【摘要】：試驗旨在研究程序化冷凍前后小鼠正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3蛋白的分布及轉(zhuǎn)錄水平的差異表達(dá)情況,為闡明哺乳動物胚胎在抗凍過程中的相關(guān)調(diào)控機(jī)制提供理論依據(jù)。試驗選用ICR系雌性小鼠,從妊娠第5天小鼠子宮回收正常孵化囊胚;構(gòu)建延遲著床模型獲取小鼠休眠胚胎,利用激光共聚焦和實時熒光定量PCR技術(shù)對各組胚胎進(jìn)行細(xì)胞免疫熒光和C3mRNA相對表達(dá)量的檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn),程序化冷凍前后的正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平均有表達(dá);正常孵化囊胚經(jīng)冷凍處理后C3mRNA相對表達(dá)量顯著上調(diào)(P0.05);休眠胚胎冷凍后C3mRNA相對表達(dá)量與冷凍前相比顯著下調(diào)(P0.05);冷凍前休眠胚胎C3mRNA相對表達(dá)量顯著高于冷凍前正常孵化囊胚(P0.05);冷凍后休眠胚胎C3mRNA相對表達(dá)量顯著低于冷凍后正常孵化囊胚(P0.05)。結(jié)果表明,胚胎中C3基因在轉(zhuǎn)錄水平的下調(diào)表達(dá)對胚胎抗凍具有一定的積極作用,C3基因很可能參與了胚胎抗凍過程的相關(guān)調(diào)控。
[Abstract]:The purpose of this study was to study the distribution of C3 protein and the differential expression of transcription level in normal hatched blastocysts and dormant embryos before and after programmed freezing, and to provide a theoretical basis for elucidating the regulation mechanism of mammalian embryos in the process of freezing resistance. The normal hatched blastocysts were recovered from the uterus of the ICR female mice on the 5th day of gestation. Mouse dormant embryos were obtained by using delayed implantation model. The relative expression of C3mRNA and cellular immunofluorescence were detected by laser confocal and real-time fluorescence quantitative PCR. The results showed that C3 was expressed in normal blastocysts and dormant embryos before and after programmed freezing, and the relative expression of C3mRNA in normal hatched blastocysts was up-regulated after freezing (P0.05). The relative expression of C3mRNA in dormant embryos after freezing was significantly lower than that before freezing (P0.05), and the relative expression of C3mRNA in dormant embryos before freezing was significantly higher than that in normal hatched blastocysts before freezing (P0.05). The relative expression of C3mRNA in frozen dormant embryos was significantly lower than that in normal blastocysts after freezing (P0.05). The results showed that the down-regulation of C3 gene expression at the transcriptional level in embryos had a positive effect on embryo antifreeze, and C3 gene might be involved in the regulation of embryo antifreeze process.
【作者單位】： 北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院獸醫(yī)學(xué)(中醫(yī)藥)北京市重點實驗室;
【基金】：國家自然基金面上項目(31272526) 2013年度北京市教委北京市屬高等學(xué)校創(chuàng)新團(tuán)隊建設(shè)與教師職業(yè)發(fā)展計劃項目(PXM2013_014207_000067)
【分類號】：S814.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2312731