的體液免疫水平。試驗(yàn)三三聚氰胺及其與三聚氰酸對(duì)雄性小鼠Tfh細(xì)胞和Th2細(xì)胞亞群相關(guān)細(xì)胞因子的影響研究方法:小鼠分組及處理同試驗(yàn)二,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟Tfh細(xì)胞表面Marker CD4+CXCR5+含量,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)小鼠血清IL-4、IL-6、IL-10、IL-21的含量,western blot檢測(cè)小鼠脾臟GATA-3蛋白表達(dá)量,qRT PCR檢測(cè)GATA-3 mRNA基因表達(dá)水平。結(jié)果表明:①三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合對(duì)小鼠Tfh脾臟細(xì)胞表面MarkerCD4+CXCR5+含量變化無(wú)影響(P0.05),聯(lián)合高劑量組會(huì)使小鼠血清中的IL-21蛋白含量極顯著下降(P0.01)。②小鼠血清IL-4、IL-6、IL-10變化顯示,二者聯(lián)合會(huì)使IL-4含量降低(P0.05或P0.01),二者聯(lián)合也會(huì)使IL-4含量降低,差異極顯著(P0.01);三聚氰胺單獨(dú)與聯(lián)合攻毒均能使小鼠血清中的IL-6含量降低,混合攻毒下降極顯著(P0.01);同時(shí),各攻毒組都能使IL-10含量極顯著下降(P0.01)。③GATA-3蛋白和GATA-3 mRNA表達(dá)水平顯示,聯(lián)合攻毒時(shí)隨著攻毒劑量的升高,GATA-3蛋白表達(dá)量逐漸降低,當(dāng)攻毒劑量達(dá)到25+25 mg/kg時(shí),GATA-3蛋白表達(dá)量最低,差異顯著。(P0.05);各攻毒組GATA-3 mRNA的表達(dá)水平雖與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P0.05),但也均有所降低,說(shuō)明三聚氰胺及其與三聚氰酸聯(lián)合高劑量組可能會(huì)通過(guò)抑制Gata3 mRNA基因表達(dá)來(lái)降低Gata-3蛋白的生成,提示動(dòng)物機(jī)體內(nèi)Th2型細(xì)胞受到影響,從而干擾Th2細(xì)胞合成分泌相關(guān)細(xì)胞因子,從而對(duì)體液免疫產(chǎn)生抑制作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S859.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2326593

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